李曉梅 ，閆佰鵬 ，史兆國 ，趙德寶 ，巨玉鑫

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，甘肅 蘭州 730070；2.甘肅省康樂縣草灘鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 康樂 731500）

肉鴿法氏囊、脾臟和胸腺的形態(tài)學、組織學觀察

李曉梅1，閆佰鵬1，史兆國1，趙德寶2，巨玉鑫1

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，甘肅 蘭州 730070；2.甘肅省康樂縣草灘鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 康樂 731500）

［目的］為今后研究肉鴿免疫功能提供其免疫器官的形態(tài)學、組織學觀察依據(jù)。［方法］選取40日齡的肉鴿，摘除法氏囊、脾臟和胸腺進行形態(tài)學觀察；通過制作常規(guī)石蠟切片，蘇木精—伊紅染色，顯微照相進行組織學觀察。［結果］40日齡肉鴿法氏囊黏膜上皮完整，黏膜固有層腔上囊小結數(shù)量減少，體積變小，中間出現(xiàn)空泡，淋巴細胞減少；法氏囊小結中皮質和髓質界限不明顯，小結周圍有大量的結締組織增生，導致法氏囊免疫功能降低。脾臟各組織結構發(fā)育趨于完善，細胞排列緊密。胸腺髓質中淋巴細胞較少，可見胸腺小體；皮質中淋巴細胞較多。［結論］40日齡的肉鴿法氏囊開始萎縮，免疫功能降低，而脾臟和胸腺免疫功能正常。

肉鴿；法氏囊；脾臟；胸腺；形態(tài)學；組織學；石蠟切片；觀察

1 材料與方法

1.1 實驗動物40日齡健康肉鴿16只（公、母各半），頸靜脈放血處死，解剖并觀察其法氏囊、脾臟和胸腺形態(tài)；之后摘取法氏囊、脾臟和胸腺，剔除脂肪后放入10%的中性福爾馬林溶液中固定保存［1］，備用。

1.2 試驗方法

1.2.1 主要儀器與試劑：石蠟切片機（Leica RM2235型，德國徠卡儀器公司）、光學顯微鏡、數(shù)碼顯微鏡（BA210型，麥克奧迪實業(yè)集團有限公司）、蘇木精染色液、伊紅染色液、甲醛、二甲苯和乙醇等。

1.2.2 石蠟切片制作：取出已固定好的法氏囊、脾臟和胸腺組織進行修塊，取最大橫截面，經(jīng)自來水充分沖洗（過夜）、梯度乙醇（85%→95%→95%→100%→100%）脫水，之后經(jīng)過如下處理后制成石蠟切片：浸蠟，石蠟包埋，連續(xù)切片（切片厚5 μm），蘇木精—伊紅染色，中性樹膠封片。使用光學顯微鏡對法氏囊、脾臟和胸腺組織切片進行觀察并用數(shù)碼顯微鏡拍照［2］。

2 結果

2.1 形態(tài)學觀察

2.1.1 肉鴿法氏囊形態(tài)學觀察：法氏囊位于泄殖腔后上方，開口于肛道。外觀長橢圓形，呈乳白色［3］。

2.1.2 肉鴿脾臟形態(tài)學觀察：脾臟附在肌胃和腺胃的連接處，脾質軟，外觀為圓形或鈍三角形，呈棕紅色或紫紅色［3-4］。

圖1 40日齡肉鴿法氏囊

2.1.3 肉鴿胸腺形態(tài)學觀察：胸腺位于頸部兩側皮膚之下，為不規(guī)則的兩串［4-5］，呈淡黃色或淡紅色，沿頸靜脈分布，直到胸腔入口的甲狀腺上。

2.2 組織學觀察

2.2.1 肉鴿法氏囊組織學觀察：母鴿與公鴿的法氏囊組織結構無明顯差異（見圖1）。40日齡肉鴿法氏囊黏膜上皮完整，黏膜固有層腔上囊小結（如圖1C中A1箭頭所指）數(shù)量變少，體積變小，中間出現(xiàn)空泡（如圖1B中A2箭頭所指），淋巴細胞減少。法氏囊小結中皮質和髓質界限不明顯，周圍大量的結締組織增生（如圖1D中A3箭頭所指）。

2.2.2 肉鴿脾臟組織學觀察：母鴿與公鴿脾臟組織結構無明顯差異（見圖2）。40日齡肉鴿脾臟的白髓和紅髓較明顯，脾小結內(nèi)淋巴細胞較多，排列緊密，有細胞呈同心圓排列（如圖2B中B1和B2箭頭所指），中心明顯。有不發(fā)達的脾小梁，或無真正的脾小梁。

2.2.3 肉鴿胸腺組織學觀察：母鴿與公鴿胸腺的組織結構無明顯差異（見圖3）。40日齡肉鴿胸腺表面被覆有結締組織構成的被膜，被膜深入實質內(nèi)將其分成許多不完整的小葉。胸腺小葉大小不等，可分為皮質和髓質，周圍染色較深的為皮質（如圖3C中C1所指），中央染色淺的為髓質［4］（如圖3C中C2所指）。

3 討論

3.1 法氏囊法氏囊是肉鴿的體液免疫中樞器官，是B淋巴細胞分化發(fā)育的主要場所，也是免疫球蛋白基因分化及基礎基因庫形成和擴展所必需的［5-6］。法氏囊壁由內(nèi)向外依次為黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜［7］。肉鴿法氏囊在40日齡時較發(fā)達。法氏囊黏膜上皮完整，黏膜固有層法氏囊小結數(shù)量變少，體積變小，中間出現(xiàn)空泡（見圖1B），淋巴細胞減少［8］。法氏囊小結中皮質和髓質界限不明顯，周圍大量的結締組織增生，導致法氏囊免疫功能降低，其中淋巴細胞數(shù)量大量減少逐漸變?yōu)榻Y締組織。與雞比較，肉鴿法氏囊外形呈長橢圓狀，雞法氏囊呈球形，肉鴿法氏囊組織結構與雞相似，僅肉鴿固有層內(nèi)淋巴小結相對較為密集。

圖2 40日齡肉鴿脾臟

圖3 40日齡肉鴿胸腺

3.2 脾臟脾臟是肉鴿最大的淋巴器官。脾的表面被覆漿膜，漿膜下是致密結締組織和少量的平滑肌構成的被膜，被膜伸進實質形成不發(fā)達的脾小梁，或無真正的小梁，僅在小梁動脈和靜脈外包有少量的結締組織［9］。脾的實質由白髓和紅髓相間構成，2種結構所占的比例大致相等，沒有明顯的邊緣區(qū)（見圖2D），白髓由脾小結和動脈周圍淋巴組織鞘構成。肉鴿和家禽一樣，動脈周圍淋巴鞘的分布范圍廣泛，它不僅環(huán)繞中央動脈周圍，而且部分分布到支動脈周圍。動脈周圍淋巴鞘有大量的小淋巴細胞、巨噬細胞和一些漿細胞，脾小結的數(shù)量較少，其發(fā)生中心主要是B淋巴細胞［10］。紅髓充滿白髓之間，由脾竇和脾索構成。脾索是相鄰血竇之間的結構，切片上呈條索狀，主要由網(wǎng)狀結締組織構成［11］。肉鴿與雞相比，其脾臟組織結構與雞的脾臟組織結構相似，但脾小梁不如雞的發(fā)達，且雞的脾臟實質白髓和紅髓分界不明顯。其作用主要與免疫功能有關，儲存血液作用很小。與哺乳動物相比，肉鴿的脾臟組織結構有明顯差異。

3.3 胸腺胸腺是肉鴿的細胞免疫器官，表面被覆有結締組織構成的被膜，被膜深入實質內(nèi)將其分成許多不完整的小葉［12］。胸腺小葉大小不等，可分為皮質和髓質，周圍染色較深的為皮質，中央染色淺的為髓質（見圖3C）。皮質由上皮性網(wǎng)狀細胞構成支架，網(wǎng)狀細胞體積較大，胞質淡染，網(wǎng)眼內(nèi)充滿中等大小的淋巴細胞和巨噬細胞，淋巴細胞數(shù)量多，故皮質著色深。皮質部小葉間隔明顯，間隔內(nèi)僅見小的毛細血管［13］。髓質內(nèi)上皮網(wǎng)狀細胞較多，淋巴細胞相對減少，故著色淺，小葉間隔缺乏，髓質融合，髓質內(nèi)有含有均勻嗜酸性物質的球形結構，髓質內(nèi)血管豐富，巨噬細胞數(shù)量較多［14］。與雞相比，其組織結構與雞胸腺組織結構相似，僅胸腺小體不典型。

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Morphological and Histological Observation on Bursa of Fabricius，Spleen and Thymus of Boiler Pigeon

LI Xiao-mei1，YAN Bai-peng1，SHI Zhao-guo1，ZHAO De-bao2，JU Yu-xin1
（1.College of Animal Science and Technology，Gansu Agricultural University，Lanzhou 730070，China；2.Animal Husbandry and Veterinary Medicine Working Station of Caotan Township in Kangle County of Gansu Province，Kangle 731500，China）

［Objective］To provide morphological and histological foundation for the further study on immune function of immune organs of boiler pigeon. ［Methods］The 40-day-old boiler pigeons were chosen in this study,and the main immune organs,including bursa of Fabricius,spleen and thymus,were collected to prepare paraffin sections by HE staining method and were morphologically observed and microphotographed.［Results］The structure of mucosa epithelium of bursa of Fabricius was intact.The number of nodule in lamina propria layer of bursa of Fabricius mucosa was fewer,and the size of the nodule was smaller.In lamina propria layer,the vacuoles were observed and the number of lymphocytopenia was fewer.The margin between the cortex and medulla of the nodule in bursa of Fabricius was not obvious,and the proliferation of a large number of connective tissue surrounding the nodule was observed,which resulted in the immune function reduction of bursa of Fabricius.The development of the tissues and structures of spleen were mature,and the cells arranged closely.The number of lymphocytopenia in the medulla of thymus was fewer,and the thymic corpuscle was observed.The number of lymphocytopenia in the cortex was more.［Conclusion］The bursa of Fabricius of 40-day-old boiler pigeon was atrophied,and its immune function was reduced.The immune function of spleen and thymus was normal.

boiler pigeon；bursa of Fabricius；spleen；thymus；morphology；histology；observation

Q954.6；S858.392.16

A文章順序編號：1672-5190（2016）01-0012-04

2015－12－29

項目來源：甘肅農(nóng)業(yè)大學《禽生產(chǎn)學》重點課程建設項目資助。

李曉梅（1990—），女，碩士研究生，主要學習專業(yè)為動物養(yǎng)殖學。

史兆國（1966—），男，教授，碩士生導師，主要從事動物生產(chǎn)學研究工作。

（責任編輯：錢英紅）