烏蘭，齊景偉，羅旭光，安曉萍

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特010018）

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飼料中添加黃腐酸對(duì)鯽魚(yú)生長(zhǎng)及消化酶活性的影響

烏蘭，齊景偉，羅旭光，安曉萍

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特010018）

為研究飼料中添加黃腐酸對(duì)鯽魚(yú)生長(zhǎng)及消化酶活性的影響，本試驗(yàn)選取60尾40 g左右的鯽魚(yú)進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)，分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10尾魚(yú)。試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼料中添加0.30%的黃腐酸，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼料。試驗(yàn)期為30 d。結(jié)果表明：試驗(yàn)組平均增重率較對(duì)照組提高30.96%（P＜0.05）；試驗(yàn)組肝胰臟蛋白酶活性、淀粉酶活性和腸道淀粉酶活性分別較對(duì)照組顯著提高31.69%、40.00%和20.00%（P＜0.05），腸道蛋白酶活性和肝胰臟、腸道脂肪酶活性分別較對(duì)照組提高8.81%、8.07%和7.14%（P＞0.05）。由此可見(jiàn)，在基礎(chǔ)飼料中添加適量的黃腐酸可以促進(jìn)鯽魚(yú)的生長(zhǎng)，顯著增加魚(yú)體肝胰臟蛋白酶、淀粉酶和腸道淀粉酶的活性。

鯽魚(yú)；飼料；黃腐酸；生長(zhǎng)；消化酶

腐植酸是一類(lèi)從泥炭、褐煤或風(fēng)化煤中提取的高分子化合物（趙繼芬，2004）。黃腐酸是腐植酸中分子量最小、溶解度最高、生物活性最強(qiáng)和吸收效果最佳的部分（姚東偉，2003），具有提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能，改善肉品質(zhì)和增強(qiáng)免疫功能的作用（白會(huì)新等，2013；常啟發(fā)等，2013）。此外，黃腐酸還具有凈化水質(zhì)的作用（薛德林等，2009）。目前，黃腐酸對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物消化酶活性的研究鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)以煤炭中提取的黃腐酸為試驗(yàn)材料，通過(guò)在鯽魚(yú)基礎(chǔ)飼料中添加適量的黃腐酸，研究其對(duì)鯽魚(yú)生長(zhǎng)和消化酶活性的影響，旨在深入探討黃腐酸對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的影響及作用機(jī)制。

1　材料和方法

1.1黃腐酸及基礎(chǔ)飼料黃腐酸由內(nèi)蒙古永業(yè)農(nóng)豐生物科技有限責(zé)任公司提供，提取自風(fēng)化煤和褐煤，黃腐酸含量為12.05%。試驗(yàn)基礎(chǔ)飼料是根據(jù)鯽魚(yú)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)人工配制而成的顆粒飼料，基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理鯽魚(yú)馴養(yǎng)結(jié)束后，挑選體質(zhì)健壯、體重40 g左右的鯽魚(yú)60尾，隨機(jī)分放在6個(gè)55 cm×50 cm×60 cm的室內(nèi)循環(huán)水玻璃水族箱中。試驗(yàn)分對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10尾魚(yú)。對(duì)照組飼喂鯽魚(yú)基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼料中添加0.30%的黃腐酸。試驗(yàn)周期為30 d。試驗(yàn)前，試驗(yàn)魚(yú)用基礎(chǔ)飼料馴食7 d。每天定時(shí)投飼（9∶00、17∶00），24 h連續(xù)充氣，定時(shí)測(cè)定水溫、溶氧量、pH，日投飼量為魚(yú)體重的2%～3%，并根據(jù)魚(yú)的實(shí)際情況及時(shí)調(diào)整投飼量。每3 d換水1次，每次換水1/3。試驗(yàn)期間，水溫為23～26℃，溶氧量＞5.0 mg/L，pH為7.0～7.6。

表1　基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平%

1.3測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定試驗(yàn)開(kāi)始及試驗(yàn)結(jié)束的前1 d停止投飼，讓魚(yú)饑餓1 d后用電子天平稱(chēng)取魚(yú)體重，精確到0.01 g，計(jì)算平均增重率。計(jì)算公式為：

平均增重率/%=（試驗(yàn)?zāi)┢骄~(yú)體重-試驗(yàn)初平均魚(yú)體重）/試驗(yàn)初平均魚(yú)體重×100。

1.3.2消化酶活性測(cè)定

1.3.2.1樣品采集試驗(yàn)結(jié)束的次日，分別從每個(gè)水族箱取出6尾魚(yú)，斷脊處死取樣，在冰盤(pán)上解剖。取出魚(yú)的肝胰臟和全腸，剔除脂肪組織，用濾紙輕輕吸干水分，置于-20℃冰箱中冷凍備用。每個(gè)水族箱的樣品集中放在一起。

1.3.2.2粗酶液的制備將腸道和肝胰臟解凍之后，分別稱(chēng)取1 g組織，剪碎后，按W∶V=1∶10加入4℃0.9%的生理鹽水，在冰浴下用電動(dòng)勻漿器勻漿，勻漿液在3000 r/min、4℃離心30 min，取上清液于4℃保存，24 h內(nèi)測(cè)定酶活性。

1.3.2.3酶活性的測(cè)定方法和定義蛋白酶活性的測(cè)定：參照《生化技術(shù)導(dǎo)論》蛋白酶的測(cè)定方法，即福林-酚法，并略作改進(jìn)。蛋白酶活性的定義為：在37℃、pH 7.5的條件下，1 g組織中的蛋白酶1 min水解酪蛋白產(chǎn)生1 μg酪氨酸的量定為一個(gè)酶活力單位（U）。

淀粉酶和脂肪酶活性的測(cè)定：采用南京建成生物工程研究所研制的淀粉酶試劑盒（碘-淀粉比色法）和脂肪酶試劑盒，具體測(cè)定方法和步驟參照說(shuō)明書(shū)。淀粉酶活性（AMS）定義：每1 mg組織蛋白在37℃下與底物作用30 min，水解10 mg淀粉定義為1個(gè)淀粉酶活力單位（U）。脂肪酶活性（LPS）定義：每1 g組織蛋白在37℃下，在本反應(yīng)體系中與底物反應(yīng)1 min，每消耗1 μmol底物定義為1個(gè)脂肪酶活力單位（U）。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel做初步整理后，采用SPSS 17.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，差異顯著用P＜0.05表示。

2　結(jié)果

2.1黃腐酸對(duì)鯽魚(yú)平均增重率的影響由表2可知，與對(duì)照組相比，添加0.30%黃腐酸的試驗(yàn)組，其平均增重率提高30.96%（P＜0.05）。

表2　黃腐酸對(duì)鯽魚(yú)平均增重率的影響

2.2黃腐酸對(duì)鯽魚(yú)消化酶活性的影響由表3可知，與對(duì)照組相比，添加0.30%黃腐酸的試驗(yàn)組，魚(yú)的肝胰臟和腸道蛋白酶活性分別提高了31.69%（P＜0.05）和8.81%（P＞0.05）；淀粉酶活性分別提高40.00%和20.00%（P＜0.05）；脂肪酶活性分別提高8.07%和7.14%（P＞0.05）。

表3　黃腐酸對(duì)鯽魚(yú)消化酶活性的影響

3　討論

3.1黃腐酸對(duì)鯽魚(yú)生長(zhǎng)的影響有研究顯示，黃腐酸是一種安全的促生長(zhǎng)添加劑，在豬日糧中添加0.50%的黃腐酸可提高豬的平均日增重，降低料重比（常啟發(fā)等，2013）。在1～21日齡肉仔雞的日糧中添加0.024%～0.240%的黃腐酸，可增加肉仔雞的平均日增重并降低料重比（王晶等，2013）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在基礎(chǔ)飼料中添加0.30%的黃腐酸可顯著提高鯽魚(yú)的平均增重率。這一結(jié)果與張志功等（1999）報(bào)道的一致，從而進(jìn)一步證實(shí)了在魚(yú)飼料中添加黃腐酸可以加快其生長(zhǎng)速度。

3.2黃腐酸對(duì)鯽魚(yú)消化酶活性的影響消化酶是消化腺和消化系統(tǒng)所分泌的起消化作用的酶類(lèi)，具有酶的所有特征，能將大分子的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)催化成小分子，從而有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收。有研究顯示，消化酶活性是反映魚(yú)類(lèi)消化機(jī)能的重要指標(biāo)，魚(yú)類(lèi)消化酶活性的高低決定其對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化分解和吸收利用，增強(qiáng)魚(yú)體的消化酶活性能提高魚(yú)對(duì)飼料的消化吸收率和魚(yú)生長(zhǎng)速度（彭小玉和沈明浩，2010；李?lèi)?ài)杰，1996）。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在基礎(chǔ)飼料中添加0.30%的黃腐酸可顯著提高鯽魚(yú)的肝胰臟蛋白酶活性、肝胰臟和腸道淀粉酶活性，鯽魚(yú)腸道蛋白酶活性、肝胰臟和腸道脂肪酶活性也有小幅提高。本試驗(yàn)所用黃腐酸本身不能分泌蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶，但卻能增強(qiáng)這些消化酶的活性，其原因可能是黃腐酸進(jìn)入魚(yú)的消化道后，能刺激肝胰臟和腸道分泌消化酶，或使消化道已有消化酶的活性增強(qiáng)。此外，黃腐酸具有保護(hù)動(dòng)物胃腸黏膜的功效，投喂含有黃腐酸的飼料可以保護(hù)魚(yú)類(lèi)消化道中分泌消化酶的黏膜細(xì)胞，從而促進(jìn)消化酶的分泌（閆論，2004）。

4　小結(jié)

本試驗(yàn)研究表明，在體重40 g左右的鯽魚(yú)基礎(chǔ)飼料中添加0.30%的黃腐酸，可以促進(jìn)鯽魚(yú)的生長(zhǎng)，顯著增加魚(yú)體肝胰臟蛋白酶、淀粉酶和腸道淀粉酶的活性。

［1］白會(huì)新，常啟發(fā)，石寶明，等.黃腐酸對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能、胴體性狀和肉品質(zhì)的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2013，25（1）：133～139.

［2］常啟發(fā)，白會(huì)新，石寶明，等.黃腐酸對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)、血常規(guī)參數(shù)和免疫功能的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2013，25（8）：1836～1842.

［3］李?lèi)?ài)杰.水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料學(xué)［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1996.5～6.

［4］彭小玉，沈明浩.蒲公英水提物對(duì)鯽魚(yú)生長(zhǎng)、魚(yú)體成分、消化酶和免疫系統(tǒng)的影響［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2010，37（5）：13～17.

［5］王晶，張海軍，武書(shū)庚，等.飼糧中添加黃腐酸對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能和血液生化指標(biāo)的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2013，25（1）：140～147.

［6］薛德林，胡江春，王國(guó)安，等.海洋膠紅酵母、光合細(xì)菌、生化黃腐酸在海參育苗和養(yǎng)成中的應(yīng)用效果［J］.腐植酸，2009，4：19～24.

［7］閆論.腐植酸及其廣泛應(yīng)用［J］.新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，41（S1）：130～132.

［8］姚東偉.黃腐酸對(duì)番茄生長(zhǎng)產(chǎn)量及光合特性的影響：［碩士學(xué)位論文］［D］.晉中：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

［9］張志功，徐學(xué)軍，劉權(quán).生化黃腐酸添加劑飼喂羅非魚(yú)的效果［J］.內(nèi)陸水產(chǎn)，1999，3：13.

［10］趙繼芬.黃腐酸從風(fēng)化煤中溶出時(shí)的吸附平衡及溶解性研究：［碩士學(xué)位論文］［D］.太原：太原理工大學(xué)，2004.

［11］中山大學(xué)生物系生化微生物教研室.生化技術(shù)導(dǎo)論［M］.北京：人民教育出版社，1978.52～58.

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The effect of dietary fulvic acid on growth and digestive enzyme activities of Carassius auratus was investigated.Sixty Crucian carp（body weight was 40 g）were randomly divided into 2 treatment groups with 3 replicates of 10 each for 30d.The control group was fed the basal diet，and the experimental group was fed the basal diet supplemented with 0.30% fulvic acid.The results showed that compared with the control group，the average weight gain of the experimental group increased by 30.96%（P＜0.05）；the activities of proteinase and amylase in hepatopancreas and the activities of amylase in intestine of the experimental group increased by 31.69%，40.00%and 20.00%（P＜0.05），respectively，the activities of proteinase in intestine and lipase in hepatopancreas and intestine of the experimental group also increased by 8.81%，8.07%and 7.14%，but the difference was not significant（P＞0.05）.The results suggested that dietary fulvic acid could promote the growth of Crucian carp，and significantly improve the activities of proteinase and amylase in hepatopancreas and the activities of amylase in intestine.

crucian carp；feed；fulvic acid；growth；digestive enzyme

S963

A

1004-3314（2016）01-0032-03

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20160110

內(nèi)蒙古自然基金項(xiàng)目（2012MS0325）