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(黃河科技學(xué)院，河南　鄭州　450063)

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桑椹多糖對高脂血癥大鼠血脂代謝、血液流變學(xué)及氧自由基的影響

郭曉娜劉現(xiàn)輝1閆春生黃濤張?jiān)绿?王君明3李曉冰3

(黃河科技學(xué)院，河南鄭州450063)

目的探討桑椹多糖對高脂血癥大鼠血脂代謝、血液流變學(xué)及氧自由基的影響。方法高脂飼料制造高脂血癥大鼠模型。實(shí)驗(yàn)設(shè)正常對照組、高脂血癥模型組、高、中、低劑量桑椹多糖組及洛伐他汀組。給予桑椹多糖或洛伐他汀干預(yù)3個(gè)月。實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死大鼠，比較各組甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白(Apo)A-I、ApoB。測定血液流變學(xué)指標(biāo)及總超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)、總抗氧化能力(T-AOC)指標(biāo)。結(jié)果與模型組比較，桑椹多糖明顯降低TG、TC、LDL-C、ApoB及血液流變學(xué)指標(biāo)水平;降低MDA,增強(qiáng)T-SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC活性，升高HDL-C、ApoA-I水平。結(jié)論桑椹多糖對實(shí)驗(yàn)性高脂血癥模型大鼠具有降血脂、改善血液的黏聚狀態(tài)及抗脂質(zhì)過氧化作用。

桑椹；多糖；高脂血癥

桑椹為桑科植物桑樹的干燥果穗，可滋陰養(yǎng)血，生津，潤腸，主治肝腎不足和血虛精虧的頭暈?zāi)垦＃Q，須發(fā)早白，失眠，消渴及腸燥便秘等證〔1〕。桑椹中主要含有白黎蘆醇蘆丁原花色素及多糖等成分〔2〕。桑椹多糖具有抗氧化性、降血糖活性、抗腫瘤活性、抗炎癥活性等〔3〕。然而對桑椹多糖改善血脂、血流變等指標(biāo)狀況卻鮮有報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)研究桑椹多糖對高脂血癥大鼠血脂代謝、血液流變學(xué)及氧自由基的影響。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)藥物洛伐他汀,購于重慶大新藥業(yè)有限公司；新鮮桑椹采摘于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所桑園，放入-20℃冷藏備用。桑椹多糖依據(jù)文獻(xiàn)提取〔4〕，純度為92.35%。

1.2儀器日立7170A全自動(dòng)生化分析儀;UV-2450紫外可見分光光度計(jì)(日本島津公司)。MVIS-2035全自動(dòng)血液流變分析系統(tǒng)，重慶天海醫(yī)療設(shè)備有限公司。

1.3試劑 血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、 高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)試劑盒(均購于中生北控生物科技股份有限公司);總超氧化物歧化酶(T-SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.4動(dòng)物及飼料Wistar大鼠，SPF級，雄性，體質(zhì)量180～220 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證號SCXK(京)2011-0011。高脂飼料(基礎(chǔ)飼料78%，豬油10%，蛋黃粉10%，膽固醇2%)自行配制〔5〕。

1.5方法

1.5.1動(dòng)物分組與模型大鼠60只，基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w后，按體重隨機(jī)分為正常對照組、高脂血癥模型組、桑椹多糖高、中、低劑量組和洛伐他汀組，每組10只。正常對照組喂食基礎(chǔ)飼料，同時(shí)按15 ml/kg生理鹽水灌胃，模型組給予高脂飼料+15 ml/kg生理鹽水灌胃，桑椹多糖高、中、低劑量組給予高脂飼料+桑椹多糖400、200、100 mg·kg-1·d-1，洛伐他汀組給予高脂飼料+洛伐他汀2 mg·kg-1·d-1。連續(xù)給藥3個(gè)月。

1.5.2取材大鼠處死前1 d禁食不禁水24 h，腹主動(dòng)脈取血，離心分離血清。

1.5.3指標(biāo)測定 按試劑盒使用說明測定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、T-SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC、MDA。用終點(diǎn)法測定載脂蛋白(Apo)A，ApoB。全自動(dòng)血液流變分析系統(tǒng)檢測血液流變學(xué)主要指標(biāo):全血高、低切黏度,血漿黏度,紅細(xì)胞聚集指數(shù)。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS15.0軟件行單因素方差分析。

2　結(jié)　果

2．1桑椹多糖對高脂血癥大鼠血脂代謝的影響與正常對照組比較，模型組TC、TG、LDL-C顯著升高，HDL-C顯著降低(P<0.01),說明造模成功。與模型組比較，桑椹多糖低劑量組明顯降低TC水平(P<0.05)；桑椹多糖中劑量組明顯降低TC、TG含量(P<0.05)；桑椹多糖高劑量組顯著降低TC、TG(P<0.01),明顯降低LDL-C水平，升高HDL-C水平(P<0.05)，見表1。

表1　桑椹多糖對高脂血癥大鼠血脂代謝的影響

與對照組比較:1)P<0.05,2)P<0.01；與模型組比較:3)P<0.05，4)P<0.01，下表同

2.2桑椹多糖對高脂血癥大鼠Apo的影響與正常對照組比較，模型組ApoA-I水平明顯下降，ApoB明顯上升(P<0.05)，ApoB/ApoA-I比值顯著升高(P<0.01)。與模型組比較，桑椹多糖低劑量組明顯降低ApoB/ApoA-I比值(P<0.05)，高、中劑量組明顯升高ApoA-I水平(P<0.05)，顯著降低ApoB/ApoA-I比值(P<0.01)，桑椹多糖高劑量組明顯降低ApoB水平(P<0.05)，見表2。

2．3桑椹多糖對高脂血癥大鼠血液流變學(xué)的影響與正常對照組比較，模型組大鼠全血高切黏度、低切黏度及紅細(xì)胞聚集指數(shù)顯著增高(P<0.05，P<0.01)。桑椹多糖干預(yù)后，與模型組比較，各劑量組均明顯降低全血低切黏度及紅細(xì)胞聚集指數(shù)；其中中、高劑量組顯著降低血漿黏度，高劑量組明顯降低全血高切黏度(P<0.05)，見表3。

2．4桑椹多糖對高脂血癥大鼠血清氧化應(yīng)激的影響與正常對照組比較，模型組T-SOD、CAT、GSH-Px顯著降低(P<0.01)，T-AOC明顯下降(P<0.05)，MDA顯著升高；經(jīng)桑椹多糖干預(yù)后，與模型組比較，各劑量組顯著升高CAT、GSH-Px水平；中、高劑量組降低MDA含量，顯著升高T-AOC水平(P<0.01)；多糖高劑量組明顯升高T-SOD含量(P<0.05)，見表4。

表2　桑椹多糖對高脂血癥大鼠Apo的影響

表3　桑椹多糖對高脂血癥大鼠血液流變學(xué)的影響±s，n=10)

表4　桑椹多糖對高脂血癥大鼠血清氧化應(yīng)激的影響±s，n=10)

3　討　論

高脂血癥與腦卒中、心肌梗死、心臟猝死、糖尿病、高血壓、脂肪肝等發(fā)病密切相關(guān)，是冠心病的主要危險(xiǎn)因素之一〔6〕。LDL-C升高或HDL-C降低都是冠心病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。近年有研究表明Apo與冠狀動(dòng)脈疾病發(fā)病更具相關(guān)性〔7〕。ApoA-I是在肝臟及腸黏膜中合成，代表HDL-C中蛋白質(zhì)部分，反應(yīng)HDL-C合成與分解之間的平衡。ApoB是在肝臟中合成，ApoB水平升高是動(dòng)脈粥樣硬化的主要危險(xiǎn)因素之一〔8〕。研究發(fā)現(xiàn)ApoB/ApoA-I比值越高，膽固醇越容易在血管內(nèi)皮細(xì)胞中堆積，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病變和心血管事件的風(fēng)險(xiǎn)越大〔9〕。本研究顯示，桑椹低糖有調(diào)節(jié)血脂及載脂蛋白代謝作用。

血液流變學(xué)指標(biāo)的異常是心腦血管疾病出現(xiàn)臨床癥狀之前的早期表現(xiàn)，其機(jī)制與血脂水平的變化關(guān)系密切〔10〕。高脂血癥通過影響紅細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層和骨架蛋白，使血液流速降低，微循環(huán)減慢，從而導(dǎo)致組織缺血缺氧及代謝紊亂。本研究結(jié)果提示桑椹多糖在降血脂的同時(shí)也部分糾正了血液流變學(xué)異常，改善高脂模型大鼠血液的高黏和高聚狀態(tài)。

血脂異常會(huì)導(dǎo)致機(jī)體抗氧化能力下降，氧自由基生成增加，脂質(zhì)過氧化作用增強(qiáng)。超氧化物歧化酶(SOD)是機(jī)體細(xì)胞中主要抗氧化酶，能清除超氧陰離子，使其生成過氧化氫，之后能被CAT分解為水和氧氣，是維持生物體自由基產(chǎn)生和過氧化物清除能力平衡的重要物質(zhì)。GSH-Px亦能清除自由基，阻斷脂質(zhì)過氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能〔11〕。MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)鏈終止階段產(chǎn)生的小分子產(chǎn)物，可嚴(yán)重破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，檢測MDA含量可以間接反映機(jī)體組織細(xì)胞的過氧化程度。本實(shí)驗(yàn)觀測到高脂模型組中大鼠血清MDA水平明顯升高，T-AOC顯著降低，桑椹多糖干預(yù)能有效抑制高脂血癥大鼠血清MDA 的升高，使CAT、T-SOD、GSH-Px活力顯著升高，增強(qiáng)機(jī)體總抗氧化能力。

1南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典〔M〕.第2版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2006:2790．

2施青紅,王向陽.桑椹的功能成分及藥理作用〔J〕.食品與機(jī)械,2007;23(4):153．

3胡海梅.?？岸嗵翘崛」に噧?yōu)化、組分分析及降血糖活性鑒定〔D〕.合肥:合肥工業(yè)大學(xué),2009.

4張文娜,陸敏,姚清國,等.桑椹多糖的抗氧化活性研究〔J〕.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2012;40(1):156-7.

5劉啟玲,周玲,許心青.番茄紅素預(yù)防高脂喂飼大鼠脂質(zhì)代謝紊亂的作用及機(jī)制探討〔J〕.西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2008;29(1):70．

6蘇蓉,于德水.高脂血癥的危害及防治〔J〕.中國當(dāng)代醫(yī)藥,2009;16(8):128-9.

7Carnevale SGP,Pedrazzoli R,Onolfo S,etal.ApoB/apoA-I ratio is better than LDL-C in detecting cardiovascular risk〔J〕.Nutr Metab Cardiovasc Dis,2011;21(6):406-11.

8張洋,張建華,汪躍國,等.血清ApoB/ApoA-I比值與冠心病患者冠脈病變嚴(yán)重程度的相關(guān)性〔J〕.安徽醫(yī)藥,2014;18(4):633-7.

9Tani S,Nagao K,Anazawa T,etal.Relation of change in apolipoprotein B/apolipoprotein A-I ratio to coronary plaque regression after pravastatin treatment in patients with coronary artery disease〔J〕.Am J Cardiol,2010;105(2):144-8.

10Jeong YJ，Choi YJ，Kwon HM． Differential inhibition of oxidized LDL induced apoptosis in human endothelial cells heated with different flavonoids〔J〕．Br J Nutr,2005;93(8):581-91.

11Chung SS,Kim M,Youn BS,etal.Glutathione peroxidase 3 mediates the antioxidant effect of peroxisome proliferator activated receptor γ in human skeletal muscle cells 〔J〕.Mole Cell Biol,2009;29(1):20-30.

〔2015-04-15修回〕

(編輯苑云杰/曹夢園)

中國博士后科學(xué)基金(2012M521412)；河南省科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(162102310466)；河南省高等學(xué)校重點(diǎn)科研項(xiàng)目(16A360010)；河南中醫(yī)學(xué)院科技創(chuàng)新人才(2015XCXRC05)

李曉冰(1980-)，女，副教授，博士，主要從事多糖免疫藥理學(xué)研究。

郭曉娜(1981-),女,講師,碩士,主要從事經(jīng)方配伍規(guī)律及作用機(jī)制研究。

R285

A

1005-9202(2016)18-4421-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.008

1河南省中醫(yī)院2廣州中醫(yī)藥大學(xué)3河南中醫(yī)學(xué)院