柴若楠　孫冬雪　寧可　謝華　林小平　劉靜

孟魯司特鈉對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者血清IL-6及IL-12含量的影響

柴若楠1孫冬雪1寧可1謝華1林小平1劉靜1

目的觀察孟魯司特鈉對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者血清白介素6及12的影響，以探討其作用機(jī)制。方法確診的變應(yīng)性鼻炎患者100例，分為常規(guī)治療組及常規(guī)治療加孟魯司特鈉治療組，每組各50例；另設(shè)健康對(duì)照組50例。治療前后分別收集研究對(duì)象外周血及鼻腔分泌物，ELISA法測(cè)定IL-6、IL-12含量，進(jìn)行治療前后及組間比較。結(jié)果孟魯司特鈉治療組患者臨床癥狀顯著減輕（P＜0.01），血清IL-6明顯降低（P＜0.01），IL-12顯著升高（P＜0.01），呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。結(jié)論孟魯司特鈉治療AR的機(jī)制可能是通過降低IL-6并升高IL-12水平而實(shí)現(xiàn)的，它們?cè)贏R發(fā)病機(jī)制中有重要作用。

變應(yīng)性鼻炎；白介素；孟魯司特鈉；療效；機(jī)制

變應(yīng)性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）又被稱之為過敏性鼻炎，是我科常見病之一，國(guó)內(nèi)目前發(fā)病率大概為25%～35%之間。變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，前沿報(bào)道多認(rèn)為是一種由變應(yīng)原激發(fā)，由IgE介導(dǎo)的鼻黏膜慢性炎性反應(yīng)［1］。白細(xì)胞介素（IL）-6和白細(xì)胞介素（IL）12是一種Th2型細(xì)胞因子，它們可以促使CD4+Th細(xì)胞向Th1型細(xì)胞分化，從而抑制Th2型細(xì)胞的產(chǎn)生和SIgE的生成，可以阻止嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）的浸潤(rùn)和凝集，并使其凋亡，在各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病起到一定的調(diào)節(jié)作用［2，3］。免疫學(xué)研究表明，T細(xì)胞系列中的Th細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子失衡在變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病中起重要作用［4］。本研究通過觀察孟魯司特鈉對(duì)變應(yīng)性鼻炎患者血清白介素6、12的影響，為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

材料與方法

1一般資料

選取2015年1月～2015年4月在我科就診的患者，其中變應(yīng)性鼻炎患者100例，男48例，女52例，年齡18～55歲，中位年齡36.5歲，分為50例鼻炎常規(guī)用藥組和50例加用孟魯司特鈉組。所有患者符合2009年武夷山會(huì)議AR的診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］。均處于癥狀持續(xù)期，且在2周內(nèi)未使用激素、抗組胺藥物。均排除急性、慢性鼻腔感染性疾病、萎縮性鼻炎、鼻中隔偏曲、以及其他免疫性疾病，且皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)（skin prick tests，SPT）和特異性IgE（specific IgE，sIgE）的結(jié)果均為陽(yáng)性。健康對(duì)照組為我院體檢中心中各項(xiàng)指標(biāo)均為正常的健康人，并且沒有AR癥狀者?；颊呖倲?shù)為50例，其中男22例，女28例，年齡19～59歲，中位年齡40.3歲，sIgE和SPT的結(jié)果均為陰性，并排除心、肝、腎，腫瘤等全身性疾病。

2藥品與試劑

孟魯司特鈉片（商品名：順爾寧），成人1次10mg，1日1次。IL-6多克隆抗體由美國(guó)加州Santa Cruz Biotech公司生產(chǎn)。IL-12單克隆抗體由美國(guó)Santa Cruz Biotech公司生產(chǎn)，ELISA試劑盒由武漢博士德生物工程公司生產(chǎn)。

3血清學(xué)檢查

血清sIgE檢測(cè)使用歐盟（德國(guó)）公司定量過敏原篩查檢測(cè)系統(tǒng)。應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)患者血清中IL-6、IL-12的水平表達(dá)。

4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0軟件系統(tǒng)統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)采用Excel軟件輸入，兩樣本之間的比較采用t檢驗(yàn)，樣本間比較采用方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1三組血清中白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12的水平比較

血清中白細(xì)胞介素IL-6、白細(xì)胞介素IL-12水平，孟魯司特鈉組均高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；變應(yīng)性鼻炎組組與孟魯司特鈉組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；變應(yīng)性鼻炎組高于健康對(duì)照組（P＜0.05），表1。

表1　三組血清中白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12水平比較（s）ng/L

表1　三組血清中白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12水平比較（s）ng/L

△與孟魯司特鈉組比較P＜0.05，*與健康對(duì)照組比較P＜0.05。

組別例數(shù)IL-6 AR組孟魯司特鈉組健康對(duì)照組50 50 50 15.17±9.47*△12.96±9.33*6.86±2.47 IL-12 21.75±17.72*△19.62±14.48*6.69±4.82

2兩組變應(yīng)性鼻炎患者鼻部癥狀評(píng)分（VAS）

變應(yīng)性鼻炎組的癥狀與健康對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；孟魯司特鈉組的癥狀與AR對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表2。

表2　兩組變應(yīng)性鼻炎患者鼻部癥狀評(píng)分（VAS）（s）分

表2　兩組變應(yīng)性鼻炎患者鼻部癥狀評(píng)分（VAS）（s）分

與AR組比較，**P＜0.05，與健康組比較，△△P＜0.01。

項(xiàng)目噴嚏鼻塞變應(yīng)性鼻炎組孟魯司特鈉組健康對(duì)照組2.232±1.338△△1.204±0.366**0.000±0.000 2.827±0.284△△1.163±0.377**0.000±0.000流涕2.068±0.272△△1.205±0.445**0.000±0.000鼻癢2.378±0.261△△1.261±0.229**0.010±0.032

3白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）12在三組鼻分泌物中表達(dá)水平比較

變應(yīng)性鼻炎組及孟魯司特鈉組白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12鼻分泌物中表達(dá)水平均較健康對(duì)照組且明顯升高（P＜0.05）；變應(yīng)性鼻炎組白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12表達(dá)水平較孟魯司特鈉組明顯升高（P＜0.05），表3。

表3　白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）12在三組鼻分泌物中表達(dá)水平比較（s）ng/L

表3　白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）12在三組鼻分泌物中表達(dá)水平比較（s）ng/L

與健康對(duì)照組比較*P＜0.05，與孟魯司特鈉組比較△P＜0.05

組別例數(shù)IL-6變應(yīng)性鼻炎組孟魯司特鈉組健康對(duì)照組50 50 50 0.63±3.17*△5.57±4.53*2.33±1.05 IL-12 9.55±8.02*△7.12±5.38*2.48±1.23

4藥物治療后癥狀總積分

血清白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12的變化與正常組相比，孟魯司特鈉組及變應(yīng)性鼻炎組鼻分泌物中白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12的水平表達(dá)均高于健康對(duì)照組且明顯升高（P＜0.05）；變應(yīng)性鼻炎組白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12水平表達(dá)較孟魯司特鈉組明顯升高（P＜0.05），表4。

表4　藥物治療后癥狀總積分血清白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12的變化（s）ng/L

表4　藥物治療后癥狀總積分血清白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12的變化（s）ng/L

與健康對(duì)照組比較，△△P＜0.01；與AR組比較，**P＜0.05。

組別例數(shù)癥狀總積分AR組孟魯司特鈉組健康對(duì)照組50 50 50 6.175±0.483△△3.228±1.617**0.168±0.045 IL-6 68.235±0.542△△38.527±1.065**33.295±1.159 IL-12 9.872±1.514△△15.145±1.598**17.188±1.487

5白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12相關(guān)性r=0.857，P=0.000，（采用Person秩相關(guān)檢驗(yàn)），說明此兩項(xiàng)指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。

討論

AR是一種全球常見性疾?。?］。目前的研究發(fā)現(xiàn)AR的發(fā)病機(jī)制涉及多系列炎癥細(xì)胞，如：肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和眾多的黏附分子、趨化因子、細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子和多種炎癥介質(zhì)，此外還與神經(jīng)調(diào)解、遺傳學(xué)等因素相關(guān)，具體機(jī)制尚未完全闡明［7］。孟魯司特鈉可以抑制肌醇磷酸酯代謝，對(duì)細(xì)胞內(nèi)Ca2+的釋放和細(xì)胞外Ca2+的內(nèi)流均具有抑制作用；同時(shí)也可阻滯磷酸二酯酶活性和花生四烯酸的釋放，使環(huán)化腺甘酸（c-AMP）的水平增加，在體外具有松弛平滑肌的作用，臨床療效確切。本研究表明孟魯司特鈉治療后能降低變應(yīng)性鼻炎（AR）患者血清白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12水平，從而，抑制IgE的合成與分泌，減少炎性介質(zhì)的活化和浸潤(rùn)［8］。

孟魯司特鈉干預(yù)后能顯著改善AR患者的鼻炎癥狀，結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［9］。變應(yīng)性鼻炎的主要病理特征是以嗜酸細(xì)胞浸潤(rùn)為主的鼻黏膜慢性炎癥性疾?。?0］。大量研究顯示，嗜酸細(xì)胞在機(jī)體炎癥部位聚集時(shí)可出現(xiàn)一種自動(dòng)放大效應(yīng)，這種效應(yīng)能夠活化機(jī)體中其他結(jié)構(gòu)性細(xì)胞及白細(xì)胞，使這些細(xì)胞能更好地釋放出更多的細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)、趨化因子等物質(zhì)，使得機(jī)體的炎癥反應(yīng)進(jìn)一步加重［11］，表現(xiàn)為Th2細(xì)胞分泌的IL-6、IL-12和TGF-β等增加，Th1細(xì)胞分泌的IL012和IFN-γ/TNF-β等減少，對(duì)過敏反應(yīng)的負(fù)調(diào)節(jié)作用減低，對(duì)誘導(dǎo)炎癥發(fā)生［12］。

白細(xì)胞介素（IL）-12主要是由巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞分泌，它能夠抑制Th2型細(xì)胞哦產(chǎn)生和特異性IgE合成，并誘導(dǎo)CD4+Th細(xì)胞向Th1型細(xì)胞分化，進(jìn)而能夠平衡Th2型細(xì)胞的功能性亢進(jìn)，，從而進(jìn)一步抑制嗜酸細(xì)胞的浸潤(rùn)和聚集以及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［13］，白細(xì)胞介素（IL）-12在Th細(xì)胞亞群的分化中起著至關(guān)重要的作用［14］，它可有效的抑制Th細(xì)胞向Th2細(xì)胞亞群的分化，是抗呼吸道變態(tài)反應(yīng)性疾病的關(guān)鍵因素［15］，并可直接抑制多種Th2型細(xì)胞因子如IL-10、IL-6、IL-6、IL-12等生成，被認(rèn)為是促使T輔助細(xì)胞向Th1分化的始動(dòng)因素［16］。

白細(xì)胞介素（IL）-6是一種非常強(qiáng)大的前炎癥細(xì)胞因子，它可以刺激多種細(xì)胞產(chǎn)生IL-8、IL-4、金屬蛋白酶-1、GM-CSF等大量細(xì)胞、趨化因子產(chǎn)生協(xié)同炎癥反應(yīng)導(dǎo)致組織器官的炎性損傷［17］。白細(xì)胞介素（IL）-6能使大量的IgE與肥大細(xì)胞所表達(dá)的IgE受體結(jié)合，使肥大細(xì)胞脫顆粒，從而釋放出與炎性反應(yīng)相關(guān)的所有介質(zhì)，使得黏膜出現(xiàn)水腫，黏液的分泌增多［18］。由于白細(xì)胞介素（IL）-6的這些特殊特性，它一直被認(rèn)為與變應(yīng)性鼻炎患者的I型變態(tài)反應(yīng)密切相關(guān)。

本研究通過檢測(cè)AR患者各組血清白細(xì)胞介素（IL）-6、白細(xì)胞介素（IL）-12水平變化，發(fā)現(xiàn)服用孟魯司特鈉后，白細(xì)胞介素IL-6水平較變應(yīng)性鼻炎組明顯下降，白細(xì)胞介素IL-12水平較變應(yīng)性鼻炎組明顯升高，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。提示孟魯司特鈉可能對(duì)變應(yīng)性鼻炎的癥狀產(chǎn)生療效。

本次研究還提示，隨著血清白細(xì)胞介素（IL）-6水平的降低，白細(xì)胞介素（IL）-12水平則呈緩緩升高趨勢(shì)，兩者存在顯著的負(fù)相關(guān)，但是孟魯司特鈉治療變應(yīng)性鼻炎的機(jī)制可能相對(duì)復(fù)雜，此次研究?jī)H僅可能是其復(fù)雜機(jī)制的其中一面，具體機(jī)制尚待進(jìn)一步研究和探索。

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（收稿：2016-02-05修回：2016-07-07）

Effect of Montelukast sodium on levels of IL-6 and IL-12 in serum and nasal secretion of patients with allergic rhinitis

CHAI Ruonan，SUN Dongxue，NING Ke，XIE Hua，LIN Xiaoping，LIU Jing
Respiratory-Allergy Condition Diagnosis and Treatment Centre of PLA，Shenyang，110016，China

Objective To investigate the effects of Montelukast sodium on levels of IL-6 and IL-12 in serum and nasal secretion of patients with allergic rhinitis（AR）based on a clinical trial.Methods Included in this study were 100 AR patients randomly divided into 2 groups，with cases in one group being treated by routine therapy（RTG）and those in another group being treated by a combined way with routine therapy and Montelukast sodium（CTG），50 cases in each group.Moreover，50 healthy persons were taken as normal control group（NCG）given no any treatment.Then，samples of serum and nasal secretion were taken before and after treatment respectively，and the levels of IL-6 and IL-12 in both samples were determined by the procedure of ELISA to evaluate their differences among different groups and changes in the course of therapy.Results Symptoms of AR were significantly relieved among the cases in CTG following the therapy，with the levels of IL-6 in serum and nasal samples decreased and that of IL-12 in both samples elevated obviously when compared with that before treatment and other groups，with significantly statistical significance（P＜0.01）.There is a positive correlation among these data.Conclusion The therapeutic mechanism of montelukast sodium on allergic rhinitis should be brought about by decreasing the level of IL-6 and increasing the level of IL-12，which suggests that IL-6 and IL-12 are involved in the pathogenesis of AR as very important inflammatory factors.

Allergic rhinitis；Interleukins；Montelukast sodium；Therapeutic effect；Pharmacological mechanism

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2016.04.003

1解放軍沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院呼吸及過敏反應(yīng)診治中心（遼寧沈陽(yáng)，110016）

劉靜，主管技師.Email：