劉婷婷 周文飛 國(guó)瑋
摘要:該文研究了外界因素對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明:pH值影響桑椹色素的穩(wěn)定性;在20℃低溫條件下桑椹色素穩(wěn)定性較高,且在高溫短時(shí)條件下,穩(wěn)定性也比較高;對(duì)氧化劑H2O2的耐氧化性差;對(duì)普通還原劑維生素C穩(wěn)定;濃度大于10%的高濃度蔗糖對(duì)桑椹色素有一定影響。
關(guān)鍵詞:桑椹色素;提取;穩(wěn)定性
1 引言
桑椹又名桑棗、桑果、桑實(shí)、椹子、烏椹等,分布地區(qū)很廣[1-2]。桑甚不但果肉多汁,滋味甘美,而且具有諸多保健功能,自古以來就是保健食品[3-4]。
食用色素是食品添加的重要組成部分,它不僅廣泛應(yīng)用于飲料、酒類、糕點(diǎn)、糖果等食品,以改善其外觀品質(zhì),而且也普遍應(yīng)用于醫(yī)藥和化妝品生產(chǎn)。食用色素,特別是食用天然色素研究與開發(fā)有著廣闊的發(fā)展前景和巨大潛力。1971-1981年的10年間,各國(guó)發(fā)表專利總計(jì)126篇,而合成色素同期僅10篇。進(jìn)入80年代后,天然色素的研究進(jìn)入高潮,中國(guó)天然色素的研究起步較晚,基本是從20世紀(jì)70年代后期開始的,其中主要有重慶天府可樂公司的焦糖色素;天津輕工學(xué)院的甜菜紅、莧菜紅色素;江蘇省植物所的菊黃色素;林科院林產(chǎn)化工研究所的可可色素等[5]。
本文分析研究桑椹紅色素在幾種不同因素影響下的穩(wěn)定性變化情況。通過對(duì)桑椹紅色素在不同的pH值、溫度、糖等條件下對(duì)其進(jìn)行研究。
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
桑椹色素。
2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
實(shí)驗(yàn)試劑及藥品詳見表1.
2.3 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備
UV-2000型紫外可見分光光度計(jì),H2S-H恒溫水浴振蕩器,BS124S電子分析天平,JPT-2架盤天平,PB-10酸度計(jì)
2.4 實(shí)驗(yàn)方法
天然色素在食品加工及流通過程中容易受到外界條件的影響。測(cè)定桑椹色素在可見光區(qū)波長(zhǎng)下最大吸收峰,在此波長(zhǎng)下觀察不同pH值條件下色素的顏色變化,分別測(cè)定不同溫度加熱、不同蔗糖濃度下色素吸光度的變化,以及研究氧化還原劑對(duì)色素的影響。
2.4.1 pH值對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性影響實(shí)驗(yàn)。用檸檬酸和磷酸氫二鈉配制不同的pH梯度緩沖溶液,在6只試管中,分別吸入0.1 mL桑椹色素溶液,用不同pH值的梯度緩沖溶液稀釋至5 mL,搖勻觀察顏色變化。以各緩沖溶液為參比溶液,分別測(cè)定不同pH值下桑椹色素溶液的吸收光譜特性和吸光度,記錄數(shù)值。
2.4.2 蔗糖對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性影響實(shí)驗(yàn)。分別配制不同濃度梯度的蔗糖溶液,分別將0.1 mL的色素溶液用不同濃度蔗糖溶液稀釋至5 mL,靜置一段時(shí)間后(約30 min),以各濃度的蔗糖溶液為參比液,在最大吸收峰下測(cè)定其吸光度,記錄數(shù)值。
2.4.3 維生素C對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性影響實(shí)驗(yàn)。分別配制不同濃度梯度維生素C溶液,在各試管中吸入0.1 mL的色素溶液,分別稀釋至5 mL,靜置一段時(shí)間后(約30 min),以各濃度的維生素C溶液為參比液,在最大吸收峰下測(cè)定其吸光度,記錄數(shù)值。
2.4.4 溫度對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性影響實(shí)驗(yàn)。各取桑椹色素濃縮液0.4 mL加入五只試管中,用0.1%的HCl-100%乙醇提取劑稀釋至20 mL。分別在20℃、40℃、60℃、80℃、100℃下加熱2 h,30 min記錄一次數(shù)據(jù)。用提取劑做參比液,在最大吸收峰下測(cè)定其吸光度(A),并且計(jì)算色素的相對(duì)保存率。
2.4.5 H2O2對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性的影響。在試管中加入桑椹色素濃縮液0.4 mL,用3%的雙氧水稀釋至20 mL,搖勻并倒入比色皿中,以雙氧水為參比液,迅速在最大吸收峰讀取吸光值,每隔兩分鐘讀一次。
2.5 數(shù)據(jù)處理方法
本實(shí)驗(yàn)每個(gè)處理分別做三次平行,在確定這三次平行的數(shù)據(jù)穩(wěn)定的前提下,取其平均值作為分析的原始數(shù)據(jù)。其表達(dá)式如下:
波動(dòng)比率=(平行數(shù)據(jù)中的最大值-平行數(shù)據(jù)中的最小值)÷平行數(shù)據(jù)的平均值
如果波動(dòng)比率小于或等于5%,則取平行數(shù)據(jù)的平均值作為原始數(shù)據(jù),如果波動(dòng)比率大于5%,則將平行數(shù)據(jù)中的偏離中間數(shù)值最大的數(shù)據(jù)剔除,取其他兩個(gè)數(shù)據(jù)的平均值。
3 結(jié)果和分析
3.1 桑椹色素溶液的吸收光譜特性
以無水乙醇+0.1%HCl為參比液,用UV-2000紫外可見分光光度計(jì)測(cè)定色素提取液在不同波長(zhǎng)下的吸光度,在可見光區(qū)找出最大吸收峰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖1。由上圖可見,桑椹色素測(cè)定液在可見光區(qū)的最大吸收波長(zhǎng)在536 nm處。
3.2 外界因素對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性的影響
3.2.1 pH值對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性影響。pH對(duì)色素的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果詳見表2。
在溶液介質(zhì)中,花色苷會(huì)隨pH而有幾種結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)換。對(duì)于一個(gè)給定的pH值,在花色苷的四種結(jié)構(gòu)之間存在著平衡:藍(lán)色的醌式(脫水)堿、紅色的花色烊正離子、無色的甲醇假堿、和查耳酮。通常在pH值很低時(shí),花色苷的溶液呈現(xiàn)其最強(qiáng)的紅色。隨著pH的增大,花色苷的顏色退為無色,最后在高pH值時(shí)呈現(xiàn)紫色或藍(lán)色。
3.2.2 蔗糖對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性的影響。蔗糖對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖2。
圖2 蔗糖對(duì)桑椹色素的影響
由圖可見,蔗糖的濃度對(duì)桑椹色素的吸光度有影響,當(dāng)蔗糖濃度在10%以下時(shí),隨著蔗糖濃度提高,色素吸光度有提高的趨勢(shì);而高濃度蔗糖濃度反而使得該色素的吸光度降低。
3.2.3 維生素C對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。
從表中可知,在每個(gè)溫度下,隨著時(shí)間的增加,吸光度值逐漸減少,損失率逐漸增加;在較高溫度下,色素的損失更為明顯,在100℃下放置 ,損失率達(dá)28.4%,但是在短期內(nèi)損失率很低,因此使用高溫瞬時(shí)加熱的方法可最大限度地保持花色苷的含量。
3.2.5 H2O2對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性的影響。H2O2對(duì)色素穩(wěn)定性的影響結(jié)果如圖3。
雙氧水對(duì)桑椹色素的影響比較大,色素溶液迅速由粉紅色變?yōu)槿榘咨?,在? min色素吸光度隨著反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)迅速下降,后來趨于穩(wěn)定。因?yàn)樘烊簧厥巧镉袡C(jī)物質(zhì),但由于失去細(xì)胞膜等生物保持基質(zhì)的保護(hù),當(dāng)氧化劑存在時(shí),會(huì)直接氧化色素,使色素變色。在短時(shí)間內(nèi)反應(yīng)結(jié)束,結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,顏色也不發(fā)生持續(xù)性的變化。
本文主要研究了pH值、溫度、氧化劑、還原劑、糖等因素對(duì)桑椹色素穩(wěn)定性的影響。因時(shí)間的關(guān)系,未設(shè)計(jì)輔色劑的組合對(duì)提高色素穩(wěn)定性的效果。對(duì)本文所涉及領(lǐng)域的研究可以從上述視角展開以期獲得更大的突破。
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