秦風(fēng)雪　卓　瑪　琪美格

(青海省交通醫(yī)院婦科，青海　西寧　810000)

?

宮頸鱗癌中基質(zhì)金屬蛋白酶-26和上皮型鈣黏蛋白的表達(dá)及其臨床意義

秦風(fēng)雪卓瑪1琪美格2

(青海省交通醫(yī)院婦科，青海西寧810000)

目的檢測(cè)宮頸鱗癌中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-26和上皮型鈣黏蛋白(E-cadherin)的表達(dá)，觀察其臨床意義。方法58例宮頸鱗癌患者的臨床資料及術(shù)后存留的蠟塊組織作為觀察組，25例宮頸高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組織作為對(duì)照組1，25例宮頸低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組織作為對(duì)照組2，25例慢性宮頸炎的組織作為對(duì)照組3。應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)四組中MMP-26和E-cadherin的表達(dá)。結(jié)果四組中MMP-26和E-cadherin的陽(yáng)性率差異顯著(P<0.0001)。觀察組中MMP-26和E-cadherin的陽(yáng)性率均與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和脈管侵犯密切相關(guān)，而與患者年齡、是否角化無(wú)明顯相關(guān)性。線(xiàn)性相關(guān)分析顯示MMP-26和E-cadherin無(wú)明顯相關(guān)性。結(jié)論宮頸鱗癌中MMP-26和E-cadherin異常表達(dá)是病變形成和進(jìn)展的促進(jìn)因素。

宮頸鱗癌；基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-26；E-cadherin；免疫組化

宮頸病變形成常與人乳頭瘤病毒(HPV)相關(guān)。研究顯示在HPV的作用下，宮頸上皮異型增生形成不同程度的上皮內(nèi)瘤變，繼而形成原位癌和浸潤(rùn)性鱗癌〔1〕。腫瘤形成中繼發(fā)的浸潤(rùn)性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移是臨床中重要的生物學(xué)行為。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-26是MMPs家族中新發(fā)現(xiàn)的成員，其與腫瘤的進(jìn)展有一定關(guān)系〔2，3〕。而上皮型鈣黏蛋白(E-cadherin)在正常上皮細(xì)胞中高表達(dá)，對(duì)細(xì)胞間的連接和細(xì)胞間信號(hào)的交換有重要作用〔4，5〕。本研究觀察宮頸鱗癌中MMP-26和E-cadherin的表達(dá)特征，分析其在不同臨床病理特征中的表達(dá)差別。

1　資料與方法

1.1一般資料我院行子宮頸鱗癌根治手術(shù)的患者58例作為觀察組，留取術(shù)后腫瘤的蠟塊組織，年齡34～78歲，平均58.8歲。均由病理醫(yī)師閱片，并符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。術(shù)前均未行放、化療。25例宮頸高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組織作為對(duì)照組1，年齡27～77歲，平均51.8歲。25例宮頸低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變組織作為對(duì)照組2，年齡23～68歲，平均48.9歲。25例慢性宮頸炎組織作為對(duì)照組3，年齡37～65歲，平均53.6歲。各組年齡無(wú)明顯差異。

1.2MMP-26和E-cadherin表達(dá)的檢測(cè)術(shù)后組織均應(yīng)用石蠟進(jìn)行包埋，行免疫組化SP法檢測(cè)MMP-26和E-cadherin蛋白的表達(dá)，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色，嚴(yán)把質(zhì)控關(guān)。

1.3MMP-26和E-cadherin結(jié)果的判讀方法以出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性，MMP-26定位在細(xì)胞質(zhì)，E-cadherin定位在細(xì)胞膜，均選擇上皮細(xì)胞集中且染色強(qiáng)度為中-強(qiáng)的區(qū)域進(jìn)行觀察(3個(gè)400倍視野)，計(jì)算陽(yáng)性率的平均值，以<10%計(jì)為陰性，以≥10%計(jì)為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線(xiàn)性相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.14組MMP-26和E-cadherin陽(yáng)性率的比較觀察組中MMP-26的陽(yáng)性率明顯高于其他3組，E-cadherin的陽(yáng)性率明顯低于其他3組。見(jiàn)表1。

表1　4組MMP-26和E-cadherin陽(yáng)性率比較〔n(%)〕

2.2觀察組不同臨床病理特征中MMP-26和E-cadherin陽(yáng)性率的比較觀察組MMP-26和E-cadherin的陽(yáng)性率均與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和脈管侵犯密切相關(guān)。而與年齡、是否角化無(wú)明顯相關(guān)性。見(jiàn)表2。

表2　觀察組不同臨床病理特征中MMP-26和E-cadherin的比較〔n(%)〕

2.3觀察組MMP-26和E-cadherin的相關(guān)性觀察組MMP-26和E-cadherin無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。

3　討　論

宮頸鱗癌是由鱗狀上皮異型增生而轉(zhuǎn)變而來(lái)的，年輕患者常是HPV相關(guān)的，而老年人常是非HPV相關(guān)的〔6，7〕。病變進(jìn)展中涉及腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的異常表達(dá)。MMP-26是一種基質(zhì)溶解因子，是新近從人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系cDNA文庫(kù)存克隆出來(lái)的〔8〕，與MMP-7有一定的相似性，其基因定位于11號(hào)染色體短臂上，所編碼的蛋白質(zhì)由261個(gè)氨基酸殘基組成，其啟動(dòng)子與其他成員的基因結(jié)構(gòu)和功能特征相異，MMP-26基因有一個(gè)一致的TATA盒和一個(gè)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)分別位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游60、35核苷酸。MMP-26的啟動(dòng)子有只供少數(shù)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的位點(diǎn)〔9，10〕。MMP-26可以有效裂解纖維蛋白原、細(xì)胞外基質(zhì)、玻璃體結(jié)合蛋白、變性膠原和抗胰蛋白酶等，對(duì)腫瘤的侵襲和血管生成可能有一定的作用〔11，12〕。MMP-26在作用過(guò)程中對(duì)MMPs家族中的其他成員有明顯的激活作用〔13，14〕，此種功能可以使對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的降解作用明顯增強(qiáng)，如對(duì)MMP-9的激活作用等〔15〕。彭芳等〔16〕通過(guò)觀察胃腺癌中MMP-26蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)其在腫瘤中高表達(dá)，且其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期密切相關(guān)，認(rèn)為其高表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。E-cadherin是近年來(lái)關(guān)注最多的黏附分子，正常鱗狀上皮表達(dá)在細(xì)胞膜，且染色強(qiáng)，也顯示出細(xì)胞間連接的牢固作用〔17〕。E-cadherin的黏附作用要依賴(lài)鈣離子，主要介導(dǎo)同質(zhì)、同嗜性黏附作用。E-cadherin的功能丟失可以引起細(xì)胞接觸性抑制作用，因此其被認(rèn)為是一種腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因子。E-cadherin在宮頸癌中的作用可能與多種因子異常表達(dá)后的協(xié)同作用相關(guān)，共同促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展〔18〕。

本研究提示宮頸鱗癌中MMP-26高表達(dá)、E-cadherin低表達(dá)在病變形成中具有重要作用。宮頸低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變、鱗癌是漸進(jìn)性的病變過(guò)程，從基底細(xì)胞到表層細(xì)胞的異型程度是上皮內(nèi)瘤變的診斷標(biāo)準(zhǔn)，但是基底層下浸潤(rùn)性生長(zhǎng)是鱗癌的重要客觀依據(jù)。在此過(guò)程中不僅涉及HPV感染的作用，還與MMP-26和E-cadherin的蛋白異常有關(guān)。本研究提示二者異常表達(dá)對(duì)促進(jìn)腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和脈管的浸潤(rùn)有明顯的促進(jìn)作用〔19，20〕。MMP-26和E-cadherin對(duì)宮頸病變進(jìn)展的作用主要表現(xiàn)在對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的調(diào)節(jié)作用中〔21〕。E-cadherin的表達(dá)丟失使上皮細(xì)胞間的連接緊密程度下降，細(xì)胞松動(dòng)后使同質(zhì)性黏附能力下降，此時(shí)細(xì)胞易于脫離原發(fā)灶，使腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能升高，當(dāng)腫瘤細(xì)胞遷移后，在條件適合的組織中停留下來(lái)，此時(shí)異質(zhì)性黏附起一定的作用，形成轉(zhuǎn)移灶或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌。MMP-26是腫瘤細(xì)胞分泌產(chǎn)生的，此時(shí)腫瘤細(xì)胞周?chē)幕啄て琳现饾u溶解，脫離原發(fā)灶的腫瘤細(xì)胞易于通過(guò)溶解的細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)入周?chē)g質(zhì)中，不僅直接蔓延性生長(zhǎng)，還通過(guò)脈管播散，形成遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，在此過(guò)程中家族中的其他成員也參與作用，因此其機(jī)制較為復(fù)雜〔22，23〕。

綜上，宮頸鱗癌中MMP-26和E-cadherin異常表達(dá)不僅可以促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，還對(duì)腫瘤的進(jìn)展及播散有一定作用。

1徐琳，李會(huì)敏，劉志晶，等.MMP-26蛋白在子宮頸癌中的表達(dá)及意義〔J〕.中國(guó)婦幼保健，2010；25(30)：4435-7.

2關(guān)立華，張淑蘭.MMP-26在正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)〔J〕.中華腫瘤防治雜志，2006；13(9)：651-3.

3魏力，郝鳳英.MMP-26在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)〔J〕.醫(yī)學(xué)臨床研究，2008；25(3)：419-21.

4Li YY，Zhou CX，Gao Y.Moesin regulates the motility of oral cancer cells via MT1-MMP and E-cadherin/p120-catenin adhesion complex〔J〕.Oral Oncol，2015；51(10)：935-43.

5Foda AA，El-Hawary AK，Aziz AA.Colorectal adenocarcinoma with mucinous component：relation of MMP-13，EGFR and E-cadherin expressions to clinicopathological features and prognosis〔J〕.APMIS，2015；123(6)：502-8.

6Murakami A，F(xiàn)ukushima C，Yoshidomi K，etal.Suppression of carbonyl reductase expression enhances malignant behaviour in uterine cervical squamous cell carcinoma：carbonyl reductase predicts prognosis and lymph node metastasis〔J〕.Cancer Lett，2011；311(1)：77-84.

7Kaewprag J，Umnajvijit W，Ngamkham J，etal.HPV16 oncoproteins promote cervical cancer invasiveness by upregulating specific matrix metalloproteinases〔J〕.PLoS One，2013；8(8)：e71611.

8關(guān)立華，張淑蘭.基質(zhì)金屬蛋白酶-26和金屬蛋白酶組織抑制劑-4在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)〔J〕.山西醫(yī)藥雜志，2007；36(2)：121-4.

9Yu C，Wang Z，Xu X，etal.Circulating hepatocellular carcinoma cells are characterized by CXCR4 and MMP26〔J〕.Cell Physiol Biochem，2015；36(6)：2393-402.

10Marchenko GN，Marchenko ND，Leng J，etal.Promoter characterization of the novel human matrix metalloproteinase-26 gene：regulation by the T-cell factor-4 implies specific expression of the gene in cancer cells of epithelial origin〔J〕.Biochem J，2002；363(2)：253-62.

11吳年付，湯志剛，陳炯，等.胰腺癌中MMP-26 mRNA和蛋白的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2014；49(7)：981-3.

12王陽(yáng)，李偉，李一雷，等.乳腺良、惡性病變組織中MMP-26蛋白的表達(dá)及其與ER的關(guān)系〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2006；22(2)：182-4.

13Ripley D，Tunuguntla R，Susi L，etal.Expression of matrix metalloproteinase-26 and tissue inhibitors of metalloproteinase-3 and-4 in normal ovary and ovarian carcinoma〔J〕.Int J Gynecol Cancer，2006；16(5)：1794-800.

14Pilka R，Norata GD，Domanski H，etal.Matrix metalloproteinase-26(matrilysin-2) expression is high in endometrial hyperplasia and decreases with loss of histological differentiation in endometrial cancer〔J〕.Gynecol Oncol，2004；94(3)：661-70.

15李慧敏，李一雷，宋雪雪，等.人子宮頸癌組織中MMP-26、MMP-9和TIMP-4的表達(dá)及其意義〔J〕.吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2010；36(2)：354-6.

16彭芳，陳麗榮.MMP-26和MMP-7在胃腺癌中表達(dá)的臨床意義研究〔J〕.實(shí)用腫瘤雜志，2008；23(2)：116-9.

17Sun XJ，Zhang P，Li HH，etal.Cisplatin combined with metformin inhibits migration and invasion of human nasopharyngealcarcinoma cells by regulating E-cadherin and MMP-9〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev，2014；15(9)：4019-2.

18吳卉娟，劉少揚(yáng)，江大瓊，等.宮頸癌中COX-2與P53、E-cadherin蛋白表達(dá)的關(guān)系〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2004；20(5)：568-70.

19王彩霞，吳慶田，侯霞，等.胃竇癌組織中MMP-26 mRNA及蛋白的表達(dá)〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2012；28(9)：1015-7.

20Nishi H，Kuroda M，Isaka K.Estrogen and estrogen receptor induce matrix metalloproteinase-26 expression in endometrial carcinoma cells〔J〕.Oncol Rep，2013；30(2)：751-6.

21Barros SS，Henriques AC，Pereira KM，etal.Immunohistochemical expression of matrix metalloproteinases in squamous cell carcinoma of the tongue and lower lip〔J〕.Arch Oral Biol，2011；56(8)：752-60.

22黎聯(lián)，梅同華，周向東，等.基質(zhì)金屬蛋白酶26蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及其意義〔J〕.癌癥，2009；28(1)：76-81.

23關(guān)立華，魏力，張淑蘭.MMP-7和MMP-26在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)〔J〕.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2007；15(3)：389-91.

〔2015-01-19修回〕

(編輯苑云杰)

西寧市科技項(xiàng)目(No.2015-K-17)

秦風(fēng)雪(1975-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事婦科疾病研究。

R737.33

A

1005-9202(2016)16-3978-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.16.050

1青海省第二人民醫(yī)院婦產(chǎn)科2青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤婦科