李艷 王淼淼 李敏 周乃慧

215006蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科

腺苷對(duì)人毛囊生長的促進(jìn)作用及對(duì)血管生成素表達(dá)的影響

李艷 王淼淼 李敏 周乃慧

215006蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科

目的探討腺苷對(duì)人毛囊生長的促進(jìn)作用及對(duì)血管生成素表達(dá)的影響。方法分離完整的人頭皮生長期毛囊，分成6組，分別加入0、0.1、1、10、100、1 000 μmol/L腺苷作用，每個(gè)濃度組再分成兩個(gè)亞組，其中一個(gè)亞組加入0.8 mg/L抗人血管生成素抗體，另外一個(gè)亞組不加抗體，顯微鏡下測量6 d內(nèi)毛囊的生長長度。利用兩步酶法分離培養(yǎng)人毛乳頭細(xì)胞，分組同上，作用48 h后，噻唑藍(lán)法檢測細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期，逆轉(zhuǎn)錄（RT）?PCR和ELISA分別檢測人毛乳頭細(xì)胞血管生成素mRNA和細(xì)胞上清液中血管生成素蛋白的表達(dá)。結(jié)果與不加腺苷的對(duì)照組相比，10～1 000 μmol/L腺苷能夠明顯促進(jìn)體外培養(yǎng)的人毛囊生長（F=377.776，P＜0.05），其中以100 μmol/L腺苷的促進(jìn)作用最為顯著（P＜0.05），加入抗人血管生成素抗體能夠部分拮抗腺苷促進(jìn)人毛囊生長的作用。與對(duì)照組相比，0.1～1 000 μmol/L腺苷能夠明顯促進(jìn)體外培養(yǎng)的人毛乳頭細(xì)胞增殖（F=230.067，P＜0.05），其中以10 μmol/L和100 μmol/L腺苷促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用最為顯著（均P＜0.05），加入抗人血管生成素抗體能夠部分拮抗腺苷促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用。流式細(xì)胞儀檢測顯示，與對(duì)照組相比，10～1 000 μmol/L腺苷能夠顯著下調(diào)毛乳頭細(xì)胞G1期細(xì)胞比例（F=75.5，P＜0.05），并顯著上調(diào)G2期（F=15.7，P＜ 0.05）和S期（F=81.8，P＜ 0.05）細(xì)胞比例。而且，與對(duì)照組相比，10 μmol/L和100 μmol/L腺苷能夠明顯促進(jìn)毛乳頭細(xì)胞表達(dá)血管生成素mRNA（F=942.630，P＜0.05）和血管生成素蛋白（F=148.544，P＜0.05）。結(jié)論 腺苷在體外具有促進(jìn)人毛囊生長和毛乳頭細(xì)胞增殖的作用，其機(jī)制可能與上調(diào)血管生成素表達(dá)有關(guān)。

腺苷；血管生成素類；毛囊；細(xì)胞增殖；細(xì)胞周期；毛乳頭細(xì)胞

腺苷是一種內(nèi)源性嘌呤核苷酸，由三磷酸腺苷逐步脫磷酸化形成，具有擴(kuò)張血管及減輕組織缺血性損傷等多種生物學(xué)效應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，人毛囊毛乳頭細(xì)胞和外毛根鞘細(xì)胞均能表達(dá)腺苷受體，腺苷與其受體結(jié)合后激活一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，具有促進(jìn)毛發(fā)生長的作用，其機(jī)制可能與上調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和成纖維細(xì)胞生長因子7（fibroblast growth factor?7，F(xiàn)GF?7）的表達(dá)有關(guān)［1?2］，但確切機(jī)制尚不明確。以往研究［3?6］證實(shí)，血管生成素是一種新的毛囊起源的血管生成因子，在體內(nèi)和體外均具有促進(jìn)毛囊生長和毛乳頭細(xì)胞增殖的作用，而腺苷能否調(diào)控毛囊及毛囊細(xì)胞中血管生成素的表達(dá)，目前尚未見報(bào)道。因此，我們探討腺苷對(duì)體外培養(yǎng)的人毛囊生長的作用及對(duì)血管生成素表達(dá)的影響。

材料與方法

一、主要試劑與儀器

人枕部頭皮取自本院腦外科6例顱腦外傷患者手術(shù)切除的頭皮，年齡30～45歲，離體6 h以內(nèi)。本研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。L?谷氨酰胺、分離酶、胰蛋白酶、膠原酶、胎牛血清和Williams E培養(yǎng)基（含2 mmol/L L谷氨酰胺、100 U/ml青霉素和100 μg/ml鏈霉素）均產(chǎn)自美國Gibco公司，Dulbecco Modified Eagle Media（DMEM，美國Hyclone公司），抗人血管生成素抗體和血管生成素ELISA試劑盒（美國R&D公司），Trizol Reagent（美國Invitrogen公司），TaKaRa RNA PCR試劑盒（AMV）Ver.3.0（大連TaKaRa公司），碘化丙啶（美國Molecular probe公司）。680型酶標(biāo)儀（美國Bio?Rad公司），流式細(xì)胞儀FACScan（美國Becton公司）。

二、方法

1.人毛囊培養(yǎng)及生長測定：人毛囊分離參見文獻(xiàn)［7］。手術(shù)切除的標(biāo)本常規(guī)消毒后，用手術(shù)刀片將真皮和皮下組織交界處分開，解剖顯微鏡下用眼科鑷拔出皮下脂肪中的毛囊，選擇完整的生長期Ⅳ期毛囊用于實(shí)驗(yàn)。毛囊培養(yǎng)采用24孔板，每孔1個(gè)毛囊，加500 μl Williams E培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)分為6組，分別加入0、0.1、1、10、100、1 000 μmol/L腺苷，每個(gè)濃度再分成兩個(gè)亞組，一個(gè)加入終濃度為0.8 mg/L抗人血管生成素抗體，另外一個(gè)不加抗體，抗人血管生成素抗體的終濃度設(shè)定參見文獻(xiàn)［3］，每組8個(gè)復(fù)孔，隔天換液1次，共同培養(yǎng)6 d，于第0天和第6天分別在顯微鏡下測量每根毛囊的長度，兩次的差值即為該毛囊6 d內(nèi)的生長長度。

2.人毛乳頭細(xì)胞培養(yǎng)及增殖實(shí)驗(yàn)：人毛乳頭細(xì)胞培養(yǎng)采用兩步酶消化法，參見文獻(xiàn)［8?9］。分離得到純化的毛乳頭以DMEM（含15%胎牛血清，100 U/ml青霉素和100 mg/L鏈霉素）懸浮后接種于25 cm2培養(yǎng)瓶，2～3周后細(xì)胞大部分生長融合。取對(duì)數(shù)生長期的第3代人毛乳頭細(xì)胞，0.25%胰蛋白酶消化后，以1.5×105/ml的密度接種于96孔板，每孔100 μl，待細(xì)胞貼壁后換用無血清DMEM，加入0、0.1、1、10、100、1 000 μmol/L腺苷，每個(gè)濃度再分成兩個(gè)亞組，一個(gè)加入終濃度為0.8 mg/L抗人血管生成素抗體，另外一個(gè)不加抗體，每組6個(gè)復(fù)孔。培養(yǎng)48 h后，每孔加噻唑藍(lán)（MTT，5 g/L）15 μl，37 ℃孵育4 h后棄去培養(yǎng)基，每孔加150 μl二甲基亞砜（DMSO），避光，充分振蕩混勻，酶標(biāo)儀下于490 nm波長處測定吸光度值（A490）。以A490值代表細(xì)胞增殖活性。

3.細(xì)胞周期測定：取對(duì)數(shù)生長期的第3代人毛乳頭細(xì)胞，接種于25 cm2培養(yǎng)瓶（每瓶1.2×106個(gè)細(xì)胞），細(xì)胞貼壁后換用無血清培養(yǎng)基，加入腺苷，使其終濃度分別為0、0.1、1、10、100和1 000 μmol/L，每個(gè)濃度3瓶細(xì)胞。48 h后，采用0.25%胰蛋白酶消化細(xì)胞，PBS洗滌2次，離心收集細(xì)胞，以75%冷乙醇固定，-20℃保存。檢測時(shí)，PBS洗滌細(xì)胞3次，加入200 μl含50 mg/L Triton的碘化丙啶，振蕩成單細(xì)胞懸液，避光，室溫靜置30 min，300目濾網(wǎng)過濾，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期。

4.半定量RT?PCR檢測血管生成素mRNA的表達(dá)：取對(duì)數(shù)生長期的第3代人毛乳頭細(xì)胞，0.25%胰蛋白酶消化后，以1.5×105/ml的密度接種于6孔板，每孔2 ml，待細(xì)胞貼壁后換用無血清DMEM，加入0、10、100 μmol/L腺苷，培養(yǎng)48 h后，收集細(xì)胞上清液于10 ml離心管內(nèi)，2 000×g離心5 min，以去除雜質(zhì)，上清液按1次用量分裝，-20℃保存，用于下列試驗(yàn)。細(xì)胞以預(yù)冷的PBS洗滌后，按TRizol試劑盒提取總RNA，將其終濃度調(diào)整為200 mg/L。按照試劑盒說明，取200 ng總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。人血管生成素：上游引物5′?CCTGGGCGTTTTGTTGTTGG?3′，下游引物5′?TGTGGCTCGGTACTGGCATG?3′，產(chǎn)物大小為352 bp；人3磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）：上游引物 5′?CTGAGCTGAACGGGAAGCTCAC?3′，下游 引 物 5′?GCTCAGTGTAGCCCAGGATGC?3′，產(chǎn)物大小為220 bp。PCR反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性5 min，95℃變性15 s，62℃退火10 s，72℃延伸14 s，總共30個(gè)循環(huán)，最后72℃終末延伸7 min。擴(kuò)增結(jié)束后，取10 μl進(jìn)行電泳檢測，并用Gene Tools軟件進(jìn)行血管生成素mRNA相對(duì)表達(dá)量分析。

5.ELISA檢測血管生成素蛋白表達(dá)：取方法4中收集的細(xì)胞上清液，按ELISA試劑盒說明檢測血管生成素蛋白含量。

6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果以±s表示，采用單因素方差分析和獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，兩兩比較采用最小顯著差異（LSD）檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、腺苷對(duì)人毛囊生長的影響及抗人血管生成素抗體對(duì)腺苷的拮抗作用

培養(yǎng)6 d后，與對(duì)照組相比，10、100和1 000 μmol/L腺苷能夠顯著促進(jìn)人毛囊生長（均P＜0.05），其中以100 μmol/L腺苷作用最為顯著（P＜0.05）。與不加血管生成素抗體的同一濃度腺苷組相比，加入血管生成素抗體后10、100、1 000 μmol/L腺苷組人毛囊的生長受到顯著抑制（均P＜0.05），但仍快于對(duì)照組（均P＜0.05）。見表1。

二、腺苷對(duì)人毛乳頭細(xì)胞增殖的影響

作用48h后，與對(duì)照組相比，0.1～1000μmol/L腺苷均能夠明顯促進(jìn)人毛乳頭細(xì)胞增殖（均P＜0.05），其中以 10 μmol/L 和 100 μmol/L 腺苷促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用最為顯著（均P＜0.05），而10 μmol/L與100 μmol/L腺苷組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與不加血管生成素抗體的同一濃度腺苷組相比，加入血管生成素抗體后，0.1、1、10、100、1 000 μmol/L腺苷組毛乳頭細(xì)胞的增殖受到顯著抑制（P＜0.05），但仍快于對(duì)照組（均P＜0.05）。見表2。

三、腺苷對(duì)人毛乳頭細(xì)胞周期的影響

作用48 h后，與對(duì)照組相比，10、100、1 000 μmol/L腺苷組G1期細(xì)胞比例顯著降低（均P＜0.05），G2期和S期細(xì)胞比例顯著增高（均P＜0.05）。100 μmol/L腺苷組G1期細(xì)胞比例明顯低于10 μmol/L和1 000 μmol/L腺苷組（均P＜0.05），且G2期和S期細(xì)胞比例明顯高于10 μmol/L和1 000 μmol/L腺苷組（均P＜0.05），但10 μmol/L與1 000 μmol/L腺苷組相比，G1期、G2期和S期細(xì)胞比例差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表1 不同濃度腺苷作用于含或不含血管生成素抗體的毛囊6 d后毛囊生長長度比較（mm±s）

表1 不同濃度腺苷作用于含或不含血管生成素抗體的毛囊6 d后毛囊生長長度比較（mm±s）

注：n=8。a：與同一亞組對(duì)照組相比，P＜0.05；e：與同一亞組0.1 μmol/L腺苷組相比，P＜0.05；d：與同一亞組1 μmol/L腺苷組相比，P＜ 0.05；e：與同一亞組10 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；e：與同一亞組100 μmol/L腺苷組相比，P＜0.05

腺苷濃度（μmol/L）0（對(duì)照組）0.1 1 10 100 1 000 F值P值注：n=8。a：與同一亞組對(duì)照組相比，P ＜ 0.05；b：與同一亞組0.1 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；c：與同一亞組1 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；d：與同一亞組10 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；e：與同一亞組100 μmol/L腺苷組相比，P＜0.05血管生成素抗體不含1.23±0.04 1.25±0.04 1.26±0.03 1.49±0.02abc 1.80±0.05abcd 1.66±0.02abcde 377.776＜0.01 t值P值含1.23±0.03 1.24±0.03 1.25±0.03 1.43±0.01abc 1.53±0.02abcd 1.43±0.02abce 209.894＜0.01 0.070 0.629 0.271 8.647 13.214 23.635＞0.05＞0.05＞0.05＜0.01＜0.01＜0.01表2 不同濃度腺苷作用于含或不含血管生成素抗體的毛乳頭細(xì)胞48 h后毛乳頭細(xì)胞的增殖活性比較（A490，±s）腺苷濃度（μmol/L）0（對(duì)照組）0.1 1 10 100 1 000 F值P值血管生成素抗體不含0.246±0.005 0.260±0.003a 0.269±0.003ab 0.312±0.004abc 0.314±0.007abc 0.292±0.003abcde 230.067＜0.01含0.246±0.005 0.253±0.003a 0.260±0.004ab 0.272±0.004abc 0.272±0.003abc 0.267±0.003abcde 50.165＜0.01 t值0.114 3.792 4.198 17.231 13.000 15.386 P值＞0.05＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01

表2 不同濃度腺苷作用于含或不含血管生成素抗體的毛乳頭細(xì)胞48h后毛乳頭細(xì)胞的增殖活性比較（A490±s）

表2 不同濃度腺苷作用于含或不含血管生成素抗體的毛乳頭細(xì)胞48h后毛乳頭細(xì)胞的增殖活性比較（A490±s）

注：n=6。a：與同一亞組對(duì)照組相比，P ＜ 0.05；b：與同一亞組0.1 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；c：與同一亞組1 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；d：與同一亞組10 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；e：與同一亞組100 μmol/L腺苷組相比，P＜0.05

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四、腺苷對(duì)人毛乳頭細(xì)胞血管生成素mRNA表達(dá)的影響

見圖1。0、10、100 μmol/L腺苷作用人毛乳頭細(xì)胞48 h后，血管生成素mRNA的相對(duì)表達(dá)量分別為0.346±0.014、0.594±0.009和0.755±0.012。與對(duì)照組相比，10、100 μmol/L腺苷能夠明顯促進(jìn)人毛乳頭細(xì)胞表達(dá)血管生成素mRNA（F=942.630，P＜0.05），且100 μmol/L腺苷組血管生成素mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯高于10 μmol/L腺苷組（P＜0.05）。

表3 不同濃度腺苷作用48 h后毛乳頭細(xì)胞細(xì)胞周期分布（±s）

表3 不同濃度腺苷作用48 h后毛乳頭細(xì)胞細(xì)胞周期分布（±s）

注：n=3。a：與對(duì)照組相比，P ＜ 0.05；b：與0.1 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；c：與1 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；d：與10 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05；e：與100 μmol/L腺苷組相比，P ＜ 0.05

腺苷濃度（μmol/L）0（對(duì)照組）0.1 1 10 100 1 000 F值P值細(xì)胞周期（%）G1 94.73±0.64 93.66±0.77 93.39±0.22 88.41±1.06abc 84.63±0.73abcd 88.57±1.03abce 75.5＜0.01 G2 2.83±0.51 2.99±0.60 3.19±0.24 4.25±0.28abc 5.89±0.86abcd 4.18±0.17abce 15.7＜0.01 S 1.46±0.15 2.32±0.19 2.30±0.22 6.93±1.06abc 8.71±0.33abcd 6.69±0.86abce 81.8＜0.01

圖1 不同濃度腺苷對(duì)人毛乳頭細(xì)胞血管生成素mRNA表達(dá)的影響 M：標(biāo)準(zhǔn)參照物；1～3：分別示0、10和100 μmol/L腺苷組血管生成素的表達(dá)；4～6：分別示0、10和100 μmol/L腺苷組3磷酸甘油醛脫氫酶的表達(dá)

五、腺苷對(duì)人毛乳頭細(xì)胞上清液中血管生成素蛋白表達(dá)的影響

ELISA檢測顯示，10和100 μmol/L腺苷組細(xì)胞上清液中血管生成素蛋白的濃度分別為（251.484±9.869）ng/L和（278.296± 4.249）ng/L，明顯高于對(duì)照組［（185.20 ± 4.869）ng/L，F(xiàn)=148.544，P＜0.05］，且100 μmol/L腺苷組明顯高于10 μmol/L腺苷組（P＜0.05）。

討 論

毛囊最為顯著的特點(diǎn)是始終處于生長期、退行期和休止期的周期性循環(huán)中。在毛囊的形態(tài)學(xué)發(fā)生和周期性循環(huán)中，許多激素、生長因子、細(xì)胞因子及其受體等相互作用，共同調(diào)控毛發(fā)的生長與脫落［10］。腺苷作為一種內(nèi)源性嘌呤核苷酸，在體內(nèi)具有擴(kuò)張血管、保護(hù)組織缺血性損傷等多種生物學(xué)效應(yīng)，以往的研究發(fā)現(xiàn)，腺苷具有促進(jìn)毛發(fā)生長的作用，其機(jī)理可能與上調(diào)VEGF和FGF?7的表達(dá)有關(guān)［1?2］。血管生成素是一種新的具有促進(jìn)毛發(fā)生長的血管生成因子，到目前為止尚不明確腺苷是否能夠調(diào)控毛囊及毛囊細(xì)胞中血管生成素的表達(dá)。

本研究顯示，10～1 000 μmol/L腺苷能夠明顯促進(jìn)人毛囊生長，其中以100 μmol/L腺苷作用最為顯著；0.1～1 000 μmol/L腺苷能夠明顯促進(jìn)體外培養(yǎng)的人毛乳頭細(xì)胞增殖，其中以10 μmol/L和100 μmol/L腺苷作用最為顯著。流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)，10～1 000 μmol/L腺苷能夠明顯促進(jìn)毛乳頭細(xì)胞由G1期進(jìn)入G2期和S期，從而發(fā)揮促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用。提示腺苷在體外具有促進(jìn)人毛囊生長和毛乳頭細(xì)胞增殖的作用。鑒于毛乳頭細(xì)胞在毛囊的生長發(fā)育及周期性循環(huán)中起關(guān)鍵作用，毛乳頭細(xì)胞的數(shù)量在一定程度上決定了毛囊的直徑及毛發(fā)的粗細(xì)［11］，因此腺苷在體外促進(jìn)人毛囊生長可能與其促進(jìn)毛乳頭細(xì)胞增殖有關(guān)。

為進(jìn)一步探討腺苷促進(jìn)毛囊生長和毛乳頭細(xì)胞增殖的可能作用機(jī)制，我們在不同濃度腺苷作用的毛囊和毛乳頭細(xì)胞中同時(shí)加入抗人血管生成素抗體，結(jié)果顯示，抗人血管生成素抗體能夠部分拮抗腺苷對(duì)人毛囊生長和毛乳頭細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用，半定量RT?PCR和ELISA檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腺苷能夠上調(diào)人毛乳頭細(xì)胞表達(dá)血管生成素mRNA和蛋白。由此可見，腺苷在體外具有促進(jìn)人毛囊生長的作用，其機(jī)制可能與促進(jìn)毛乳頭細(xì)胞增殖有關(guān)，腺苷誘導(dǎo)表達(dá)的血管生成素部分參與腺苷促進(jìn)人毛囊生長和毛乳頭細(xì)胞增殖的作用。但是，腺苷在體內(nèi)是否同樣具有促進(jìn)毛發(fā)生長的作用及其如何調(diào)控血管生成素的表達(dá)仍有待進(jìn)一步深入研究。

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Promotive effects of adenosine on human hair follicle growth and angiogenin expression

Li Yan,Wang Miaomiao,Li Min,Zhou Naihui
Department of Dermatology,the First Affiliated Hospital of Soochow University,Suzhou 215006,China Corresponding author:Zhou Naihui,Email:zhounaihui@163.com

ObjectiveTo evaluate the promotive effects of adenosine on human hair follicle growth and angiogenin expression.MethodsIntact human hair follicles in the anagen phase were isolated from the scalp,and then divided into 6 groups to be treated with adenosine at different concentrations of 0,0.1,1,10,100 and 1 000 μmol/L respectively.Each adenosine group was further divided into 2 subgroups to be treated either with or without 0.8 mg/L anti?human angiogenin antibody,and hair follicles receiving no treatment served as the control group.The growth length of hair follicles during 6?day culture was measured by using a microscope.Human dermal papilla cells were isolated by a two?step enzyme digestion method,and then classified into the same groups as above.After 48?hour culture,methyl thiazolyl tetrazolium（MTT）assay was performed to evaluate cellular proliferative activity,flow cytometry to analyze cell cycle,reverse transcription（RT）?PCR to measure the mRNA expression of angiogenin in dermal papilla cells,and enzyme?linked immunosorbent assay（ELISA）to measure the protein expression of angiogenin in the culture supernatant of dermal papilla cells.ResultsCompared with the control group,the 10-1 000 μmol/L adenosine?treated groups showed significantly increased growth of hair folliclesin vitro（F=377.776,P＜ 0.05）,and 100 μmol/L adenosine had the strongest promotive effect（P＜ 0.05）.However,anti?human angiogenin antibody could partly antagonize the promotive effect.Compared with the control group,the proliferative activity of human dermal papilla cells was significantly enhanced in the 0.1-1 000 μmol/L adenosine?treated groups（F=230.067,P＜ 0.05）,and adenosine at 10 and 100 μmol/L had the strongest enhancing effects（bothP＜ 0.05）.Similarly,anti?human angiogenin antibody could partly antagonize the enhancing effects of adenosine on cell proliferation.As flow cytometry showed,compared with the control group,the 10-1 000 μmol/L adenosine?treated groups showed significantly lower proportions of dermal papilla cells in G1 phase（F=75.5,P＜ 0.05）,but higher proportions of cells in G2 phase（F=15.7,P＜ 0.05）and S phase（F=81.8,P＜ 0.05）.In addition,the mRNA and protein expressions of angiogenin were significantly up?regulated in human dermal papilla cells treated by 10 and 100 μmol/L adenosine compared with the control group（F=942.630,148.544,respectively,bothP＜ 0.05）.ConclusionAdenosine can promote the growth of human hair follicles and proliferation of dermal papilla cells,likely by up?regulating angiogenin expression.

Adenosine;Angiogenins;Hair follicle;Cell proliferation;Cell cycle;Dermal papilla cells

周乃慧，Email：zhounaihui@163.com

10.3760/cma.j.issn.0412?4030.2016.12.003

江蘇省自然科學(xué)基金（BK20140294、BK20130267）

Fund program:Natural Science Foundation of Jiangsu Province of China（BK20140294,BK20130267）

2016?03?14）

（本文編輯：尚淑賢）