張明宇，劉曉霞，王巖，李建飛，張雪巖，孫涵文

哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院心內(nèi)科，黑龍江哈爾濱 150001

IFNα21與冠狀動(dòng)脈硬化程度關(guān)系的研究

張明宇，劉曉霞，王巖，李建飛，張雪巖，孫涵文

哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院心內(nèi)科，黑龍江哈爾濱 150001

目的 染色體9p21區(qū)域是冠心病關(guān)聯(lián)的疾病易感位點(diǎn)，但其具體作用機(jī)制仍不明確，該文旨在研究IFNα21表達(dá)和冠狀動(dòng)脈硬化嚴(yán)重程度之間的關(guān)聯(lián)。方法 連續(xù)選取2014年1月—2015年1月在哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬四院心內(nèi)科住院并行冠狀動(dòng)脈造影的病人200例，根據(jù)影像學(xué)結(jié)果分為4組（每組50例），對(duì)照組：冠脈內(nèi)膜光滑無狹窄；實(shí)驗(yàn)1組，冠脈血管狹窄為50%～75%；實(shí)驗(yàn)2組，冠脈血管狹窄＞75%；實(shí)驗(yàn)3組，冠脈血管完全閉塞。采用IFNA21特異性ELISA套裝盒測(cè)試和特異性IFNα21抗體測(cè)定INFα21濃度。結(jié)果 對(duì)照組IFNα21蛋白的濃度為（49.32±10.71）μg/L，實(shí)驗(yàn)1組為（51.38±8.23）μg/L（與對(duì)照組比較P=0.087），實(shí)驗(yàn)2組為（47.11±11.36）μg/L（與對(duì)照組比較 P=0.096），實(shí)驗(yàn) 3組為（57.03±13.31）μg/L（與對(duì)照組比較P=0.065），INFα21表達(dá)和冠狀動(dòng)脈硬化程度之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 干擾素α21表達(dá)同冠心病發(fā)病率和冠狀動(dòng)脈硬化嚴(yán)重程度均無相關(guān)性，染色體9p21造成冠心病高發(fā)并不是由I型INF表達(dá)介導(dǎo)的。

染色體9p21；冠心??；INFα21蛋白；冠脈造影；高危因素

冠心病作為一種由環(huán)境因素和遺傳因素共同作用導(dǎo)致的復(fù)雜疾病,是世界范圍內(nèi)死亡和致殘的首要原因。全基因組關(guān)聯(lián)研究發(fā)現(xiàn)了很多與冠心病相關(guān)聯(lián)的疾病易感位點(diǎn)和區(qū)域[1-3]，但染色體9p21區(qū)域與冠心病之間具體作用機(jī)制仍不明確，可能是多因素共同起作用。Harismendy等[4]研究提示染色體9p21區(qū)域造成冠狀動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制可能和干擾素α21（IFNα21）途徑有關(guān)。該文連續(xù)選取2014年1月—2015年1月在哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬四院心內(nèi)科住院并行冠狀動(dòng)脈造影的病人，旨在研究染色體9p21區(qū)域、IFNα21和冠狀動(dòng)脈硬化程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

連續(xù)選取2014年1月—2015年1月在哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬四院心內(nèi)科住院并行冠狀動(dòng)脈造影的病人，排除標(biāo)準(zhǔn)：①惡性腫瘤患者；②外周血管疾病患者；③急性感染患者；④急性心肌梗死患者；⑤急性肺栓塞患者；⑥嚴(yán)重肝腎功能不全的患者。根據(jù)冠脈造影結(jié)果將入組患者分為四組：對(duì)照組：50例管壁光滑無動(dòng)脈硬化斑塊；實(shí)驗(yàn)1組：50例冠脈造影血管狹窄>50%；實(shí)驗(yàn)2組：50例冠脈造影血管狹窄>75%；實(shí)驗(yàn)3組：50例冠脈造影血管完全閉塞。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

入組患者采血經(jīng)過3 000 rpm離心5 min后于-80°保存，統(tǒng)一測(cè)定IFNα21蛋白。①采用冠脈造影評(píng)估冠脈血管狹窄的嚴(yán)重程度;②采用 E96966Hu IFNα21特異性ELISA套裝盒測(cè)試IFNα21，將凍結(jié)血清融解后，混勻充分，實(shí)驗(yàn)板條設(shè)置樣本孔和標(biāo)準(zhǔn)品孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品50 μL。樣本孔先加待測(cè)血清10 μL，再加樣本稀釋液40 μL。除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中各加入過氧化物酶標(biāo)記的100 μL檢測(cè)抗體，封板膜封住反應(yīng)孔，37℃恒溫箱溫育60 min。棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置2 min，甩去洗滌液，吸水紙上進(jìn)行拍干，重復(fù)洗板5次。每孔加入底物A 50 μL，再加入底物B 50 μL，37℃避光孵育15 min。每孔加入終止液50 μL，15 min內(nèi)，在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔OD值。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，通過曲線方程計(jì)算各樣本濃度值；③受試者抽血前12 h禁食水,化驗(yàn)前2周保持清淡飲食。分離血清,使用全自動(dòng)生化檢測(cè)儀,氧化酶法測(cè)定總膽固醇、低密度脂蛋白、血壓、血糖[5]。④肥胖指數(shù)（BMI）=體重（kg）÷身高（m）的平方。

1.3 觀察指標(biāo)

年齡、性別、總膽固醇、低密度脂蛋白、血壓、血糖、肥胖指數(shù)、吸煙、家族史等。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,組間計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，用多變量回歸分析IFNα21蛋白與冠心病發(fā)生及冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度之間的關(guān)聯(lián)。

2 結(jié)果

2.1 各組基礎(chǔ)臨床資料分析結(jié)果

各組間BMI、膽固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯、吸煙史、高血壓病史、糖尿病史等進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)各組中低密度脂蛋白、吸煙史率、高血壓病患病率及糖尿病患病率與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。年齡、性別、BMI指數(shù)、總膽固醇和甘油三酯之間各組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1、表2。

表1 各組臨床資料比較

表2 各組臨床資料比較

2.2 IFNα21濃度與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化程度分析

結(jié)果顯示IFNα21蛋白的濃度未隨冠狀動(dòng)脈粥樣硬化程度加重而增加。采用多變量回歸分析校正年齡，性別，吸煙，肥胖指數(shù)，血脂，血壓變量后，對(duì)照組IFNα21蛋白的濃度為(49.32±10.71)μg/L，實(shí)驗(yàn) 1組IFNα21蛋白的濃度為(51.38±8.23)μg/L（與對(duì)照組比較P=0.087），實(shí)驗(yàn)2組IFNα21蛋白的濃度為(47.11±11.36)μg/L（與對(duì)照組比較P=0.096），實(shí)驗(yàn)3組 IFNα21蛋白的濃度為 (57.03± 13.31)μg/L（與對(duì)照組比較P=0.065）(見圖1)。

圖1 各組中IFNα21蛋白的濃度

3 討論

冠心病作為一種由環(huán)境因素和遺傳因素共同作用導(dǎo)致的復(fù)雜疾病,是世界范圍內(nèi)死亡和致殘的首要原因。根據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測(cè)報(bào)告,2030年世界缺血性心臟病的死亡人數(shù)將占總死亡人數(shù)的13.1%。最新的冠心病全基因組關(guān)聯(lián)研究在世界范圍取得了可喜成果,發(fā)現(xiàn)了很多與冠心病相關(guān)聯(lián)的疾病易感位點(diǎn)和區(qū)域，包括rs10757278, rs1333049,rs11515,rs518394,rs564309,rs2811712,和rs10811661[6-7]。并且在多中心的研究中得到了相同的結(jié)果，這種風(fēng)險(xiǎn)因素與已知的風(fēng)險(xiǎn)因素如高血脂、高血壓、糖尿病、肥胖癥、炎性因子均無關(guān)系，說明這是與冠心病相關(guān)的一種新的生物學(xué)途徑。白種人中25%具有這些危險(xiǎn)基因，這些人患冠心病的幾率比非攜帶者高2倍[8]。我國的一個(gè)研究小組也報(bào)道了在中國漢族人群中的研究，發(fā)現(xiàn)中國漢族人群冠心病發(fā)病同樣和該區(qū)域相關(guān)[9-11]。

所有研究中，9p21風(fēng)險(xiǎn)等位基因與冠心病之間具體作用機(jī)制仍不明確[12]，可能是多因素共同起作用。因此要進(jìn)一步研究9p21風(fēng)險(xiǎn)等位基因與冠心病之間關(guān)聯(lián)機(jī)制。一些研究[13-14]報(bào)道了在9p21冠心病風(fēng)險(xiǎn)基因近端的CDKN2A和CDKN2B參與了調(diào)節(jié)，那么9p21冠心病風(fēng)險(xiǎn)基因遠(yuǎn)端的I型INF基因串也可能參與了造成冠心病發(fā)病率增高的調(diào)節(jié)。該實(shí)驗(yàn)中在各組的基線資料統(tǒng)計(jì)中年齡、性別、BMI、總膽固醇和甘油三酯之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)該文采用多變量回歸分析校正低密度脂蛋白、吸煙、血壓和糖尿病等危險(xiǎn)因素變量后，冠心病患者及不同冠脈狹窄程度與對(duì)照組比較，結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明IFNα21表達(dá)和冠心病發(fā)病率及動(dòng)脈硬化狹窄程度之間無相關(guān)性。Erridge等[15]研究結(jié)果也顯示9P21與冠心病易感性并非由I型干擾素反應(yīng)所調(diào)控。Christopher等[16]研究結(jié)果顯示增加I型干擾素的表達(dá)與冠心病的發(fā)生率之間無相關(guān)性。這些實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)雖然各不相同，Erridge等研究了冠心病患者的I型干擾素mRNA、蛋白和生物學(xué)活性的表達(dá)幾個(gè)方面，Christopher等研究了22233例患者和64762例對(duì)照者的I型干擾素表達(dá)與rs10516487,rs3131379 and rs7574865(OR=1.00,95%CI 0.98～1.02)無相關(guān)性，該論文分析了rs10757278與冠心病嚴(yán)重程度之間的關(guān)系也得到了陰性結(jié)果，但得出結(jié)果和結(jié)論與該實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果相同，所以9p21冠心病風(fēng)險(xiǎn)基因遠(yuǎn)端的I型INF基因串并沒有參與造成冠心病發(fā)病率增高。

4 結(jié)論

染色體9p21造成冠心病高發(fā)并不是由I型INF表達(dá)介導(dǎo)的。

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文題

文題應(yīng)以最恰當(dāng)、最簡(jiǎn)明的詞語反映論文最重要的特定內(nèi)容。一般使用能充分反映論文主題內(nèi)容的短語，不使用具有主、謂、賓結(jié)構(gòu)的完整語句，一般不使用標(biāo)點(diǎn)和縮略語。

中文文題一般不宜超過20個(gè)漢字。盡可能不設(shè)副題，確有必要時(shí)，可采用不同字體字號(hào)或加破折號(hào)將副題與正題加以區(qū)分。

The Reseach on the Relation Between IFNα21 and the Severity of Coronary Artery Desease

ZHANG Ming-yu，LIU Xiao-xia，WANG Yan，LI Jian-fei，ZHANG Xue-yan,SUN Han-wen
The 4th Hospital of Harbin Medical University，Cardiovascular Department，Harbin，Heilongjiang Province，150001 China

Objective Chromosome 9p21 is associated with the high mobility of coronary artery desease,but the mechanism remines unclear.INFα21expression and the link between the sevirity of coronary atherosclersis was studed in this paper.Methoed 200 patients were admitted and underwent angiography in the 4th hospital of Harbin Medical University from Jan 2014 to Jan 2015.Those patients wre divided into 4 groups according to the imaging results.Control group：coronary artery was smooth without any stenosis.Experiment 1：The coronary artery stenosis of 50%～75%.Experiment 2：The coronary artery stenosis was less than 75%.Experiment 3：The coronary artery stenosis was total occulsion.IFNα21 density was tested by using IFNα21 specific ELISA kit box and specific determination.Results Concentration of INFα21 in control group was （49.32±10.71）μg/L，experiment group 1 was （51.38±8.23）μg/L（compared with CP,P=0.087），experiment group 2 was （47.11±11.36）μg/L（compared with CP,P=0.096），experiment group 3 was（57.03±13.31）μg/L（compared with CP,P=0.065）.The results showed there was no signicant differece among the three experiment groups and control group(P＜0.05).Conclusion So which 9p21 genotype modulates cardiovascular risk does not involve regulation of INFα21 responses.

Chromosome 9p21;Coronary artery desease;IFNα21;Coronary angiograpy;Risk factors

R541.4

A doi 10.11966/j.issn.2095-994X.2016.02.02.02

2016-03-28；

2016-04-16

黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目（12541320）。

張明宇（1973.1-），男，黑龍江人，博士，主任醫(yī)師，研究方向：冠心病的治療。