王宇

中國民航飛行學院醫(yī)院檢驗科，四川廣漢618307

全自動血液分析儀外周血細胞計數(shù)的影響因素探討

王宇

中國民航飛行學院醫(yī)院檢驗科，四川廣漢618307

目的探討全自動血液分析儀外周血細胞計數(shù)的影響因素。方法選擇中國民航飛行學院醫(yī)院健康體檢人群120例，在不同抗凝劑、不同溫度和檢測時間采用Sysmex XT-1800i全自動血細胞分析儀檢測紅細胞（RBC）、白細胞（WBC）和血小板（PLT）。結(jié)果肝素鈉、枸櫞酸鈉和EDTA-K2抗凝劑檢測WBC和RBC差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），肝素鈉和枸櫞酸鈉抗凝的血標本PLT計數(shù)顯著低于EDTA-K2抗凝血標本（P＜0.05）。25℃室溫保存下血標本W(wǎng)BC、RBC和PLT在30 min、2、4、6 h的測定結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。在4℃低溫保存下血標本W(wǎng)BC、RBC在30 min、2 h、4 h、6 h的測定結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。而PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測定結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論抗凝劑、溫度和檢測時間是影響外周血計數(shù)的重要因素，外周血細胞計數(shù)應(yīng)該選擇EDTA-K2抗凝劑、25℃、6h小時內(nèi)完成檢測。

外周血；細胞計數(shù)；影響因素

［Abstract］Objective To study the influence factors of peripheral blood cells counts of the fully automatic hematology analyzer.Methods 120 cases of healthy persons with physical examination in the Hospital of Civil Aviation Flight University of China were selected，and the red cells，white cells and blood platelets were tested by the Sysmex XT-1800i fully automatic hematology analyzer under different anticoagulant agents，temperatures and test time.Results The difference in detecting the white cells and red cells between the heparin sodium，sodium citrate and EDTA-K2 anticoagulant agent had no statistical significance（P＞0.05），the blood platelet count of blood specimen of heparin sodium and sodium citrate anticoagulation was obviously lower than that of the EDTA-K2 anticoagulation blood specimen（P＜0.05），the differences in the measurement results of the red cells，white cells and blood platelets of the blood specimens stored at a room temperature of 25℃after 30 min，2 h，4 h and 6 h（P＞0.05），and the differences in the measurement results of blood platelet after 30 min，2 h，4 h and 6 h had statistical significance（P＜0.05）.Conclusion The anticoagulant agent，temperature and test time are the important influence factors of peripheral blood count，and the peripheral blood cell count should choose EDTA-K2 anticoagulant agent，and the test should be finished within 6 h at 25℃.

［Key words］Peripheral blood；Cell count；Influence factor

血液常規(guī)分析是臨床診斷炎癥、感染，以及血液系統(tǒng)疾病的重要輔助指標。血液常規(guī)分析組合項目包括外周全血細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù)、以及各指標衍生參數(shù)等。其中，紅細胞、白細胞、血小板計數(shù)是血液常規(guī)分析的重要關(guān)鍵指標［1-2］。然而由于血液成分復雜多樣，且存在個體差異性，影響外周靜脈全血細胞計數(shù)的因素較多［3-5］。該研究從抗凝劑的類型、標本保存時間、保存溫度3個方面對外周靜脈全血細胞計數(shù)的影響進行探討，以指導臨床檢驗技術(shù)人員科學制定質(zhì)量控制和保證措施，促進血液常規(guī)分析質(zhì)量的提高，報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇中國民航飛行學院醫(yī)院健康體檢人群120例，包括男性60例和女性60例，年齡分布在12～65歲之間，平均年齡為（36.2±10.8）歲。

1.2儀器和試劑

Sysmex XT-1800i全自動血細胞分析儀及配套試劑，肝素抗凝管，EDTA-K2抗凝管，奧林巴斯顯微鏡，瑞氏-吉姆薩染色液。

1.3研究方法

所有120例研究對象于早晨8∶00-9∶00空腹采集3 mL的肝素鈉抗凝血、枸櫞酸鈉和EDTA-K2抗凝血。EDTA-K2抗凝的全血標本再分裝成等體積的兩份，一份在室溫下保存，分別于采血后0 min、30 min、2 h、4 h、6 h檢測WBC、RBC和PLT三個計數(shù)參數(shù)；另一份標本保存在4℃，分別于0 min、30 min、2 h、4 h、6 h檢測BC、RBC和PLT3個計數(shù)參數(shù)。

1.4統(tǒng)計方法

采用SPSS 13.0系統(tǒng)檢測，計量資料用均值±標準差（±s）表示，多組間均值比較，采用F檢驗，兩組間均值比較采用t檢驗。

2　結(jié)果

2.1不同抗凝劑血常規(guī)參數(shù)計數(shù)測定結(jié)果

結(jié)果如表1所示，肝素鈉、枸櫞酸鈉和EDTA-K2抗凝劑檢測WBC和RBC差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），而三種抗凝劑檢測血小板差異有統(tǒng)計學意義，且與EDTA-K2抗凝劑比較，肝素鈉和枸櫞酸鈉抗凝的血標本PLT計數(shù)顯著低于EDTA-K2抗凝血標本，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表1　不同抗凝劑血常規(guī)參數(shù)測定結(jié)果［（s），n=120］

表1　不同抗凝劑血常規(guī)參數(shù)測定結(jié)果［（s），n=120］

檢測項目肝素鈉枸櫞酸鈉E D T A -K2P值R B C（× 1 012/ L）W B C（× 1 09/ L）P L T（× 1 09/ L）4 . 3 2 ± 0 . 7 9 8 . 0 7 ± 1 . 6 3 1 5 2 . 9 ± 3 9 . 5 4 . 1 9 ± 0 . 8 5 7 . 9 8 ± 1 . 6 7 1 5 5 . 6 ± 4 1 . 4 4 . 2 5 ± 0 . 7 3 8 . 1 1 ± 1 . 5 9 2 1 6 . 4 ± 4 5 . 8＞0 . 0 5＞0 . 0 5＜0 . 0 5

2.2室溫下不同時間血細胞計數(shù)結(jié)果

25℃室溫保存下血標本W(wǎng)BC、RBC和PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測定結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表2　室溫保存（25℃）不同時間血細胞計數(shù)結(jié)果［n=120，（±s）］

表2　室溫保存（25℃）不同時間血細胞計數(shù)結(jié)果［n=120，（±s）］

項目3 0 m i n 2 h 4 h 6 h P值R B C（1 012/ L）W B C（1 09/ L）P L T（1 011/ L）4 . 2 5 ± 0 . 7 3 8 . 1 1 ± 1 . 5 9 2 1 6 . 4 ± 4 5 . 8 4 . 2 1 ± 0 . 6 5 8 . 3 0 ± 1 . 6 6 2 2 1 . 5 ± 4 1 . 6 4 . 5 2 ± 0 . 7 3 8 . 0 5 ± 1 . 3 9 2 1 8 . 5 ± 4 9 . 0 4 . 1 7 ± 0 . 5 1 8 . 2 7 ± 1 . 5 3 2 1 9 . 7 ± 4 5 . 0＞0 . 0 5＞0 . 0 5＞0 . 0 5

2.3低溫保存下不同時間血細胞計數(shù)結(jié)果

在4℃低溫保存下血標本W(wǎng)BC、RBC在30 min、2 h、4 h、6 h的測定結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。而PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測定結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表3。

表3　低溫保存（4℃）不同時間檢測血細胞計數(shù)的結(jié)果［n=120，（±s）］

表3　低溫保存（4℃）不同時間檢測血細胞計數(shù)的結(jié)果［n=120，（±s）］

項目3 0 m i n 2 h 4 h 6 h P值R B C（1 012/ L）W B C（1 09/ L）P L T（1 011/ L）4 . 2 5 ± 0 . 7 3 8 . 1 1 ± 1 . 5 9 2 1 6 . 4 ± 4 5 . 8 4 . 3 1 ± 0 . 6 2 8 . 1 5 ± 1 . 6 6 1 8 8 . 6 ± 4 4 . 5 4 . 0 1 ± 0 . 2 1 8 . 3 2 ± 1 . 2 9 1 5 6 . 0 ± 4 0 . 3 3 . 9 9 ± 0 . 3 1 7 . 9 5 ± 1 . 3 0 1 0 9 . 3 ± 3 8 . 0＞0 . 0 5＞0 . 0 5＜0 . 0 5

3　討論

隨著醫(yī)療科技的發(fā)展和檢測手段的不斷進步，全自動血液分析儀在臨床實驗室得到了廣泛應(yīng)用。全自動血液分析儀通常采用電阻抗技術(shù)、半導體流式細胞分析系統(tǒng)、細胞化學染色技術(shù)和熒光檢測技術(shù)，實現(xiàn)對正常細胞進行計數(shù)和分類的功能。但是全自動血液分析儀仍不可代替手工計數(shù)，在外周血液出現(xiàn)血小板聚集、有核紅細胞、異常淋巴細胞、原始幼稚細胞等情況下，檢測結(jié)果需要涂片染色后用顯微鏡法進行人工識別并確認［6-7］。同時，外周血細胞計數(shù)時還受到體外多種因素的影響［8-9］。

選擇合適的抗凝劑是影響血細胞準確計數(shù)的關(guān)鍵因素之一。目前，血液檢驗中常用的抗凝劑有EDTA鹽、肝素、枸櫞酸鹽等。肝素抗凝機制主要是由于其具有抗凝血酶Ⅲ活性，可抑制凝血活酶與凝血酶形成，并激活纖溶酶而發(fā)揮作用。EDTA鹽和枸櫞酸鹽的抗凝作用是通過絡(luò)合凝血因子Ⅳ（Ca2+），從而阻止血液凝固。肝素鈉、枸櫞酸鈉和EDTA-K2抗凝劑檢測WBC和RBC差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），而3種抗凝劑檢測血小板差異有統(tǒng)計學意義，且與EDTA-K2抗凝劑比較，肝素鈉和枸櫞酸鈉抗凝的血標本PLT計數(shù)顯著低于EDTA-K2（P＜0.05）。肝素導致血液分析儀計數(shù)PLT降低的原因可能是肝素能引起PLT聚集和發(fā)生腫脹，并且過量的肝素還可導致PLT被破壞［10］。而枸櫞酸鈉是堿性物質(zhì)，也可引起PLT聚集。PLT一旦發(fā)生聚集，通過儀器檢測微孔時，由于體積較大，不易被準確識別，往往被誤認為是紅細胞或淋巴細胞，這與文獻報道相符［11-12］。故國際血液學標準化委員會推薦使用EDTA-K2作為血細胞計數(shù)的抗凝劑。

該結(jié)果顯示，25℃室溫保存下血標本W(wǎng)BC、RBC和PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測定結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義。在4℃低溫保存下血標本W(wǎng)BC、RBC在30 min、2 h、4 h、6 h的測定結(jié)果之間比較無顯著性差異。而PLT在30 min、2 h、4 h、6 h的測定結(jié)果之間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。這說明血標本保存溫度對PLT計數(shù)也有一定影響。可能的原因是長時間低溫條件下，PLT容易發(fā)生粘附和聚集，使得儀器檢測PLT計數(shù)偏低［12-14］。而且隨著保存時間的延長，血小板計數(shù)下降越來越明顯。

綜上可知，抗凝劑、溫度和檢測時間均是影響外周血細胞計數(shù)的重要影響因素。此外，還有其他一些因素，包括儀器狀態(tài)、患者準備、溶血和脂血標本也可對血液分析產(chǎn)生影響。一般情況下，選擇EDTA-K2作為抗凝劑、室溫保存6 h內(nèi)的血細胞計數(shù)結(jié)果不會發(fā)生明顯影響。

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Study on Influence Factors of Peripheral Blood Cells Counts of the Fully Automatic Hematology Analyzer

WANG Yu
Department of Clinical Laboratory，Hospital of Civil Aviation Flight University of China，Guanghan，Sichuan Province，618307 China

R44

A

1672-5654（2016）09（b）-0089-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.26.089

2016-06-16）

王宇（1975-），女，四川廣漢人，本科，主管檢驗技師，主要從事臨床檢驗及實驗室質(zhì)量控制管理工作。