黏菌素藥敏試驗(yàn)綜述

由于黏菌素的聚陽離子特性導(dǎo)致其對有機(jī)和無機(jī)材料都有不同程度的黏附性，因而在藥敏試驗(yàn)過程中游離黏菌素濃度減低。吐溫-80（P-80）是一種應(yīng)用于微量板的表面活性劑，能夠影響游離的黏菌素濃度從而降低黏菌素的MIC值。

本研究評估不同微量板及添加吐溫-80對測定黏菌素MIC的影響。受試菌株共146株，包括56株銅綠假單胞菌、 29株不動桿菌屬細(xì)菌和61株腸桿菌科細(xì)菌。MIC測定采用兩種聚苯乙烯的96孔微量板（MTTs），一種是未包被的V型底MTTs （NMTTs；costar 3896； Corning， NY， USA）， 另一種是經(jīng)過包被用于組織培養(yǎng)的U型底MTTs （TCMTTs； costar 3799； Corning）。藥敏方法采用CLSI推薦的肉湯稀釋法，黏菌素為其硫酸鹽，肉湯中接種后菌液濃度為5×105CFU/mL，添加吐溫-80后終濃度為0.002%，所有試驗(yàn)均進(jìn)行3次，質(zhì)控菌株為銅綠假單胞菌ATCC 27853，質(zhì)控結(jié)果均在CLSI列出的參考范圍中。

表1　黏菌素對146株臨床分離株的MIC值的分布

表1中列出了兩種微量板添加和不加吐溫-80所得MIC結(jié)果，取幾何平均值后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，未包被的NMTTs測得的MIC（0.54±0.58） mg/L較包被過的TCMTTs測得的MIC（2.84±1.93）mg/L明顯偏低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.000 1；95%CI為-2.5～-2.1）。TCMTTs內(nèi)表面帶負(fù)電荷，會吸附黏菌素，使得游離的黏菌素濃度降低，從而導(dǎo)致測得的MIC比使用NMTTs時(shí)高5.3倍，對銅綠假單胞菌、腸桿菌科細(xì)菌、鮑曼不動桿菌的MIC值分別各升高3.2、5.4和9.4倍。添加吐溫-80后NMTTs所測得MIC（0.09±0.09 mg/L）降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.000 1；95%CI為0.4～0.5）。添加吐溫-80后TCMTTs所測得MIC （2.3±1.5）mg/L降低了1.24倍，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001；95% CI為 -0.31～-0.75）。加吐溫-80后TCMTTs比NMTTs所測得的MIC高出25.6倍，未加吐溫-80前僅增加5倍，加吐溫-80后兩者差異更為顯著，并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.000 1；95% CI為-2.35～-2.1）。

由此可見，黏菌素的MIC受微量板特性的影響很大，添加吐溫-80也可以顯著降低各種微量板所測得的MIC。 最近一項(xiàng)研究使用微量稀釋法、E試驗(yàn)法、瓊脂稀釋法測定黏菌素對50株多重耐藥革蘭陰性桿菌的MIC，結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加吐溫-80使得MIC值變異很大。當(dāng)前在細(xì)菌耐藥性越來越嚴(yán)峻的形勢下，黏菌素勢必會更廣泛地被應(yīng)用于臨床?？梢灶A(yù)見其耐藥性也會隨之上升。回顧黏菌素的MIC測定方法很有必要。

ALBUR M， NOEL A， BOWKER K， et al. Colistin susceptibility testing： time for a review. J Antimicrob Chemother， 2014，69（5）：1432-1434.

楊 洋摘譯 朱德妹審校

Colistin susceptibility testing: time for a review

2015-04-29