許明珠，張　琴，童　潼，董蘭芳，楊家林，蔣　艷，黃國強

(廣西壯族自治區(qū)海洋研究所，廣西海洋生物技術(shù)重點實驗室，廣西北?！?36000)

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飼料銅水平對方格星蟲稚蟲生長及體組成的影響*

許明珠**，張琴**，童潼，董蘭芳，楊家林，蔣艷，黃國強

(廣西壯族自治區(qū)海洋研究所，廣西海洋生物技術(shù)重點實驗室，廣西北海536000)

【目的】了解飼料中微量元素銅水平對方格星蟲(Sipunculus nudus Linnaeus)稚蟲生長及體組成的影響，探索飼料中銅元素的最佳含量。【方法】通過給方格星蟲稚蟲投喂不同銅水平(2.7 mg/kg,7.5 mg/kg,11.2 mg/kg,19.8 mg/kg,30.4 mg/kg,52.1 mg/kg)的飼料56 d，研究微量元素銅對方格星蟲的成活率、增重率(Weight gain rate，WGR)、特定生長率(Specific gain rate，SGR)、體組成成分的影響?！窘Y(jié)果】飼料中的微量元素銅水平對方格星蟲稚蟲的增重率、特定生長率有顯著影響(P<0.05)。隨著飼料中銅含量的提高，方格星蟲稚蟲的SGR和WGR都呈先上升后下降，之后再上升的趨勢，當飼料銅含量為11.2 mg/kg時，方格星蟲稚蟲增重率和特定生長率均達到最大值。飼料銅水平對方格星蟲稚蟲的成活率、體組成成分沒有顯著影響(P>0.05)?！窘Y(jié)論】基礎飼料中銅的適宜添加量為7.5～11.2 mg/kg。

方格星蟲銅水平生長性能成活率體組成

0　引言

【研究意義】方格星蟲(Sipunculus nudus Linnaeus)是北部灣優(yōu)良的綠色經(jīng)濟海產(chǎn)品之一，生活在沿海灘涂一帶沙泥底質(zhì)的海域，其適應范圍廣、抗逆性強、生長快，喜攝食底棲藻類及有機碎屑[1]。由于目前方格星蟲的養(yǎng)殖模式主要為粗放型，產(chǎn)量小，生長周期長，逐漸跟不上市場的需求量，因此加快方格星蟲向集約型養(yǎng)殖模式轉(zhuǎn)變很有必要，其中關(guān)鍵的一點就是解決方格星蟲人工配合飼料的開發(fā)研究[2]。將動物配合飼料制成優(yōu)質(zhì)的全價日糧，不僅需要考慮脂肪、蛋白和糖三大營養(yǎng)物質(zhì)的配比，微量元素的添加亦不可忽視[3]?！厩叭搜芯窟M展】銅元素是滿足水產(chǎn)動物生長發(fā)育、繁殖的必需微量元素之一，它廣泛存在于水產(chǎn)動物的組織中，是許多重要酶類的組成部分，同時還影響動物的免疫功能[4-5]。虞澤鵬等[6]發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加高水平的銅對肉仔雞(broiler)具有明顯的促生長作用；Roof等[7]指出飼料中添加高水平的銅可以提高仔豬的日增重率。添加不同水平銅對魚類生長性能影響的報道也很多，如蔣蓉等[8]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中的銅補充量從3.5 mg/kg增加到9.2 mg/kg的過程中，黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)的增重率也在不斷提高；李云峰等[9]研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加適量谷氨酸銅可有效降低餌料系數(shù)，同時提高羅非魚(Oreochromis niloticus)和草魚(Ctenopharyngodon idellus)的生長性能，但是各試驗組間的兩種魚的體組成均無顯著差別(P>0.05)；郭志勛等[10]研究表明，添加30 mg/kg的銅對凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)的生長最有利；葉超霞等[11]報道，飼料中高水平的銅對斜帶石斑魚(Epinephelus coioides)的存活率和魚體組成沒有顯著性影響(P>0.05)，Lee等[12]以氯化銅為銅源，發(fā)現(xiàn)飼料銅超過80 mg/kg會顯著降低斑節(jié)對蝦( Penaeus monodon )的成活率(P<0.5)；劉偉等[13]也發(fā)現(xiàn)飼料中銅含量過高會影響凡納濱對蝦的成活率；陳四清等[14]認為在餌料中添加少量鋅(6.8～20.5 mg/kg)有助于黑鯛(Sparus macrocephlus )幼魚生長，而銅對其增重作用不大，添加量以<1.2 mg/kg 為宜；趙宇江[15]研究表明，飼料銅含量對草魚、鯉魚和黃顙魚的魚體水分、粗脂肪和粗灰分無顯著影響(P >0.05)。【本研究切入點】在方格星蟲人工配合飼料的研究中，目前已有關(guān)于三大營養(yǎng)物質(zhì)及微量元素硒、鐵、錳等的相關(guān)報道[16-23]，但對于銅元素的相關(guān)數(shù)據(jù)較少，不利于全面了解方格星蟲稚蟲人工配合飼料中微量元素的最適含量?！緮M解決的關(guān)鍵問題】研究微量元素銅對方格星蟲的成活率、增重率、特定生長率、體成分的影響，為方格星蟲的人工配合飼料配方中銅營養(yǎng)的添加提供理論基礎。

1　材料與方法

1.1材料

研究場地選取在北海市廣西海洋研究所海水增養(yǎng)殖試驗基地，選取同一批受精卵孵化的、規(guī)格相同、外觀正常、體質(zhì)健壯的人工方格星蟲苗種，其平均體重為(18.45±0.11)mg/條，平均體長為(1.50±0.16)cm/條，共7 200條，分為6組，每組3個重復。試驗時間為2013年8月初至9月底，為期8周。

維生素混合物(1 kg飼料含量)：維生素D2400 IU，維生素E 100 mg，維生素K l mg，維生素C 70 mg，維生素B10.5 mg，維生素B27 mg，維生素B66 mg，維生素B121 mg，D-泛酸32.6 mg，煙酸28 mg，生物素1 mg，葉酸7.5 mg，肌醇 440 mg。

復合礦物鹽(1 kg飼料含量)：碳酸鈣3 000 mg，七水硫酸鋅300 mg，磷酸氫鈣4 125 mg，一水硫酸錳270 mg，氯化鈉 1 200 mg，一水亞硒酸鈉0.75 mg，氯化鉀 750 mg，七水硫酸鎂 1 525.5 mg，七水硫酸亞鐵 750 mg，六水硫酸鋁 6 mg，六水氯化鈷 45 mg，碘化鉀 6 mg，沸石粉3 021.75 mg。

1.2方法

1.2.1試驗飼料加工

以酪蛋白和明膠為蛋白源，魚油為脂肪源，蛋氨酸銅為銅源，各組飼料銅含量設定為0 mg/kg、4 mg/kg、8 mg/kg、16 mg/kg、32 mg/kg、64 mg/kg，共6個濃度梯度，飼料銅實際測定值為2.7 mg/kg、7.5 mg/kg、11.2 mg/kg、19.8 mg/kg、30.4 mg/kg和52.1 mg/kg的等氮、等能飼料，所有原料進行水分、粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(EE)、灰分(Ash)測定后，粉碎過篩，微顆粒飼料加工參照Blair等[24]介紹的方法，按照配方逐級混合均勻，再與魚油和水充分混勻，制成過150目篩的顆粒(表1)。制作好的飼料置于4℃冰箱內(nèi)保存，以防變質(zhì)。

表1試驗飼料配方及營養(yǎng)成分分析(干物質(zhì))

Table 1Ingredient composition and nutrient level of experimental diets (dry matter)

Cu實際含量Cucontent(mg/kg)原料Ingredients(%)成分分析Proximateanalysis復合礦物鹽Mineralpremix蛋氨酸銅Coppermethionine合計Total*CP(%)EE(%)Ash(%)能量**GE(MJ/kg)2.701.50000.0000100.0044.259.239.6419.457.501.49980.0002100.0044.249.059.3219.7211.201.49950.0005100.0044.329.179.1919.3619.801.49910.0009100.0044.899.179.2419.8930.401.49800.0020100.0044.789.099.8419.9252.101.49600.0040100.0044.219.159.2519.73

注：*原料中其他組分含量分別為酪蛋白40.00%，明膠10.00%，魚油8.00%，糊精20.00%，微晶纖維14.00%，褐藻酸鈉3.00%，卵磷脂2.00%，維生素混合物1.50%；**使用PARR 6400氧彈式熱量計所測的實測值

Note：*The other component content of ingredients is casein 40.00%，gelatin 10.00%，fish oil 8.00%，dextrin 20.00%，microlite cellulose 14.00%，sodium alginate 3.00%，lecithin 2.00%，vitamin premix 1.50%；**Values of gross energy in the diets were measured by oxygen bomb calorimeter (PARR 6400)

1.2.2對生長性能的影響

采用自然光照，自然水溫(維持在26～30℃)，二級過濾海水(鹽度 18‰～22‰)，24 h連續(xù)微充氧(溶解氧大于5.0 mg/L)，每天換水兩次(9:00，17:00)，換水后過量投喂，保證沙子表面有少量未完全食用的餌料。養(yǎng)殖過程中每天巡視兩次，及時記錄和清除死亡的個體。養(yǎng)殖結(jié)束后，將停食吐沙2 d的各組方格星蟲收集，記錄成活條數(shù)并稱重，保存于-80℃超低溫冰箱中[5]。

成活率、增重率、特定生長率的計算公式如下：

成活率(Survival rate，SR，%)=100×Nt/N0，

增重率(Weight gain rate，WGR，%)=100×(Wt-W0)/W0，

特定生長率(Specific gain rate，SGR，%/d)=100×(1nWt-lnW0)/t。

式中：N0為初始稚蟲條數(shù)，Nt為終末稚蟲條數(shù)，W0為初始稚蟲體重，Wt為終末稚蟲體重，t為試驗天數(shù)。

1.2.3對體組成成分的影響

方格星蟲稚蟲的體成分測定和飼料常規(guī)成分均采用AOAC (1995)官方分析方法分析。水分測定方法為采用105℃烘箱中烘干至恒重，計算公式：水分含量=[(鮮重-干重)/鮮重]*100%；粗蛋白測定采用凱氏定氮法(Kjeltec 8400，Sweden)；粗脂肪測定采用索氏抽提法(Soxtec 2050，Switzerland)；灰分測定采用在550℃馬福爐中灼燒12 h，計算公式：灰分含量=(灰分/料重)*100%。采用 SPSS 19.0 for Windows對所得數(shù)據(jù)進行方差分析，若差異達到顯著，則進行Tukey’s多重比較，顯著性水平為P<0.05。

2　結(jié)果與分析

2.1對生長性能的影響

由表2可知，養(yǎng)殖周期結(jié)束后，飼料銅含量對方格星蟲稚蟲的增重率和特定生長率有顯著影響(P<0.05)。隨著飼料中銅含量的提高，稚蟲的增重率和特定生長率呈先增后降再上升的趨勢，在銅含量為11.2 mg/kg時達到最高，與銅含量為7.5 mg/kg和52.1 mg/kg兩個試驗組沒有顯著差異，但顯著高于銅含量為2.7 mg/kg、19.8 mg/kg和30.4 mg/kg銅含量組(P <0.05)。低銅含量(2.7 mg/kg)組稚蟲的增重率和特定生長率均最低，且顯著低于其他各銅含量組(P<0.05)。各處理組稚蟲成活率為76.83%～82.25%，銅含量對成活率的影響不顯著(P>0.05)。

2.2對體組成成分的影響

如表3所示，對方格星蟲稚蟲體組成成分的分析表明，飼料銅含量對方格星蟲稚蟲體組成中水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量均沒有顯著影響(P>0.05)。

表2飼料銅水平對方格星蟲稚蟲生長性能的影響(平均值±標準誤)

Table 2Effects of dietary copper level on growth performance of juvenile peanut worm，S.nudus (Mean±S.E.)

Cu實際含量Cucontent(mg/kg)W0(mg)Wt(mg)WGR(%)SGR(%/d)SR(%)2.718.55±0.0937.65±1.65a102.94±7.83a1.26±0.07a76.83±2.517.518.03±0.1149.31±1.72bc173.51±8.41bc1.80±0.05bc82.25±1.0411.218.76±0.2156.73±1.32c202.39±7.24c1.97±0.04c81.50±1.0119.818.60±0.1448.34±1.52b159.87±6.62b1.70±0.04b80.58±1.4830.418.56±0.3848.60±2.20b161.66±6.90b1.72±0.05b80.17±1.0252.118.24±0.4149.48±0.53bc171.40±3.76bc1.78±0.02bc81.58±1.08P值Pvalue0.4060.0000.0000.0000.196

注：同列數(shù)據(jù)肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)

Note:In the same column,values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05),while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05)

表3飼料銅水平對方格星蟲稚蟲體成分的影響(平均值±標準誤)

Table 3Effects of dietary copper level on body composition of juvenile peanut worm，S.nudus (Mean±S.E.)

Cu實際含量Cucontent(mg/kg)水分Moisture(%)粗蛋白Crudeprotein(%)粗脂肪Crudelipid粗灰分Ash(%)2.780.56±0.6061.02±0.762.36±0.1419.64±1.537.580.44±0.2959.88±0.482.56±0.1219.32±1.6611.281.74±0.1963.27±4.092.41±0.1420.19±1.1919.880.52±0.6062.15±3.642.69±0.1020.60±1.5330.480.57±0.8761.46±3.632.90±0.1819.08±1.1352.180.46±0.3261.56±1.722.36±0.0720.23±1.01P值Pvalue0.5130.9710.7010.961

注：1)此表中的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分含量為方格星蟲的干重含量；2)同列數(shù)據(jù)肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)

Note:1)Crude protein，crude lipid and ash content were dry weight content of juvenile peanut worm,S.nudus；2)In the same column,values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05)

3　討論

3.1飼料銅水平對方格星蟲稚蟲生長性能的影響

本研究飼料中添加的微量元素銅為氨基酸螯合物，具有結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、分子量低、生物學效價高等特點，比無機形式的銅更易吸收利用，并且飼料中的銅元素只能在一定范圍內(nèi)對試驗動物產(chǎn)生促進作用[15]。試驗結(jié)果表明，隨著飼料銅含量的增加，方格星蟲稚蟲的增重率和特定生長率顯著升高，當銅含量為11.2 mg/kg時兩者均達到最大值后下降，這可能是因為11.2 mg/kg的銅含量對方格星蟲稚蟲生長性能的促進作用已趨于飽和，飼料中多余的銅則沉積于方格星蟲稚蟲的體壁和體腔液中；也可能是高于11.2 mg/kg的銅含量在一定程度上抑制了方格星蟲稚蟲的生長，之后的升高趨勢則可能是因為方格星蟲對銅產(chǎn)生了耐受性，銅含量的增加不再抑制方格星蟲的生長，但銅的促生長作用也不明顯。也有研究報道表明，尼羅羅非魚飼料中銅含量達到200 mg/kg時會使魚體的生長性能下降[25]。

3.2飼料銅水平對方格星蟲稚蟲體成分的影響

方格星蟲粗灰分測定方法是將一定樣品置于550℃高溫爐中，使得所有有機物質(zhì)全部氧化，剩余的殘渣質(zhì)量與初始樣品質(zhì)量的比值即為粗灰分值。由于各組飼料的基礎營養(yǎng)成分并無差別，添加的銅為微量元素，因此在宏觀上并沒有表現(xiàn)出其對蟲體的影響，這可能是本次試驗中的粗灰分含量沒有產(chǎn)生明顯變化的原因。各試驗組體水分、粗蛋白和粗脂肪沒有顯著差異也可能跟上述原因有關(guān)；另一方面，動物體內(nèi)各成分含量之間是相互影響牽制的[26]，這可能也是導致方格星蟲各成分含量無顯著差異的原因之一。但由于本研究并未做方格星蟲的代謝研究，因此方格星蟲的體成分沒有顯著變化的原因還有待進一步研究。

4　結(jié)論

本研究通過給方格星蟲稚蟲投喂不同銅水平的飼料，研究微量元素銅對方格星蟲稚蟲生長、成活率及體組成的影響。試驗結(jié)果表明：飼料中添加適量的銅元素對方格星蟲的增重率與特定生長率均有顯著影響，但是飼料中銅水平過高或過低均對方格星蟲的生長性能促進作用不大。從方格星蟲稚蟲的增重率和成活率來看，銅含量為7.5 mg/kg、11.2 mg/kg、52.1 mg/kg 3個試驗組無顯著差異，但是從飼料成本來看，選擇7.5～11.2 mg/kg的銅水平較為適合。

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(責任編輯：陸雁)

Effect of Dietary Copper Level on Growth Performance and Body Composition of Juvenile Peanut Worm,Sipunculus nudus Linnaeus

XU Mingzhu，ZHANG Qin，TONG Tong，DONG Lanfang，YANG Jialin，JIANG Yan，HUANG Guoqiang

(Key Laboratory of Marine Biotechnology of Guangxi,Guangxi Institute of Oceanology,Beihai,Guangxi,536000,China)

【Objective】This trial was conducted to investigate the effects of dietary copper levels on growth performance and body composition of juvenile peanut worm,Sipunculus nudus Linnaeus.【Methods】S.nudus juveniles with average body weight of (18.45±0.11) mg were fed diets with six copper levels (2.7 mg/kg,7.5 mg/kg,11.2 mg/kg,19.8 mg/kg,30.4 mg/kg,52.1 mg/kg diet) for 56 d.【Results】The results showed that the dietary copper levels had significant effects on weight gain rate(WGR),specific gain rate (SGR)(P<0.05).With the increasing of dietary copper levels,WGR and SGR were increased,then decreased in generally,and increased again,and reached the maximum at 11.2 mg/kg.No significant differences were observed in survival ratio (SR),body moisture,body protein content,body lipid content and body ash content of S.nudus among dietary treatments with graded levels of copper (P>0.05).【Conclusion】The dietary copper levels range which could acquire high WGR were from 7.5 mg/kg to 11.2 mg/kg.

Sipunculus nudus，copper level，growth performance，survival ratio，body composition

2016-04-10

許明珠(1988-)，女，碩士，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料的研究,E-mail:xumingzhulian@163.com。

S963

A

1002-7378(2016)03-0209-06

網(wǎng)絡優(yōu)先數(shù)字出版時間:2016-08-26【DOI】10.13657/j.cnki.gxkxyxb.20160826.009

網(wǎng)絡優(yōu)先數(shù)字出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/45.1075.N.20160826.1049.018.html

*國家自然科學基金項目(31402304)，廣西科學研究與技術(shù)開發(fā)計劃項目(桂科轉(zhuǎn)13129024，桂科合1346011-12，桂科合14125008-2-20)，廣西自然科學基金項目(2015GXNSFBB139005)和廣西科學院基本科研業(yè)務費項目(15YJ22HYS15)資助。

**通訊作者：張琴(1982-)，博士，副研究員，碩士生導師，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料的研究，E-mail:zhangqin821220@163.com。