陳　曉　王啟之　酈憶文　馬文靜　于東紅

(蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，蚌埠233000)

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NF-κB介導(dǎo)的促凋亡蛋白Bak表達(dá)在潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病中的作用研究

陳曉王啟之①酈憶文馬文靜于東紅

(蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，蚌埠233000)

目的：探討核因子-κB(Nuclear factor kappa B，NF-κB)介導(dǎo)的促凋亡蛋白Bak(Bcl-2 associated K protein gene，Bak)及TNF-α的表達(dá)在潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,UC)發(fā)病中的作用機(jī)制。方法：選購(gòu)80只清潔級(jí)SD大鼠，分為模型組和對(duì)照組。UC大鼠模型制造采用“三硝基苯磺酸+乙醇”方法，模型制造成功后觀察、評(píng)估結(jié)腸黏膜的大體形態(tài)及組織學(xué)變化。用免疫組織化學(xué)及RT-PCR法檢測(cè)模型組與對(duì)照組中的NF-κB、Bak、TNF-α的表達(dá)水平，并分析相互之間關(guān)系。結(jié)果：UC大鼠模型制造成功率為97%。模型組固有層和黏膜層內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較對(duì)照組明顯增多(P<0.01)；NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA表達(dá)水平模型組較對(duì)照組明顯升高(P<0.01)；Bak蛋白在模型組的炎細(xì)胞中表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P<0.01)，而在結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞中的水平與對(duì)照組無(wú)明顯差異(P>0.05)。NF-κB、TNF-α蛋白陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)及mRNA水平隨模型組的組織學(xué)等級(jí)升高而增強(qiáng)，而Bak蛋白陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)是減弱的(P<0.05)；且模型組中NF-κB與Bak蛋白的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.793,P<0.01)，NF-κB與TNF-α蛋白表達(dá)成正相關(guān)(r=0.892,P<0.01)。結(jié)論：NF-κB介導(dǎo)的促凋亡蛋白Bak的表達(dá)參與了UC的發(fā)生、發(fā)展。

核因子-κB； Bak；潰瘍性結(jié)腸炎

潰瘍性結(jié)腸炎的臨床主要特點(diǎn)是腹痛、腹瀉反復(fù)發(fā)作，不易治愈。其發(fā)病率在我國(guó)有逐年上升趨勢(shì)。UC的發(fā)病一直被認(rèn)為與免疫學(xué)相關(guān)，但具體機(jī)制至今尚未完全明確[1]，因此其有效的治療靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)是值得大家研究的。近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)一些自身免疫性疾病與凋亡蛋白Bcl-2家族異常表達(dá)有關(guān)[2，3]，隨著黏膜免疫學(xué)研究的不斷深入，有學(xué)者提出UC的發(fā)生可能與結(jié)腸上皮細(xì)胞的凋亡有關(guān)[4]。作為凋亡蛋白Bcl-2家族的一關(guān)鍵成員——Bak在UC發(fā)病中作用也是值得研究的。NF-κB作為可以調(diào)控機(jī)體免疫及細(xì)胞增殖、分化、凋亡，基因表達(dá)的重要分子，當(dāng)其被轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞核可促進(jìn)多個(gè)凋亡蛋白和促炎蛋白啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄[5，6]，包括對(duì)促凋亡蛋白Bak及促炎因子TNF-α[7]的轉(zhuǎn)錄。因此我們推測(cè)在UC的發(fā)病過(guò)程中可能與其結(jié)腸組織中NF-κB介導(dǎo)的Bak及TNF-α蛋白的異常表達(dá)有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)及RT-PCR方法檢測(cè)UC大鼠結(jié)腸黏膜組織中上述分子的蛋白及基因的表達(dá)水平，統(tǒng)計(jì)并分析相互之間的關(guān)系，從而進(jìn)一步了解NF-κB介導(dǎo)的凋亡通路在UC發(fā)病中的作用。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物80只SD大鼠，清潔級(jí)(購(gòu)自蚌埠醫(yī)學(xué)院動(dòng)物房)，模型組：隨機(jī)抽取60只；對(duì)照組：剩余20只。體重175～255 g，食欲良好，無(wú)疾病。

1.1.2主要試劑三硝基苯磺酸(TNBS)購(gòu)自Sigma公司；NF-κB兔抗大鼠多克隆抗體購(gòu)自北京博楓科生物技術(shù)有限公司；Bak兔抗大鼠抗體、TNF-α兔抗大鼠抗體均購(gòu)自美國(guó)RND公司；即用型免疫組化染色ElivisionTMplus試劑盒購(gòu)自武漢博士德試劑公司。引物由Primer 5軟件設(shè)計(jì)，引物序列為：NF-κB(282 bp)：上游5′-CCA GGC GGA CAT CTA CAA-3′，下游：5′-CAA GGC CAA ATG AAA GGA-3′；TNF-α(365 bp)：上游5′-GGT GAT CGG TCC CAA CAA GG -3′，下游5′-CCT CCC AGG TAC ATG GGC TC-3′；GAPDH(452 bp)：上游5′-ACC ACA GTC CAT GCC ATC AC-3′，下游5′-TCC ACC ACC CTG TTG CTG TA-3′。

1.2方法

1.2.1模型制備[8]實(shí)驗(yàn)大鼠于SPF級(jí)動(dòng)物房適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后禁食24 h，10%水合氯醛(3 ml/kg)腹腔注射，大鼠麻醉后用硅膠管插進(jìn)肛門，深度約8 cm，向腸管內(nèi)注入TNBS(100 mg/kg)和50%乙醇溶液共0.5 ml，之后注射約少量空氣約0.2 ml，使大鼠倒立1 min后平放，灌腸后正常喂養(yǎng)。

1.2.2標(biāo)本的留取方法與保存模型組的大鼠在灌腸后分別于第2～3天、第6～7天、第13～14天處死，截取整段結(jié)腸，選取紅腫、糜爛、潰瘍較明顯處及1、4、8 cm處腸段，用生理鹽水沖凈，一半用10%甲醛溶液固定留做HE染色、免疫組化，一半放-20℃冰箱留做RT-PCR。

1.2.3模型組UC大鼠的分級(jí)疾病活動(dòng)指數(shù)(Disease activity index，DAI)[9]：造模后大鼠每天稱重，首先計(jì)算：大鼠體質(zhì)量下降百分比=(處死當(dāng)天體質(zhì)量-第1天體質(zhì)量)/第1天體質(zhì)量×100%。體質(zhì)量無(wú)下降為0分，下降1%～5%：1分，下降6%～10%：2分，下降11%～15%：3分，下降>15%：4分；其次觀察大便稀松度：正常：0分，大便松散：2分，腹瀉：4分；再次檢測(cè)大便出血情況：正常：0分,隱血陽(yáng)性：2分，顯性出血：4分。將以上3種情況的分?jǐn)?shù)相加除以3即為DAI值。

組織學(xué)評(píng)分：根據(jù)Dieleman[10]提出的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，將標(biāo)本石蠟包埋，病理切片及HE染色后觀察：無(wú)潰瘍：0分，潰瘍直徑小于0.3 cm為1分，大于0.3 cm為2分；無(wú)炎癥：0分，輕度炎癥為1分，重度為2分；無(wú)肉芽腫：0分，有為1分；病變深度累及黏膜下層為1分，肌層為2分，漿膜層為3分；無(wú)纖維化：0分，輕度纖維化為1分，重度纖維化為2分。

結(jié)腸黏膜損傷指數(shù)[11]：即對(duì)結(jié)腸黏膜大體損傷進(jìn)行評(píng)分：表面光滑無(wú)損傷為0分；只有輕度充血水腫為1分；輕、中度充血水腫，伴糜爛為2分；重度充血水腫，伴潰瘍及壞死，但潰瘍最大直徑小于1 cm為3分；在3分基礎(chǔ)上潰瘍直徑>1 cm或全腸壁壞死為4分。

模型組UC大鼠的分級(jí)：根據(jù)DAI、組織學(xué)評(píng)分、結(jié)腸黏膜損傷指數(shù)三者之和將UC大鼠劃分為：輕度(Ⅰ級(jí))：0～5分；中度(Ⅱ級(jí))：6～12分；重度(Ⅲ級(jí))：13～18分。

1.2.4免疫組化及結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)按照Elivision兩步法進(jìn)行操作，光鏡下按陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)。以試劑公司提供的陽(yáng)性對(duì)照片作為陽(yáng)性對(duì)照，以PBS緩沖液(0.01 mol/L,pH7.4)代替一抗作為陰性對(duì)照。結(jié)果以胞質(zhì)、包膜和胞核出現(xiàn)棕黃色或褐色顆粒狀物者為陽(yáng)性細(xì)胞。陰性對(duì)照無(wú)棕黃色反應(yīng)產(chǎn)物。隨機(jī)取5個(gè)不重復(fù)的視野，應(yīng)用圖像處理系統(tǒng)進(jìn)行掃描分析，計(jì)算每個(gè)視野陽(yáng)性細(xì)胞面積占所有細(xì)胞面積的百分比，取5個(gè)高倍視野的均數(shù)，如大于15%則為陽(yáng)性；小于15%為陰性。

1.2.5半定量RT-PCR檢測(cè)NF-κB、TNF-α mRNA的表達(dá)及PCR產(chǎn)物鑒定首先對(duì)預(yù)留標(biāo)本進(jìn)行RNA的提取，然后對(duì)RNA質(zhì)量及濃度、純度進(jìn)行鑒定，最后按兩步法進(jìn)行cDNA提取及PCR擴(kuò)增。取5 μl擴(kuò)增產(chǎn)物，加入1 μl×6 Loading buffer，在1×TAE中行2%瓊脂糖凝膠電泳，0.02%EB染色，天能Gis 2000凝膠成像分析系統(tǒng)，分析目的基因與內(nèi)參照面積灰度積分比值。

2　結(jié)果

2.1各組大鼠結(jié)腸病理改變模型組大鼠結(jié)腸組織中固有層和黏膜層內(nèi)可見(jiàn)彌漫性中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)，結(jié)腸黏膜腺體排列紊亂，杯狀細(xì)胞減少，隨著模型組等級(jí)升高，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)越多，結(jié)腸黏膜腺體排列越紊亂。對(duì)照組大鼠結(jié)腸組織中固有層和黏膜層內(nèi)只有少許炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，明顯少于模型組(χ2=46.52，P<0.01)。模型組分級(jí)：Ⅰ級(jí)為20例；Ⅱ級(jí)為19例；Ⅲ級(jí)為19例。對(duì)照組為20例。UC模型制造97%的成功率。

2.2各組大鼠結(jié)腸組織中NF-κB、Bak、TNF-α蛋白的檢測(cè)NF-κB、TNF-α蛋白主要表達(dá)在黏膜炎癥、潰瘍處，模型組的結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞及炎細(xì)胞中(如：中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、漿細(xì)胞等)NF-κB、TNF-α表達(dá)水平明顯增強(qiáng)(P<0.01)，而對(duì)照組結(jié)腸黏膜下層、炎細(xì)胞的胞膜、胞質(zhì)和胞核中只有少許散在表達(dá)。Bak蛋白在模型組炎細(xì)胞中(如：中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、漿細(xì)胞等)表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組(P<0.01)，而在黏膜上皮細(xì)胞中的表達(dá)與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，見(jiàn)圖1、2，表1～3。

2.3NF-κB、Bak、TNF-α的表達(dá)水平與模型組分級(jí)之間的關(guān)系經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：NF-κB、TNF-α蛋白陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)隨模型組等級(jí)增高表達(dá)增強(qiáng)(P<0.05)；而Bak蛋白表達(dá)逐漸減弱(P<0.05)，見(jiàn)表4。

圖1　NF-κB、Bak、TNF-α在對(duì)照組結(jié)腸黏膜中的表達(dá)(×400,IHC)Fig.1　Expression of NF-κB,Bak and TNF-α in control group(×400,IHC)Note: A.NF-κB；B.Bak；C.TNF-α.

圖2　NF-κB、Bak、TNF-α在模型組結(jié)腸黏膜中的表達(dá)(×400,IHC)Fig.2　Expression of NF-κB,Bak and TNF-α in mode group(×400 ,IHC)Note: A.NF-κB；B.Bak；C.TNF-α.

2.4NF-κB與Bak表達(dá)之間的關(guān)系模型組共58例，其中51例NF-κB陽(yáng)性，10例Bak陽(yáng)性，41例陰性；而在NF-κB陰性的7例中，Bak表達(dá)陰性7例，陽(yáng)性無(wú)。經(jīng)Spearman法得出：模型組的NF-κB和Bak表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.793,P<0.01)。

2.5NF-κB與TNF-α表達(dá)之間的關(guān)系模型組共58例，其中51例NF-κB陽(yáng)性，49例TNF-α陽(yáng)性，陰性無(wú)；而在NF-κB陰性的7例中，TNF-α表達(dá)陰性6例，陽(yáng)性1例。經(jīng)Spearman法得出：模型組的NF-κB和TNF-α表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.892,P<0.01)。

表1NF-κB在模型組與對(duì)照組中的表達(dá)

Tab.1Expression of NF-κB in model group and normal group

GroupsnNF-κB+-Positiverate(%)Model5851788Control2061430

Note：χ2=25.37 ,P<0.01.

表2Bak在模型組與對(duì)照組中的表達(dá)

Tab.2Expression of Bak in model group and normal group

GroupsnBak+-Positiverate(%)Model58104817Control2015575

Note：χ2=22.78,P<0.01.

表3TNF-α在模型組與對(duì)照組中的表達(dá)

Tab.3Expression of TNF-α in model group and normal group

GroupsnTNF-α+-Positiverate(%)Model5852690Control2041620

Note：χ2=27.76 ,P<0.01.

GroupsNF-κBBakTNF-αGradeⅠ27.6±6.216.2±5.828.7±7.8GradeⅡ16.2±5.81)11.8±4.11)54.3±8.51)GradeⅢ65.8±8.91)2)6.3±2.31)2)72.0±10.11)2)

Note：Compared with gradeⅠ，1)P<0.05；compared with grade Ⅱ，2)P<0.05.

GroupsNF-κBGreyvalue /GAPDH(%)TNF-αGreyvalue/GAPDH(%)GAPDHGreyvalueControl55.2±3.412.9±2.285.2±8.922.5±3.2405.6±8.9GradeⅠ173.6±7.843.2±4.21)269.5±6.564.8±5.41)409.7±19.0GradeⅡ225.4±4.553.6±3.31)2)322.2±5.379.6±3.61)2)419.3±14.5GradeⅢ266.6±8.965.6±4.11)3)378.3±12.392.3±4.91)3)407.2±13.9

Note：Compared with control group,1)P<0.01；compared with grade Ⅰ，2)P<0.05;compared with grade Ⅱ,3)P<0.05.

圖3　NF-κB、TNF-α、GADPH mRNA在模型組及對(duì)照組結(jié)腸上皮中的表達(dá)Fig.3　Expression of NF-κB,TNF-α and GADPH mRNA in model group and normal groupNote: 1.Control；2.GradeⅠ；3.GradeⅡ；4.GradeⅢ.

2.6RT-PCR測(cè)定各組大鼠結(jié)腸黏膜NF-κB、TNF-α、GADPH mRNA的表達(dá)NF-κB：F=1 813.1，P<0.05；TNF-α:F=1 224.5，P<0.05。兩個(gè)因子四組灰度比值總體均數(shù)有顯著差異，兩因子各自不同等級(jí)之間需進(jìn)一步兩兩比較q檢驗(yàn)，得出：正常對(duì)照組結(jié)腸上皮GAPDH mRNA的表達(dá)無(wú)顯著差異(P>0.05)。NF-κB及TNF-α mRNA在對(duì)照組結(jié)腸上皮無(wú)明顯表達(dá)，模型組不同等級(jí)的結(jié)腸上皮均有表達(dá)，明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，隨模型組等級(jí)增高表達(dá)逐漸增強(qiáng)，Ⅲ級(jí)>Ⅱ級(jí)>Ⅰ級(jí)(P<0.05)。見(jiàn)圖3。

3　討論

潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病機(jī)制至今仍未明確，隨著免疫因素在其發(fā)病機(jī)制中的認(rèn)可，NF-κB介導(dǎo)的信號(hào)通路在UC發(fā)病中的作用研究一直是熱點(diǎn)[12，13]。當(dāng)NF-κB被活化后轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞核可啟動(dòng)多種靶基因的轉(zhuǎn)錄，介導(dǎo)細(xì)胞的增殖、凋亡，炎癥發(fā)生等[5，6]。近幾年NF-κB介導(dǎo)的凋亡蛋白的表達(dá)在一些自身免疫性疾病，多發(fā)性硬化等疾病中的作用得到證實(shí)[3]。其中研究較多為Bcl-2家族，Bcl-2家族根據(jù)其成員結(jié)構(gòu)及功能特點(diǎn)分為抗凋亡蛋白及促凋亡蛋白，Bak為其重要的促凋亡蛋白。Bak被激活后，主要通過(guò)分子內(nèi)或分子間組裝形成多聚體，在線粒體外膜上實(shí)行開孔，促使細(xì)胞凋亡[14]。然而，NF-κB介導(dǎo)的凋亡蛋白Bak在UC發(fā)病中的研究較少。

本實(shí)驗(yàn)采用“三硝基苯磺酸+乙醇”的方法制造UC大鼠模型，此方法造模與人類UC的結(jié)腸病理表現(xiàn)有較多相似之處，是較為理想的結(jié)腸炎模型。造模成功后，HE染色發(fā)現(xiàn)模型組大鼠結(jié)腸組織中固有層和黏膜層內(nèi)可見(jiàn)彌漫性中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)，明顯多于對(duì)照組(P<0.01)，且結(jié)腸黏膜腺體排列紊亂，杯狀細(xì)胞減少，隨著模型組等級(jí)升高，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)越多，結(jié)腸黏膜腺體排列越紊亂。隨后通過(guò)使用免疫組化及RT-PCR方法從蛋白及基因水平對(duì)大鼠結(jié)腸黏膜組織中NF-κB、Bak、TNF-α的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)對(duì)照組中炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較少，且NF-κB、TNF-α蛋白在對(duì)照組結(jié)腸黏膜下層、炎性細(xì)胞的胞膜、胞質(zhì)和胞核中表達(dá)也極少；而在模型組的結(jié)腸黏膜炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯增多，NF-κB、TNF-α蛋白在上皮細(xì)胞及中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、漿細(xì)胞等炎細(xì)胞中表達(dá)水平明顯增強(qiáng)，且其在模型組的mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組也是明顯升高的(P<0.01)；Bak蛋白在模型組的炎細(xì)胞中表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組(P<0.01)，而在結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞中的表達(dá)水平與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析得出：模型組隨著等級(jí)升高，NF-κB、TNF-α蛋白陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)及mRNA水平逐漸增強(qiáng)，而Bak蛋白陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)逐漸減弱，且通過(guò)相關(guān)性分析：NF-κB與TNF-α蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)，與Bak蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)。由上述我們得出結(jié)論：在UC的發(fā)生過(guò)程中，結(jié)腸組織中固有層和黏膜層內(nèi)大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，如中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、漿細(xì)胞等，NF-κB介導(dǎo)的信號(hào)通路在炎性細(xì)胞中對(duì)Bak蛋白的表達(dá)呈負(fù)調(diào)控作用，而結(jié)腸上皮細(xì)胞中調(diào)控作用不強(qiáng)，最終導(dǎo)致炎性細(xì)胞凋亡減慢，結(jié)腸上皮壞死脫落加速，潰瘍形成；同時(shí)NF-κB介導(dǎo)的信號(hào)通路對(duì)TNF-α的表達(dá)啟正調(diào)控作用，結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞及炎性細(xì)胞中的TNF-α大量表達(dá)激活了巨噬細(xì)胞、白細(xì)胞促進(jìn)血小板激活因子、前列腺素、NO和白三烯等，誘發(fā)炎癥介質(zhì)如IL-1、IL-6、IL-8的釋放，造成炎癥因子一系列的連鎖反應(yīng)[15，16]，最終結(jié)腸炎癥的爆發(fā)。結(jié)腸組織中炎性細(xì)胞浸潤(rùn)越明顯，NF-κB及致炎因子TNF-α的表達(dá)水平越高，Bak表達(dá)越低，UC的病情越嚴(yán)重。本實(shí)驗(yàn)不僅闡釋了NF-κB介導(dǎo)的促凋亡蛋白Bak參與了UC的發(fā)病機(jī)制同時(shí)也為UC的病情進(jìn)展、嚴(yán)重程度及預(yù)后的判定提供的新的參考指標(biāo)，為臨床治療藥物的研發(fā)提供新的靶點(diǎn)。雖然在UC的發(fā)病過(guò)程中，NF-κB介導(dǎo)的促凋亡蛋白Bak的作用在本實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)，但其具體的調(diào)控機(jī)制及凋亡通路中其他重要分子還有待我們進(jìn)一步探究。

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[收稿2015-11-09修回2015-12-28]

(編輯許四平)

Research of roles of NF-κB and promote apoptosis protein Bak in ucelrative colitis

CHEN Xiao,WANG Qi-Zhi,LI Yi-Wen，MA Wen-Jing,YU Dong-Hong.

The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College，Bengbu 233000，China

Objective:To study the expression levels of nuclear factor kappa B,Bcl-2 associated K and TNF-α proteins to discuss the effects of NF-κB and Bak proteins in the pathogenesis of UC.Methods: Eighty clean grade of adult Sprague-Dawley(SD)rats were used,male and female in half and then rando mly selected sixty as the model group,another twenty as the control group.SD rats model were manufactured by a compound method:Trinitrobenzene sulfonic acid(TNBS)+ ethanol.We observed and assessed colonic mucosa by the general morphology and histological changes.To applicated immunohistochemistry and RT-PCR methods to detected the protein and mRNA expression levels of NF-κB，Bak and TNF-α in the model groups and the control group and to analysed their relationships.Results: The successful rate of making model was 97%.The number of inflammatory cells in the model groups more than the control(P<0.01).Group immunohistochemical and RT-PCR，NF-κB and TNF-α proteins and mRNA in UC colon epithelium cells and inflammatory cells were higher than the control(P<0.01).Bak protein in inflammatory cells were lower than the control(P<0.01),but there was no statistical significance in epithelial cells(P>0.05).The expression levels of NF-κB,TNF-α increased as the histological grade increased(P<0.05),however,the expression level of Bak decreased(P<0.05).NF-κB in colonic mucosa of rats with UC had a significantly positive correlation with that of TNF-α(r=0.892,P<0.01),and negatively correlated with that of Bak(r=-0.793，P<0.01).Conclusion: The levels of NF-κB and Bak may be related to the occurrence and development of UC.

NF-κB； Bak；Ucelrative colitis

10.3969/j.issn.1000-484X.2016.09.009

，E-mail:wangqiz2004@sina.com。

陳曉(1984年-)，女，碩士，主治醫(yī)師，講師，主要從事胃腸道疾病研究，E-mail:chenxiao-0552@163.com。

R574.1

A

1000-484X(2016)09-1286-04