楊歡

（福清出入境檢驗檢疫局，福建福清 350300）

改進QuChERS -氣相色譜法測定水產(chǎn)品中硫丹殘留量

楊歡

（福清出入境檢驗檢疫局，福建福清 350300）

建立了水產(chǎn)品中硫丹殘留量的改進樣品快速處理技術(shù)（QuChERS）-氣相色譜法檢測方法。水產(chǎn)品樣品以乙腈為提取劑，應用改進的QuChERS方法進行凈化，并利用氣相色譜法進行檢測，以基質(zhì)匹配標準溶液外標法定量。在2～10 μg/kg添加水平范圍內(nèi)，α-硫丹和β-硫丹的平均回收率分別為97.8%～107.7%，98.5%～102.9%；測定結(jié)果的相對標準偏差分別為1.77%～10.4%，2.55%～5.84%；方法檢出限分別為1.8，2.0 μg/kg；定量限分別為5.4，6.0 μg/kg。該法滿足水產(chǎn)品中硫丹殘留量的測定要求。

硫丹殘留量；樣品快速處理技術(shù)；氣相色譜法；水產(chǎn)品

硫丹是一種高毒的有機氯殺蟲劑，有α-硫丹和β-硫丹兩個異構(gòu)體。因具有劇毒性、生物蓄積性和內(nèi)分泌干擾素作用，2011年在瑞士日內(nèi)瓦召開的“關(guān)于持久性有機污染物（簡稱POPs）的斯德哥爾摩公約第五次締約方大會”上，硫丹被正式納入公約中，在全球范圍內(nèi)被禁止使用［1-4］。我國在2006年曾出現(xiàn)鰻魚中硫丹超標事件［5］，致使硫丹殘留量成為我國出口水產(chǎn)品備受關(guān)注的檢測項目，相關(guān)產(chǎn)品也實施了該項目的檢查。為了保障食品安全與人體健康，國內(nèi)相繼開展了關(guān)于硫丹及其代謝物的風險評估的研究，取得了一定的成果［6-8］。

日本“肯定列表”規(guī)定：水產(chǎn)品中硫丹最大殘留量為0.004 mg/kg。硫丹為有機氯類農(nóng)藥，其在氣相色譜的電子捕獲檢測器和質(zhì)譜儀上均有良好的響應，因此氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法成為當前檢測水產(chǎn)品中硫丹殘留量的主流方法［9-16］。當前，水產(chǎn)品中硫丹測定主要采用固相萃取法進行前處理凈化［10-16］。固相萃取法凈化穩(wěn)定性好，回收率高，但操作過程繁雜，效率低下，難以滿足大批量樣品快速檢測的要求。

2003年，Anastassiades等［17］在基質(zhì)固相分散的基礎上開發(fā)了樣品快速處理方法（QuChERS），該方法操作簡便，效率高，目標物回收率穩(wěn)定，適用于多種基質(zhì)中農(nóng)藥殘留量的檢測，在農(nóng)藥殘留分析檢測領(lǐng)域中具有廣闊的應用前景。范廣宇等［9］采用經(jīng)典的QuEChERS方法，結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測定了水產(chǎn)品中的硫丹及其代謝物。筆者基于改進的QuChERS方法，探索以硅膠為主的分散固相凈化劑，有效消除水產(chǎn)品基質(zhì)中的雜質(zhì)干擾，結(jié)合使用氣相色譜法對水產(chǎn)品樣品中硫丹殘留量進行分析，實現(xiàn)了快速、便宜、簡單、有效、安全的分析目標。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：Agilent 7890B型，配備電子捕獲檢測器，美國Agilent科技有限公司；

超離心研磨儀：ZM200型，德國Retsch公司；高速分散器：IKA T-25型，德國IKA公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：RV10型，德國IKA公司；

冷凍離心機：3K-15型，德國Sigma公司；

乙酸鈉、無水硫酸鎂、無水硫酸鈉：分析純，國藥集團化學試劑有限公司；

乙腈：色譜純，德國默克公司；

弗羅里硅土、硅膠、中性氧化鋁、石墨化碳（GCB）、N-丙基乙二胺（PSA）、十八烷基鍵合硅膠：分析純，天津Agela Technologies公司；

硫丹標準品：純度＞99.0%，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測研究所；

凈化劑：無水硫酸鎂、硅膠和GCB按照質(zhì)量比3∶2∶1混合；

緩沖鹽：乙酸鈉和無水硫酸鎂按照質(zhì)量比1∶4混合。

1.2 硫丹標準溶液的配制

取適量硫丹標準品，以乙腈配成1.0 mg/L的標準儲備液，于冰箱中-4℃下保存。不同水產(chǎn)品基質(zhì)經(jīng)乙腈溶劑高速勻漿提取，得到1 g/mL的基質(zhì)提取溶液，以基質(zhì)提取液將硫丹標準儲備液稀釋成相應濃度的標準工作溶液。

1.3 測試條件

色譜柱：HP-5型毛細管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；載氣：高純氮氣（99.999%）；進樣口溫度：250℃；檢測器溫度：300℃；進樣體積：1 μL；不分流進樣；恒流模式；柱流量：0.8 mL/min；柱溫升溫程序：初始溫度為60℃，保持1 min，以10℃/min升溫至220℃，保持5 min，再以10℃/min升溫至280℃，運行溫度為300℃，保持3 min。

1.4 樣品處理

樣品除去鱗、鰓及內(nèi)臟后剁碎并均質(zhì)，取約500 g裝入潔凈的容器中密封備用，冷藏保存。

稱取解凍樣品5.00 g，置于50 mL具塞離心管中，加入緩沖鹽4.00 g，乙腈20.0 mL，以轉(zhuǎn)速10 000 r/min高速勻漿1.0 min，于另一50 mL離心管中加入20.0 mL乙腈清洗高速分散器刀頭，合并乙腈溶液。以4 500 r/min轉(zhuǎn)速離心5 min，取上清液于40℃下蒸發(fā)至約2 mL，將其轉(zhuǎn)移至帶刻度的比色管中，洗滌濃縮瓶并將洗滌液轉(zhuǎn)移至帶刻度的比色管中，以乙腈定容至5.00 mL，向其中添加無水硫酸鈉1.0～2.0 g，渦旋1 min，待凈化。

于5 mL具塞離心管中稱取凈化劑0.30 g，準確吸取上述定容液1.50 mL并加入到裝有凈化劑的離心管中，渦旋1.0 min混勻，以10 000 r/min轉(zhuǎn)速離心3 min，吸附上清液并經(jīng)0.22 μm濾膜過濾，待分析。

1.5 定量方法

取不同質(zhì)量濃度水平的基質(zhì)匹配硫丹標準溶液進行測定，以色譜峰面積對硫丹標準溶液的濃度繪制標準工作曲線。將處理后的樣品溶液進行分析，以外標法對樣品中α-硫丹和β-硫丹的殘留量進行定量。

2 結(jié)果與討論

2.1 吸附劑的選擇

十八烷基鍵合硅膠和PSA作為分散固相萃取的常用吸附劑［17］，可以吸附基質(zhì)中的色素、有機酸和糖類等雜質(zhì)，但這兩種填料價格相對昂貴；弗洛里硅土、硅膠和中性氧化鋁等正相吸附劑對溶液中極性物質(zhì)吸附能力較強，但對硫丹等弱極性物質(zhì)吸附力較弱，因而采用正相吸附劑可以選擇性地去除乙腈提取液中的極性雜質(zhì)；同時，弗洛里硅土、硅膠和中性氧化鋁等正相吸附劑價格低廉，在乙腈溶液中有較好的分散度，可以在嚴格去除提取液中水分的情況下凈化樣品，降低檢測成本。分別考察弗洛里硅土、硅膠、中性氧化鋁等正相填料的凈化效果，發(fā)現(xiàn)三者去除雜質(zhì)的效果均較好，其中硅膠的回收率最高，因此選擇硅膠為分散固相萃取的吸附劑。在此基礎上，向硅膠中添加吸水劑無水硫酸鎂以降低凈化過程中水分對硅膠凈化效果的干擾，添加適量GCB以去除色素。

所選擇的吸附劑對3種水產(chǎn)品基質(zhì)的凈化效果對比色譜圖見圖1。由圖1可知，目標峰實現(xiàn)基線分離且不存在雜質(zhì)干擾，凈化效果明顯。

2.2 分析液脫水的優(yōu)化

經(jīng)典QuChERS方法僅在樣品的提取步驟加入脫水的無水硫酸鈉鹽，對于含水量高的水產(chǎn)品，不能很好地去除提取液乙腈中的水分。水分的存在將改變硅膠對硫丹的吸附效果，增加對硫丹的吸附量，從而降低目標物的回收率。

為了驗證脫水步驟對硫丹回收率的影響，以蝦為樣品，在添加10 μg/kg濃度水平下進行回收試驗，綜合考察兩種脫水方法：（1）按照經(jīng)典的QuChERS方法僅僅在提取步驟加入無水硫酸鈉，進行樣品前處理，分析測定α-硫丹和β-硫丹的色譜峰面積；（2）按照本方法在提取步驟加入無水硫酸鈉脫水，在定容后的溶劑中加入無水硫酸鈉脫水，分析測定α-硫丹和β-硫丹的色譜峰面積。結(jié)果表明，改進的QuChERS方法α-硫丹和β-硫丹的色譜峰面積增大一倍以上，表明定容液二次脫水對于提高硫丹回收率的作用效果顯著。

2.3 基質(zhì)效應的考察

基質(zhì)效應是定量分析中影響測定結(jié)果準確性的重要因素。實驗采用單濃度比較法考察3種水產(chǎn)品的基質(zhì)效應，試驗設計如下：分別稱取適量的蝦、鰻魚和黃瓜魚樣品，采用乙腈稀釋的硫丹標準溶液進行添加，按照1.4方法處理，最后得到濃度水平均為20.0 μg/kg的待測樣品分析液。將樣品分析液與相同濃度水平的溶劑稀釋標準溶液進行測定，以相同濃度水平的樣品基質(zhì)溶液色譜峰面積和溶劑稀釋標準溶液色譜峰面積比值表示基質(zhì)效應，結(jié)果見表1。

圖1 蝦、鰻魚和黃瓜魚的凈化效果

表1 3種水產(chǎn)品中α-硫丹和β-硫丹的基質(zhì)效應

表1中的數(shù)據(jù)表明，3種基質(zhì)對兩種硫丹異構(gòu)體均存在較為明顯的基質(zhì)抑制效應，因此采用基質(zhì)校正曲線進行校正將獲得更加準確的定量結(jié)果。

2.4 線性范圍、檢出限與定量限

取一系列不同濃度的基質(zhì)標準溶液，按本方法所確定的分析條件分別測定，以色譜峰面積對溶液的質(zhì)量濃度進行線性回歸。按照信噪比為10計算得出水產(chǎn)品中α-硫丹和β-硫丹的定量限（LOQ）；按照信噪比為3計算得檢出限（LOD），結(jié)果見表2。

表2 線性方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍、定量限、檢出限

2.5 加標回收試驗

以空白的蝦、鰻魚和黃瓜魚為試驗材料，稱取適量樣品并添加硫丹標準溶液，分別制得2，6，10 μg/kg的3個添加水平的加標樣品，每個水平重復測定6次，計算回收率和測定結(jié)果的相對標準偏差，相關(guān)結(jié)果見表3。從表3可知，所建立的方法回收率和精密度結(jié)果均滿足方法學考察要求［18］。

表3 3種水產(chǎn)品中硫丹加標回收試驗結(jié)果（n=6）

3 結(jié)語

向樣品中加入緩沖鹽，以乙腈高速勻漿提取，以無水硫酸鎂、硅膠和GCB混合物為固相分散凈化劑，用氣相色譜法檢測，外標法定量，建立了水產(chǎn)品中硫丹殘留量的改進QuEChERS分析方法。該方法快捷、簡便、便宜、可靠、安全，對其它水產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留快速檢測具有參考價值。

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環(huán)境水樣中鄰苯二甲酸酯類化合物及降解產(chǎn)物的檢測方法

申請公布號：CN105823837A 申請公布日：2016.08.03

申請人：江蘇大學

本發(fā)明公開了環(huán)境水樣中鄰苯二甲酸酯類化合物及降解產(chǎn)物的檢測方法，屬于水環(huán)境質(zhì)量檢測分析領(lǐng)域。本發(fā)明根據(jù)被檢測物質(zhì)的極性，優(yōu)選離子液體的比例，通過毛細力將其支載到中空纖維膜壁的微孔內(nèi)形成液膜，調(diào)節(jié)合適的樣品及受體酸堿度，將受體封裝在中空纖維膜的內(nèi)腔中制成萃取裝置。將該萃取裝置置于樣品中，即形成一個水-有機溶劑兩相或水-有機溶劑-水三相體系。富集凈化后，甲醇洗脫，高效液相色譜分析目標污染物濃度。該方法可用于環(huán)境中鄰苯二甲酸酯類塑化劑的檢測，為其環(huán)境行為分析提供數(shù)據(jù)，評價環(huán)境水體的質(zhì)量。方法快速、可靠、操作簡單、環(huán)境友好。

一種快速檢驗污染土壤生態(tài)毒性測試板的制備方法

申請公布號：CN105838773A 申請公布日：2016.08.10

申請人：西北農(nóng)林科技大學

一種快速檢驗污染土壤生態(tài)毒性測試板的制備方法，將甲酚紅、氯化鉀和碳酸氫鈉溶于無二氧化碳水配制成溶液，然后加入瓊脂得到混合顯色劑；把葡萄糖溶于無二氧化碳水中制成有機碳源母液；將土壤污染物質(zhì)標準品溶于無二氧化碳水中制備母液按稀釋梯度進行稀釋；將混合顯色劑在無菌工作臺內(nèi)加入孔微平板每個孔內(nèi)，制成檢測板，通風干燥后于4℃保存；將制備的有機碳源和污染物質(zhì)母液分別加入另一個微平板孔內(nèi)，制成反應板；在反應板中每孔加入0.35 g土壤，將檢測板緊扣反應板上，25℃條件下培養(yǎng)6 h，將檢測板取下在酶標儀上讀取吸光值；采用本發(fā)明方法制備的土壤生態(tài)毒性測試板具有使用方便、快速、測試結(jié)果準確等特性。

一種魚油產(chǎn)品中脂肪酸的檢測方法

申請公布號：CN105866269A 申請公布日：2016.08.17

申請人：青島正方元信公共衛(wèi)生檢測有限公司

Determinatinon of Endosulfan Residues in Aquatic Products by Improved QuChERS-Gas Chromatography

Yang Huan
（Fuqing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau， Fuqing 350300， China）

A method was developed for determination of endosulfan residue in aquatic products. The aquatic products were extracted with acetonitrile， cleaned up in improved QuChERS way， then analyzed with gas chromatography， and quantified by matrix-match standard solution with external standard method. The average fortified recoveries of α-endosulfan and β-endosulfan in samples were found in the range of 97.8%-107.7% and 98.5%-102.9% at three fortified levels from 2 to 10 μg/kg， with relative standard deviations of 1.77%-10.4% and 2.55%-5.84%， respectively. The limits of detectionfor two pesticides were 1.8 μg/kg and 2.0 μg/kg， while the limits of quantification were 5.4 μg/kg and 6.0 μg/kg. All of the test results fit the requirements of determination of endosulfan content in aquatic products.

endosulfan residue； QuChERS； gas chromatography； aquatic products

本發(fā)明屬于成分檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種魚油產(chǎn)品中脂肪酸的檢測方法，檢測流程包括樣液配制、皂化反應、甲酯化反應、脫水處理和定容測試5個步驟，將脫水溶液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進行濃縮并定容，然后使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進行測定得出二十碳五烯酸甲酯和二十二碳六烯酸甲酯的色譜峰譜圖。分別進行二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸含量的定性分析和定量測定，通過比較樣液色譜峰的保留時間與標準樣品溶液的色譜峰保留時間是否一致及選擇的離子是否均出現(xiàn)，來判斷樣品中是否存在二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸。該法降低了成本，減輕了對實驗人員產(chǎn)生的職業(yè)危害，反應溫和、迅速、高效，檢測精密度高，檢測原理科學，操作步驟簡便，應用環(huán)境友好。

O657.7

A

1008-6145（2016）05-0049-04

10.3969/j.issn.1008-6145.2016.05.013

聯(lián)系人：楊歡；E-mail： 43548624@qq.com

2016-06-28