周　為　馬新福　戈　銳

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青?！∥鲗帯?10001)

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胃腺癌中基質(zhì)金屬蛋白酶-19和上皮型黏附素表達(dá)特征

周為馬新福戈銳

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海西寧810001)

目的觀察胃腺癌中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-19和上皮型黏附素(E-cadherin)的表達(dá)特征，分析其臨床價(jià)值。方法65例行胃腺癌手術(shù)后留取的標(biāo)本作為研究組，收集距腫物邊緣>3 cm的非腫瘤性胃黏膜組織20例作為對(duì)照組，應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)兩組中MMP-19和E-cadherin的表達(dá)。結(jié)果研究組和對(duì)照組中MMP-19和E-cadherin表達(dá)的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究組中MMP-19和E-cadherin表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤的脈管侵犯和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，MMP-19表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤最大徑密切相關(guān)，二者均與性別、年齡及浸潤(rùn)深度無(wú)明顯相關(guān)性。線性相關(guān)分析顯示研究組中MMP-19和E-cadherin的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性。結(jié)論胃腺癌中MMP-19高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的形成和進(jìn)展。二者具有一定的協(xié)同作用，可能對(duì)腫瘤的轉(zhuǎn)移有一定的調(diào)節(jié)作用。

胃腺癌；基質(zhì)金屬蛋白酶-19；上皮型黏附素；免疫組化

胃腺癌是胃黏膜起源的上皮源性惡性腫瘤，其轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)高。轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白在腫瘤中常高表達(dá)〔1〕?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-19是MMPs家族成員之一，最先在自身免疫性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中分離出來(lái)，隨后在機(jī)體多種組織中被陸續(xù)發(fā)現(xiàn)，其表達(dá)的程度不一，MMP-19的生物學(xué)功能中表現(xiàn)出具有明顯的降解細(xì)胞外基質(zhì)的作用〔2,3〕。上皮型黏附素(E-cadherin)是細(xì)胞間黏附的相關(guān)蛋白，正常機(jī)體中高表達(dá)，對(duì)細(xì)胞間結(jié)構(gòu)的維持和功能的傳遞有重要作用〔4〕。本實(shí)驗(yàn)分析胃腺癌切除手術(shù)后的標(biāo)本MMP-19和E-cadherin的表達(dá)特征。

1　資料與方法

1.1一般資料我院診斷為胃腺癌，并行根治性手術(shù)的患者65例作為研究組，均符合WHO中關(guān)于胃腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)病理醫(yī)師復(fù)審切片證實(shí)。其中男34例，女31例；年齡34～86歲，平均(60.7±11.8)歲。選擇上述患者術(shù)后標(biāo)本中距腫物邊緣>3 cm的非腫瘤性胃黏膜組織20例作為對(duì)照組，其中男10例，女10例；年齡39～81歲，平均(57.5±8.8)歲。兩組一般臨床資料無(wú)明顯差別。

1.2MMP-19和E-cadherin的檢測(cè)方法標(biāo)本均切取2～3 mm厚的組織后行甲醛液固定，石蠟包埋后切片，并應(yīng)用免疫組SP法檢測(cè)MMP-19和E-cadherin的表達(dá)，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色。操作嚴(yán)格按說(shuō)明書進(jìn)行，做好質(zhì)量控制，努力減少相關(guān)的誤差。

1.3MMP-19和E-cadherin結(jié)果的判讀MMP-19的陽(yáng)性著色部位是細(xì)胞質(zhì)，E-cadherin的陽(yáng)性著色部位是細(xì)胞膜，以染成棕黃色(中等強(qiáng)度)-棕褐色(強(qiáng)陽(yáng)性)為陽(yáng)性反應(yīng)的細(xì)胞(淡黃色著色不計(jì)為陽(yáng)性)。每張切片選擇上皮細(xì)胞集中的區(qū)域進(jìn)行觀察(3個(gè)400倍視野)，計(jì)算陽(yáng)性率，取其平均值。以<10%定為陰性，以≥10%定為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.1兩組MMP-19和E-cadherin表達(dá)陽(yáng)性率的比較兩組MMP-19和E-cadherin表達(dá)陽(yáng)性率差別顯著。見(jiàn)表1。

表1　兩組MMP-19和E-cadherin表達(dá)陽(yáng)性率比較〔n(%)〕

2.2研究組MMP-19和E-cadherin在不同臨床特征中的陽(yáng)性表達(dá)比較研究組中MMP-19和E-cadherin表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤脈管侵犯和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，MMP-19表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤的最大徑密切相關(guān)，二者均與性別、年齡及浸潤(rùn)深度無(wú)明顯相關(guān)性。見(jiàn)表2。

2.3研究組中MMP-19和E-cadherin的相關(guān)性分析MMP-19和E-cadherin的表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性(r=-0.47,P=0.041 2)。

表2　研究組中MMP-19和E-cadherin在不同臨床特征中的陽(yáng)性表達(dá)比較〔n(%)〕

3　討　論

流行病學(xué)顯示胃癌的發(fā)生率正呈下降趨勢(shì)，尤其是在一些西方國(guó)家。這與飲食、營(yíng)養(yǎng)方式的改變及早期胃癌檢測(cè)方法的進(jìn)步有關(guān)〔5〕。胃腺癌病變形成和進(jìn)展較快。體內(nèi)與轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因和蛋白表達(dá)異?！?〕。MMPs是由體內(nèi)多種組織和腫瘤細(xì)胞形成的蛋白水解酶，對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)、基底膜均有較好的降解作用，這使腫瘤轉(zhuǎn)移的屏障受到破壞，腫瘤細(xì)胞易于突破基底膜形成遠(yuǎn)隔部位的播散〔7〕。MMP-19是家族中重要成員，又稱為基彈性蛋白酶，可以降解明膠、纖維結(jié)合蛋白、聚集蛋白聚糖等〔8〕。MMP-19保留可溶性MMPs家族成員的共同域組織，還包括在催化領(lǐng)域插入一個(gè)獨(dú)特的半胱氨酸，改變延時(shí)動(dòng)機(jī)，同時(shí)有一個(gè)獨(dú)特的插入鉸鏈區(qū)和一個(gè)C末端尾巴〔9,10〕，因此其可能有特殊作用。Yu等〔11〕通過(guò)觀察MMP-19在肺癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)MMP-19基因和蛋白均高表達(dá)，且與非小細(xì)胞肺癌的預(yù)后相關(guān)，認(rèn)為MMP-19過(guò)表達(dá)能促進(jìn)上皮和間質(zhì)的轉(zhuǎn)化、腫瘤的轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)過(guò)程，MMP-19可能是一個(gè)重要的腫瘤標(biāo)志蛋白。梁珍麗等〔12〕通過(guò)觀察MMP-19在鼻咽癌組織中的表達(dá)后，發(fā)現(xiàn)MMP-19在鼻咽癌中的表達(dá)下調(diào)。因此MMP-19在腫瘤中的表達(dá)可能不完全一致，其作用可能更趨于多樣性，也可能有腫瘤特異性。E-cadherin是細(xì)胞間重要的黏附蛋白，具有維持細(xì)胞間連接及信息傳遞的重要作用〔13〕，正常情況下E-cadherin高表達(dá)，而在腫瘤性病變和腫瘤進(jìn)展時(shí)E-cadherin表達(dá)下降，此時(shí)細(xì)胞易于與原發(fā)灶脫離，出現(xiàn)浸潤(rùn)性生長(zhǎng)和播散。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示MMP-19高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)是促進(jìn)腫瘤形成的重要蛋白。MMP-19高表達(dá)顯示出正向的促進(jìn)腫瘤性生長(zhǎng)的作用。有觀點(diǎn)認(rèn)為MMP-19在病變形成的初始階段可以顯著降低細(xì)胞的克隆能力，但是在腫瘤惡性轉(zhuǎn)變的過(guò)程中，MMP-19表達(dá)明顯增強(qiáng)，可能通過(guò)細(xì)胞因子和胰島素樣生長(zhǎng)因子信號(hào)來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞的黏附和增殖過(guò)程〔10〕。這可能是MMP-19的雙重作用，也可能是病變的不同階段起的作用及調(diào)節(jié)的途徑不同形成的。本文結(jié)果提示MMP-19和E-Cadherin二者異常表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展和遠(yuǎn)處播散。MMP-19高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)。因此MMP-19高表達(dá)可能預(yù)示著不良的生物學(xué)行為〔14〕。本文提示二者具有協(xié)同負(fù)向作用。MMP-19為細(xì)胞外基質(zhì)降解的重要蛋白，而E-cadherin是調(diào)節(jié)細(xì)胞連接和黏附的，此時(shí)細(xì)胞連接能力下降，細(xì)胞間松動(dòng)，使腫瘤細(xì)胞易于離開原發(fā)灶〔15,16〕。同時(shí)在細(xì)胞外基質(zhì)溶解使細(xì)胞轉(zhuǎn)移的屏障受到明顯破壞的情況下，腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移形成可能〔17,18〕。

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〔2015-01-26修回〕

(編輯苑云杰)

周為(1965-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事胃腸腫瘤研究。

R730

A

1005-9202(2016)18-4513-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.054