孫蕾

河南淇縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科　淇縣　456750

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術(shù)前乙型肝炎病毒DNA定量檢測的臨床價(jià)值

孫蕾

河南淇縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科淇縣456750

目的觀察手術(shù)前乙型肝炎病毒DNA定量檢測的效果及意義。方法對256例預(yù)手術(shù)患者，術(shù)前均經(jīng)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))檢測乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物，應(yīng)用FQ-PCR(熒光定量聚合酶連反應(yīng))檢測HBV-DNA含量。結(jié)果HBcAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA的陽性率98.6%，HBsAg、HBeAb、HBcAb為26.7%，HBsAg、HBeAg為100%，HBsAg、HBcAb為16.7%，HBsAb、HBcAb、HBeAb為15.0%，HBeAb、HBcAb為16.7%，HBsAb為6.7%，全陰為0。結(jié)論在手術(shù)治療前，采用合理方法確定患者是否存在乙型肝炎，可有效防范醫(yī)院感染的發(fā)生，HBV-DNA、HBeAg定量聯(lián)合診斷，可確診早期乙型肝炎，臨床價(jià)值較高。

乙型肝炎病毒；DNA定量檢測；關(guān)系

手術(shù)前確定患者是否患有乙型肝炎，可有效防范乙型肝炎醫(yī)源性傳播。乙型肝炎是臨床最為常見傳染病，通過ELISA方法對乙型肝炎病毒血清學(xué)標(biāo)志物(HBVM)進(jìn)行檢測，其速度快、方便且廉價(jià)，對于乙型肝炎患者篩查具有較高的適用價(jià)值。乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)對于表明HBV復(fù)制情況是比較直接且最為可靠的一個指標(biāo)，對于評價(jià)治療乙型肝炎藥物臨床治療效果與預(yù)后判定具有重要作用[1]。應(yīng)用FQ-PCR方法可以直接檢測HBV-DNA水平，有效測定乙型肝炎病毒出現(xiàn)的突變株。兩種方法共同應(yīng)用于臨床中，可達(dá)到互補(bǔ)效果。我們選取預(yù)手術(shù)的256例患者，術(shù)前分析FQ-PCR對HBV陽性標(biāo)本的定量檢測情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選取我院2011-04—2016-04間擬接受手術(shù)的256例患者，其中男146例，女110例；年齡13～75歲，平均34.20歲。患者均符合病毒性肝炎臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。

1.2方法患者在早晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集5 mL靜脈血，血清離心處理后放置于-20℃環(huán)境下保存。應(yīng)用ELISA方法對乙型肝炎的病毒血清標(biāo)志物進(jìn)行測定，根據(jù)所用試劑盒詳細(xì)說明完成操作。應(yīng)用FQ-PCR對HBV-DNA含量進(jìn)行測定，每次測定均需設(shè)制強(qiáng)陽性、弱陽性及陰性用作內(nèi)標(biāo)，并將四個陽性標(biāo)準(zhǔn)品用作外標(biāo)。

1.3觀察指標(biāo)觀察血清學(xué)診斷指標(biāo)、HBV-DNA陽性率及定量檢測結(jié)果。血清學(xué)診斷分組：1組為HBcAb、HBeAg、HBsAg，2組為HBsAg、HBeAb、HBcAb，3組為HBsAg、HBeAg，4組為HBsAg、HBcAb，5組為HBsAb、HBcAb、HBeAb，6組為HBeAb、HBcAb，7組為HBsAb及全陰。

2　結(jié)果

對256例患者進(jìn)行血清學(xué)指標(biāo)診斷、檢查HBV-DNA陽性率、定量檢測HBV-DNA對數(shù)平均值，見表1。

表1　患者血清學(xué)診斷指標(biāo)與HBV-DNA陽性率及定量檢測情況對比分析

3　討論

當(dāng)患者感染HBV后，因免疫反應(yīng)壓力下采取藥物治療，極有可能出現(xiàn)基因變異現(xiàn)象，最為常見的是前C區(qū)G1896A發(fā)生變異，導(dǎo)致HBeAg出現(xiàn)缺失，從而不被宿主免疫所攻擊，不會受到藥物治療的作用。此類感染中病毒在檢測時存在一定隱藏性，且不會因免疫攻擊及藥物治療而消除，所以極易長時間潛伏于患者機(jī)體內(nèi)，且大量進(jìn)行復(fù)制，導(dǎo)致患者肝組織受到緩慢的傷害，最終導(dǎo)致肝硬化、肝癌。所以在臨床中不可單純應(yīng)用ELISA方法對血清HBeAg陰性進(jìn)行測定，由此確定HBV是否存在復(fù)制現(xiàn)象也無較高準(zhǔn)確性，應(yīng)采用FQ-PCR方法對HBV-DNA水平進(jìn)行測定，其具有更高的敏感性與準(zhǔn)確性，并由此最終判定HBV是否依然存在于機(jī)體內(nèi)[3]。

我國采用HBVM檢測試劑盒對HBsAg進(jìn)行測定時往往針對某種亞型，所以有的亞型極有可能出現(xiàn)漏檢現(xiàn)象。單純應(yīng)用HBVM測定結(jié)果對HBV感染、傳染性、療效進(jìn)行確定，且判定是否有HBV復(fù)制情況，往往存在一定限制性。檢測到HBV-DNA時可以確定HBV感染后出現(xiàn)復(fù)制，且可進(jìn)行預(yù)后追蹤。HBV-DNA為乙肝傳染性的一個特異性標(biāo)志，所以HBV-DNA檢測具有重要意義[4]。本文中，1組患者HBcAb、HBeAg、HBsAg的HBV-DNA陽性率為98.6%，3組HBsAg、HBeAg為100%。由此可知，HBeAg陽性血清指標(biāo)模式組是1、3組，HBV-DNA陽性率、HBV-DNA定量水平均高于其他組，表明HBeAg與HBV-DNA水平具有一定正相關(guān)性。HBsAg、HBeAb、HBcAb為26.7%，HBV-DNA對數(shù)值為(5.05±1.84)，HBcAb、HBsAg為16.7%，HBV-DNA對數(shù)均值為(6.29±0.25)，表明在e系統(tǒng)抗原陰轉(zhuǎn)時，極有可能檢測到HBV-DNA，且低于1、3組。

ELISA檢測具有較為廣泛的應(yīng)用價(jià)值，檢測HBV是術(shù)前理應(yīng)進(jìn)行篩查的一個項(xiàng)目。因HBsAg陰性樣本中存在HBV-DNA復(fù)制，所以此方法存在一定局限性。病毒編碼區(qū)發(fā)生的基因突變對試劑具有的檢測能力存在一定影響力，應(yīng)用不同檢測試劑，因其靈敏度不同而產(chǎn)生差異性，所以應(yīng)將HBV-DNA檢測作為術(shù)前篩查的一個項(xiàng)目[5]。而FQ-PCR方法存在較高靈敏性、高特異性、高精確性，且具有較寬的線性范圍，可以進(jìn)行較為準(zhǔn)確的定性測量，能夠測出HBV是否感染及發(fā)生復(fù)制，所以臨床應(yīng)用價(jià)值更為顯著。

[1]楊勇，王占科，陳鑫，等．乙肝病毒DNA定量水平和乙型肝炎病毒標(biāo)志物定量檢測指標(biāo)相關(guān)性研究[J]．解放軍醫(yī)藥雜志，2014，26(10)：78-80．

[2]溫慶輝，哈明昊，黎鳳英，等．妊娠合并慢性乙型肝炎患者的相關(guān)血液指標(biāo)變化及臨床意義[J]．國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32(10)：1 607-1 608．

[3]羅獻(xiàn)偉，王建軍．安徽省2006年1-59歲人群乙型病毒性肝炎感染狀況的血清流行病學(xué)調(diào)查[J]．中華疾病控制雜志，2013，17(2)：156-159．

[4]徐偉帆.420例乙型肝炎病毒DNA定量檢測臨床分析[J].中國醫(yī)藥指南，2011，9(29)：135-136.

[5]劉兵,胡蓉,楊聯(lián)云,等.乙型肝炎病毒DNA定量分析的臨床意義[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊，2012，14(4)：673-674.

(收稿2016-05-29)

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1077-8991(2016)06-0037-02