龔團(tuán)蓮

（內(nèi)蒙古民族大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028042）

26株豬鏈球菌對抗菌藥物的敏感性分析

龔團(tuán)蓮

（內(nèi)蒙古民族大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028042）

采用紙片擴(kuò)散法對獸醫(yī)臨床分離的26株豬鏈球菌進(jìn)行了常用抗菌藥物的敏感性分析，結(jié)果表明，豬鏈球菌對頭孢噻肟及氨芐西林/舒巴坦敏感性最高，敏感菌株均占73.0%；其次是丁胺卡那霉素和鹽酸多西環(huán)素，敏感菌株分別占57.7%和50.0%；分離菌對四環(huán)素、慶大霉素、磺胺二甲氧嘧啶表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐藥性，耐藥率分別為92.3%、69.2%、69.2%；此外，分離菌對氯霉素、頭孢他啶、克林霉素、磺胺嘧啶鈉、復(fù)方新諾明也表現(xiàn)出一定的耐藥性，耐藥率均為57.7%。分離的豬鏈球菌對部分獸醫(yī)臨床常用抗菌藥物產(chǎn)生了較為嚴(yán)重的耐藥性，應(yīng)引起重視。

豬鏈球菌；耐藥性；監(jiān)測

引起豬鏈球菌病的鏈球菌種類包括豬鏈球菌、馬鏈球菌獸疫亞種（舊稱獸疫鏈球菌)和類豬鏈球菌等。近年來，由豬鏈球菌2型引起的豬敗血性鏈球菌病較為流行［1-3］。豬鏈球菌屬于鏈球菌科鏈球菌屬成員，為革蘭陽性球形或卵圓形細(xì)菌，不形成芽胞，亦無鞭毛，有的可形成莢膜，呈長短不一的鏈狀排列，需氧或兼性厭氧。在培養(yǎng)基中加入血液、血清及腹水等可促進(jìn)其生長。在加入上述營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)24 h，可形成無色露珠狀細(xì)小菌落［4］。豬鏈球菌的致病力取決于其產(chǎn)生毒素和酶的能力。該菌對高溫及一般消毒藥抵抗力不強(qiáng)，但組織或膿汁中的菌體，在干燥條件下可存活數(shù)周［5］。豬鏈球菌病是由鏈球菌C、D、E及L、R、S等群引起的多種疾病的總稱，根據(jù)莢膜多糖抗原的差異，可將其分為 35個(gè)血清型，即 1～34以及 1/2型［6］。豬鏈球菌病在世界各地均有發(fā)生，因血清型眾多、抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜，用疫苗預(yù)防該病具有一定局限性。在實(shí)際生產(chǎn)中，常采用抗菌藥物進(jìn)行預(yù)防和控制。隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，在藥物的選擇壓力下，豬鏈球菌對抗菌藥物產(chǎn)生了嚴(yán)重的耐藥性［7-10］。

目前，不論獸醫(yī)臨床還是人醫(yī)臨床，病原菌的耐藥現(xiàn)象已經(jīng)十分嚴(yán)重，并且有逐年上升的趨勢。為此，該研究對分離自獸醫(yī)臨床的26株豬鏈球菌進(jìn)行了常用抗菌藥物的敏感性試驗(yàn)，以期為獸醫(yī)臨床制定合理用藥方案提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 菌株：質(zhì)控菌株：豬鏈球菌ATCC 700794，購自美國微生物菌種保藏中心。臨床菌株：26株豬鏈球菌，由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)藥學(xué)專業(yè)教研室提供。

1.1.2 試劑與培養(yǎng)基：PPLO固體培養(yǎng)基、PPLO液體培養(yǎng)基購自杭州天和微生物試劑有限公司。滅菌生理鹽水自行配制。

1.1.3 藥敏紙片：購自上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司，紙片直徑（6.35±0.05）mm。 藥品種類及相應(yīng)的CLSI藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)見表1。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菌液制備：取鑒定后的純培養(yǎng)物接種于5 mL營養(yǎng)肉湯中，37℃培養(yǎng)16 h。

表1 藥敏紙片含藥量及藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

1.2.2 藥敏試驗(yàn)：按照CLSI推薦的紙片擴(kuò)散法（KB）法進(jìn)行。將上述液體純培養(yǎng)物制成懸液，用滅菌生理鹽水將菌懸液濃度調(diào)整至0.5麥?zhǔn)蠁挝唬ê罹鷶?shù)為 1×106～1×107CFU/mL）。 取稀釋好的菌液0.1 mL均勻涂布在PPLO固體培養(yǎng)基上，蓋好平皿，待干燥后，用鑷子夾取藥敏紙片貼在PPLO固體培養(yǎng)基上。37℃培養(yǎng)16 h，用游標(biāo)卡尺測定抑菌圈直徑，每次試驗(yàn)以ATCC 700794作為質(zhì)控菌。根據(jù)CLSI推薦的藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，即敏感、中介、耐藥3種形式判斷豬鏈球菌對抗菌藥物的敏感性。

2 結(jié)果與分析

采用紙片擴(kuò)散法測定了臨床分離的26株豬鏈球菌對獸醫(yī)臨床常用抗菌藥物的敏感性，結(jié)果見表2。由表2可知，分離菌對頭孢噻肟及氨芐西林/舒巴坦最為敏感，敏感菌株均占73.1%，其次是丁胺卡那霉素和鹽酸多西環(huán)素，敏感菌株分別占57.7%和50.0%。分離菌對四環(huán)素、慶大霉素、磺胺二甲氧嘧啶表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐藥性，耐藥率分別為92.3%、69.2%、69.2%。此外，分離菌對氯霉素、頭孢他啶、克林霉素、磺胺嘧啶鈉、復(fù)方新諾明也表現(xiàn)出一定的耐藥性，耐藥率均為57.7%。試驗(yàn)結(jié)果表明，臨床分離的豬鏈球菌對獸醫(yī)臨床常用的抗菌藥物產(chǎn)生了不同程度的耐藥性。

表2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

分析臨床分離的豬源鏈球菌耐藥性產(chǎn)生的原因，除與抗菌藥物長期應(yīng)用導(dǎo)致的選擇性壓力和抗菌藥物不合理使用有關(guān)外，耐藥基因在菌株中的廣泛傳播也十分重要。研究表明，細(xì)菌通過攜帶可轉(zhuǎn)移的遺傳因子，包括質(zhì)粒、轉(zhuǎn)座子等使耐藥性擴(kuò)散傳播，其中整合子潛在的基因捕獲及整合表達(dá)能力，對于細(xì)菌耐藥性的傳播具有重要的促進(jìn)作用。

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Antimicrobial Resistance of 26 Strains of Streptococcus suis Isolated from Veterinary Clinical Specimens

GONG Tuan-lian
（College of Animal Science and Technology，Inner Mongolia University for Nationalities，Tongliao 028042，China）

In present study,the antimicrobial resistance of 26 strains of Streptococcus suis isolated from veterinary clinical specimens was investigated by K-B method recommended by CLSI.The results showed that most(73.0%)of the isolates were sensitive to cefotaxime and ampicillin/sulbactam.Furthermore,57.7%and 50.0%of the isolates were sensitive to amikacin and doxycycline hydrochloride,respectively.The high rate of resistance to tetracycline (92.3%),gentamicin (69.2%)and sulfadimethoxine (69.2%)was observed,and 57.7%of the isolates exhibited resistance to chloramphenicol,ceftazidime,clindamycin,sulfadiazine sodium,and trimethoprim-sulfamethoxazole.The Streptococcus suis isolates have been found resistant to the antimicrobial agents commonly used in veterinary clinic,which should be paid more attention.

Streptococcus suis；antimicrobial resistance；surveillance

S858.285.11；S859.79

A文章順序編號：1672-5190（2016）01-0016-02

2016-01-02

龔團(tuán)蓮（1967—），女，高級實(shí)驗(yàn)師，主要從事臨床獸醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作。

（責(zé)任編輯：趙俊利）