殷俊偉，龔　霄*，王曉芳，劉洋洋，李積華，李亞軍

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科技學(xué)院，湖北 武漢 430070；2.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，廣東 湛江 524001；3.廣東省級(jí)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（熱帶農(nóng)產(chǎn)品加工與檢測(cè)）產(chǎn)業(yè)技術(shù)研發(fā)中心，廣東 湛江 524001；4.廣夏（銀川）實(shí)業(yè)股份有限公司，寧夏 銀川 750011）

紅心火龍果果酒揮發(fā)性成分分析

殷俊偉1，2，3，龔霄2，3*，王曉芳2，3，劉洋洋2，3，李積華2，3，李亞軍4

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科技學(xué)院，湖北 武漢 430070；2.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，廣東 湛江 524001；3.廣東省級(jí)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（熱帶農(nóng)產(chǎn)品加工與檢測(cè)）產(chǎn)業(yè)技術(shù)研發(fā)中心，廣東 湛江 524001；4.廣夏（銀川）實(shí)業(yè)股份有限公司，寧夏 銀川 750011）

該研究采用頂空固相微萃?。℉S-SPME）技術(shù)聯(lián)合氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）法對(duì)火龍果果酒樣品中揮發(fā)性成分進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，火龍果果酒中的揮發(fā)性成分主要有34種，包括酯類（39.68%）、有機(jī)酸類（39.04%）、醇類（16.91%）、醛類（1.09%）、酚類（0.44%）、酮類（0.43%）及其他化合物（2.41%）。相對(duì)含量較高的有乙酸（34.63%）、乳酸乙酯（21.83%）、苯乙醇（10.21%）、異戊醇（5.96%）、琥珀酸二乙酯（5.02%）、辛酸乙酯（3.55%）、辛酸（2.44%）、癸酸乙酯（2.21%）、棕櫚酸乙酯（2.00%）和十五烷酸乙酯（1.82%）。此外，還檢測(cè)出少量萜類物質(zhì)，如D-檸檬烯（1.50%）。結(jié)果表明，火龍果果酒中含有大量香氣成分，賦予了產(chǎn)品類似醬香型白酒、白蘭地、玫瑰及火龍果的特殊香氣。

火龍果果酒；頂空固相微萃??；氣相色譜-質(zhì)譜法；揮發(fā)性成分

火龍果（Hylocereusspp.）又名仙人果、吉祥果等，為仙人掌科三角柱屬的果用栽培品種，原產(chǎn)于中美、南美［1］，依據(jù)特征果皮與果肉的顏色可分為紅皮白肉火龍果（Hylocereusundatus）、黃皮白肉火龍果（Hylocereusmegalanthus）、紅皮紅肉火龍果（Hylocereus costaricensis）3種?；瘕埞胸S富的糖、有機(jī)酸、氨基酸、維生素、膳食纖維，有清熱解毒、降血壓等生理功能，具有很高的食用價(jià)值［2］。目前，在中國(guó)、越南、菲律賓和以色列等熱帶地區(qū)的國(guó)家已實(shí)現(xiàn)商業(yè)化種植。

紅肉火龍果因富含對(duì)人體健康有益的β-花青苷而日益受到消費(fèi)者歡迎［3］。β-花青苷具有強(qiáng)效的抗氧化活性和幫助身體抵御氧化損傷導(dǎo)致的疾病的潛能［4］。以紅肉火龍果為原料發(fā)酵而成的果酒不僅保留了紅肉火龍果的營(yíng)養(yǎng)，且符合現(xiàn)代消費(fèi)者對(duì)健康的追求［5］。

香氣是水果及果酒感官品質(zhì)的重要組成部分。果酒的香氣來源可分：果香、酵香、陳釀香。果酒芳香物質(zhì)種類、含量、閾值及其之間的相互作用決定著果酒的感官品質(zhì)，決定了果酒的風(fēng)味和典型性。不同品種水果香氣不同［6］，同一原材料不同發(fā)酵工藝［7］或不同酵母發(fā)酵香氣也會(huì)產(chǎn)生差異［8-10］，同種工藝生產(chǎn)的果酒年份不同香氣不同［11］。因此研究果酒中香氣成分是很有必要的，但至今關(guān)于火龍果果酒香氣成分的研究報(bào)道較少。

本研究采用應(yīng)用廣泛的頂空固相微萃取法（headspacesolid phase microextraction，HS-SPME）氣相色譜-質(zhì)譜法（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）［12-14］對(duì)紅肉火龍果果酒的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，以期為火龍果果酒香氣成分研究提供方法支持，為高品質(zhì)火龍果果酒的生產(chǎn)提供理論支持，并促進(jìn)火龍果果酒的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)。

1　材料與方法

1.1材料

紅肉火龍果果酒（酒精度（12±1）%vol，干型）：中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所。

1.2儀器與設(shè)備

GCMS-QP2010 Plus氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析儀：日本島津公司；PAL System三合一進(jìn)樣器：瑞士CTC公司；萃取頭（50/30 μm，DVB/CAR/PDMS）：美國(guó)Supelco公司；毛細(xì)管柱VF-Wax（30 m×0.25 mm，0.25 μm）：美國(guó)Varian公司。

1.3方法

1.3.1樣品前處理方法

取果酒8mL于15mL固相微萃取的樣品瓶中，加蓋密封，于60℃下平衡10 min，萃取吸附40 min后，自動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)行GC-MS分析。進(jìn)樣口溫度250℃，解吸3 min。

1.3.2GC-MS條件

氣相色譜（GC）條件：毛細(xì)管柱VF-Wax（30m×0.25mm，0.25 μm）；程序升溫：初始溫度40℃，保留5 min，以4℃/min的速率升至120℃，再以5℃/min的速率升至210℃，保留5 min；進(jìn)樣口溫度250℃；載氣高純度氦氣（He），流速1 mL/min；無分流進(jìn)樣。

質(zhì)譜（MS）條件：電子電離（electron ionization，EI）源，電子能力70 eV，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃，全掃描模式，掃描范圍45～600 m/z，溶劑延遲5.5 min。

1.3.3定性與半定量分析

定性分析：質(zhì)譜結(jié)果經(jīng)Wiley.lib數(shù)據(jù)庫和美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所（nationalinstituteofstandardsandtechnology，NIST）14.lib譜庫檢索，僅對(duì)匹配值（similarity index，SI）＞90（最大匹配值為100）的鑒定結(jié)果予以報(bào)道。

半定量分析：采用峰面積歸一化法計(jì)算火龍果果酒中各揮發(fā)性成分的相對(duì)含量。

2　結(jié)果與分析

紅肉火龍果果酒的揮發(fā)性成分的GC-MS總離子流色譜圖見圖1。紅肉火龍果果酒SPME萃取物質(zhì)圖譜通過與WILEY.lib和NIST14.lib譜庫檢索及對(duì)比分析，鑒定出的主要揮發(fā)性成分及部分揮發(fā)性成分的香氣描述見表1。

圖1　火龍果果酒揮發(fā)性成分GC-MS分析總離子流色譜圖Fig.1 Total ions chromatogram of volatile components in red pitaya fruit wine analysis by GC-MS

表1　火龍果果酒中揮發(fā)性化合物氣質(zhì)聯(lián)用分析結(jié)果Table 1 GC-MS analysis results of volatile components in red pitaya fruit wine

續(xù)表

由圖1及表1可知，經(jīng)GC-MS分析，紅心火龍果果酒中能檢測(cè)到有保留時(shí)間和峰面積的揮發(fā)性成分有62種，其中SI≥90有34種，占總檢出揮發(fā)性成分的54.8%，包括酯類14種（39.68%），酸類6種（39.04%），醇類8種（16.91%），醛類1種（1.09%），酚類2種（0.44%），酮類2種（0.43%）及其他化合物5種（2.41%）。相對(duì)含量較大的有11種，分別為乙酸（34.63%），乳酸乙酯（21.83%），苯乙醇（10.21%），異戊醇（5.96%），琥珀酸二乙酯（5.02%），辛酸乙酯（3.55%），辛酸（2.44%），癸酸乙酯（2.21%），棕櫚酸乙酯（2.00%），十五烷酸乙酯（1.82%），D-檸檬烯（1.50%）。共占91.16%。

與主要揮發(fā)性成分為醛類、烴類及萜類化合物的火龍果果肉［15-16］相比，火龍果果酒中相對(duì)含量較高的為酯類、有機(jī)酸類和醇類，共占總揮發(fā)性成分的95.63%。發(fā)酵過程對(duì)酒體產(chǎn)生了影響。酯類物質(zhì)對(duì)果酒的香味起著積極作用?；瘕埞浦泻腥樗嵋阴?、辛酸乙酯、癸酸乙酯等酯類物質(zhì)，其中乳酸乙酯有助香作用且可增加酒體醇厚感［17］；癸酸乙酯香氣閾值為0.2 mg/L，具有香甜的水果香氣；辛酸乙酯具有花香、水果和白蘭地的風(fēng)味，其香氣閾值極低為0.002 mg/L［8］。高級(jí)醇是酒精飲料中另一類重要的揮發(fā)性香氣物質(zhì)。在本實(shí)驗(yàn)火龍果酒酒體中，高級(jí)醇有苯乙醇、異戊醇、正辛醇、正壬醇。其中，苯乙醇有玫瑰花香且所占比重較大，異戊醇也是果酒中普遍存在的高級(jí)醇類，適量的異戊醇可使酒體醇厚并具回甜感。高級(jí)醇類在發(fā)酵過程中可通過氨基酸分解代謝途徑（Ehrlich途徑）生成，異戊醇和苯乙醇可能是由亮氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸衍生而來［18］?；瘕埞浦羞€檢出少量D-檸檬烯，D-檸檬烯有新鮮橙子香氣及檸檬樣香氣。這與甘秀海等［16］對(duì)火龍果果汁的揮發(fā)性成分的檢測(cè)結(jié)果一致。

3　結(jié)論

頂空固相微萃取與氣質(zhì)聯(lián)用是一種快速、簡(jiǎn)單、需樣品量少的分析果酒中揮發(fā)性成分的方法。本研究采用HS-SPME結(jié)合GC-MS分析對(duì)進(jìn)行了定性和半定量檢測(cè)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行了討論分析?；瘕埞浦卸ㄐ詸z測(cè)出揮發(fā)性物質(zhì)34種。其中，酯類物質(zhì)14種，醇類物質(zhì)8種，酸類物質(zhì)6種，醛類物質(zhì)1種，酚類物質(zhì)2種，其他類物質(zhì)5種。相對(duì)含量較多的酯類、酸類及醇類化合物，占檢出揮發(fā)性化合物總量的95%以上，分析認(rèn)為這些揮發(fā)性成分對(duì)火龍果果酒的品質(zhì)起一定作用。果酒的香氣大部分是由酯類物質(zhì)貢獻(xiàn)的，酯類物質(zhì)的種類和含量決定酒的香味。紅心火龍果果酒中含有大多數(shù)果酒中有的辛酸乙酯、癸酸乙酯、異戊醇、苯乙醇、辛酸等，這些揮發(fā)性成分可賦予果酒類似醬香型白酒、白蘭地、椰子、玫瑰和水果的香氣。

GC-MS是一種對(duì)樣品中揮發(fā)性成分結(jié)構(gòu)和含量的半定量分析方法，并不能對(duì)香氣本質(zhì)的嗅感呈香特性進(jìn)行鑒定分析。今后將進(jìn)一步結(jié)合氣相色譜-嗅聞（gaschromatography-olfactometry，GC-O）分析，以鑒定火龍果果酒特征香氣和特征香氣成分。同時(shí)本研究?jī)H針對(duì)特定菌種和發(fā)酵工藝下的紅心火龍果果酒揮發(fā)性成分進(jìn)行了分析，尚且不能代表所有品種火龍果果酒。但對(duì)揮發(fā)性成分的分析是特征香氣成分研究的基礎(chǔ)，本研究對(duì)火龍果果酒揮發(fā)性成分分析提供了可靠的分析方法。

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Analysis of volatile components in red pitaya fruit wine

YIN Junwei1，2，3，GONG Xiao2，3*，WANG Xiaofang2，3，LIU Yangyang2，3，LI Jihua2，3，LI Yajun4
（1.College of Food Science and Technology，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China；2.Agriculture Products Processing Research Institute，Chinese Academy of Tropical Agriculture Sciences，Zhanjiang 524001，China；3.Guangdong Provincial Modern Agriculture（Tropical Agricultural Products Processing and Detection）Industry Technology Research and Development Center，Zhanjiang 524001，China；4.Guangxia（Yinchuan）Industry Limited Liability Company，Yinchuan 750011，China）

The volatile components in red pitaya fruit wine were analyzed by headspace solid-phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry（HS-SPME-GC-MS）.Results showed that 34 volatile components were detected in red pitaya fruit wine sample，including esters（39.68%），organic acids（39.04%），alcohols（16.91%），aldehydes（1.09%），phenols（0.44%），ketones（0.43%）and other compounds（2.41%）.In the all of the volatile components，the relative content of acetic acid（34.63%），ethyl lactate（21.83%），phenylethyl alcohol（10.21%），isoamyl alcohol（5.96%），succinic acid ethyl ester（5.02%），ethyl octanoate（3.55%），octylic acid（2.44%），ethyl decanoate（2.21%），ethyl hexadecanoate（2.00%），pentadecane acid ethyl ester（1.82%）was higher.Moreover，a small amount of terpenoid substances such as D-limonene（1.50%）in the wine were detected.The red pitaya fruit wine contained a lot of aroma components，which offer the products special aroma similar to Moutai-flavor Baijiu，brandy，rose，and red pitaya.

red pitaya fruit wine；HS-SPME；GC-MS；volatile components

TS255.46

0254-5071（2016）09-0159-04doi：10.11882/j.issn.0254-5071.2016.09.036

2016-06-17

公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)（201303077）；廣東省級(jí)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（熱帶農(nóng)產(chǎn)品加工與檢測(cè)）產(chǎn)業(yè)技術(shù)研發(fā)中心項(xiàng)目

殷俊偉（1990-），女，碩士研究生，研究方向?yàn)楣呒庸ぁ?/p>

龔霄（1984-），男，副研究員，博士，研究方向?yàn)槭称钒l(fā)酵與酶工程。