陳天會(huì)， 蔣正舉， 王世飛， 賀元杰

（遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻喉科， 貴州 遵義 563003）

p53 p63及p73在鼻咽癌患者組織中的表達(dá)及臨床意義

陳天會(huì)， 蔣正舉， 王世飛， 賀元杰

（遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻喉科， 貴州 遵義 563003）

目的：研究P53、P63和P73在鼻咽癌患者組織中的表達(dá)情況及臨床意義。方法：選擇2012年8月至2014年8月在我院確診的鼻咽癌患者89例為觀察組。并選擇同期在我院接受治療的鼻咽黏膜慢性炎癥患者50例為對(duì)照組。對(duì)比兩組組織中P53、P63和P73表達(dá)情況，并分析其不同臨床病例特征的意義。結(jié)果：觀察組P53、P63和P73陽(yáng)性率為67.4%（60/89）、87.6%（78/89）以及53.0% （48/89），均高于對(duì)照組的28.0%（14/50）、36.0%（18/50）、20.0%（10/50），差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。不同性別、年齡中p53、p63和p73表達(dá)陽(yáng)性率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在具有頸淋巴轉(zhuǎn)移的鼻咽癌患者中p53、p63表達(dá)陽(yáng)性率更高、在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的鼻咽癌患者中p63、p73表達(dá)陽(yáng)性率更高以及病理類型為非角化癌鼻咽癌患者中p63表達(dá)陽(yáng)性率更高。差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：鼻咽癌患者組織中P53、P63和P73基因高表達(dá)，并且對(duì)臨床分期、淋巴轉(zhuǎn)移以及病理分型有顯著的相關(guān)性。通過對(duì)P53、P63和P73在兩種基因的監(jiān)測(cè)，對(duì)鼻咽癌臨床治療和預(yù)后都有較好的指導(dǎo)作用。

鼻咽癌； P53基因； P63基因； P73基因； 臨床分期

鼻咽癌是頭頸部常見的惡性腫瘤之一，我國(guó)發(fā)病率明顯高于其他地區(qū)［1］。病理類型多為低分化鱗狀細(xì)胞癌，隨著醫(yī)療技術(shù)不斷的進(jìn)步，鼻咽癌的治療已經(jīng)取得較大進(jìn)展，但依舊存在預(yù)后不良的結(jié)果。因鼻咽癌在早期難以發(fā)現(xiàn)，并且易出現(xiàn)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、治療后復(fù)發(fā)等情況，造成臨床上對(duì)鼻咽癌的治療效果不佳［2］。本文研究并分析鼻咽癌患者p53、p63和p73相關(guān)水平，得到一些結(jié)論，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：選擇2012年8月至2014年8月在我院確診的鼻咽癌患者89例為觀察組。其中男性患者54例，女性患者35例。年齡35～73歲，平均年齡48.3 ±4.29歲。同時(shí)選擇同期在我院接受治療的鼻炎黏膜慢性炎癥患者50例為對(duì)照組。其中男性患者30例，女性患者20例。年齡30～70歲，平均年齡47.1±4.21歲。兩組患者在年齡、性別等基本資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法：在纖維鼻咽鏡下鉗取觀察組鼻咽癌組織和對(duì)照組鼻咽粘膜慢性炎癥組織，并對(duì)是否出現(xiàn)頸淋巴轉(zhuǎn)移、TNM分期以及病理分型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。將得到的標(biāo)本應(yīng)用10%甲醛固定后石蠟包埋，然后制成4μm的連續(xù)切片備用。其中鼠抗人的p53、p63和p73單克隆抗體均購(gòu)自上海長(zhǎng)嘉生物科技公司，按照說明書對(duì)組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)法檢測(cè)。最后在顯微鏡下觀察染色結(jié)果，并通過對(duì)染色陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞比例與強(qiáng)度評(píng)分。

1.3 結(jié)果判定［3］：首先進(jìn)行染色強(qiáng)度的計(jì)分：沒有染色的記為0分、輕度染色記為1分、中度染色記為2分以及強(qiáng)度染色記為3分。然后對(duì)染色細(xì)胞面積進(jìn)行定量計(jì)分：沒有細(xì)胞染色記為0分、＜25%的細(xì)胞被染色記為1分、25%～50%的細(xì)胞被染色記為2分以及＞50%的細(xì)胞被染色記為3分。最后將兩種計(jì)分相加記為染色總結(jié)果，當(dāng)總分＞2分記為陽(yáng)性，反之為陰性。見圖1～3。

圖1 p53在鼻咽癌組織中表達(dá)為陽(yáng)性

圖2 p63在鼻咽癌組織中表達(dá)為陽(yáng)性

圖3 p73在鼻咽癌組織中表達(dá)為陽(yáng)性

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組p53、p63和p73表達(dá)情況對(duì)比：觀察組p53、p63和p73陽(yáng)性率為67.42%、87.64%及53.03%，均高于對(duì)照組的28.00%、36.00%、20.00%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 p53、p63和p73表達(dá)與鼻咽癌的病例特征分析：不同性別、年齡、TNM分期以及病理類型中p53表達(dá)陽(yáng)性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在具有淋巴轉(zhuǎn)移的鼻咽癌患者中p53表達(dá)陽(yáng)性率高于未出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=9.565，P＜0.05）。在具有淋巴轉(zhuǎn)移、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期以及病理類型為非角化癌鼻咽癌患者中p63表達(dá)陽(yáng)性率更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.903、11.465、110.095，P＜0.05）。在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的鼻咽癌患者中p73表達(dá)陽(yáng)性率更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.347，P＜0.05）。見表2。

表1 兩組標(biāo)志物表達(dá)情況對(duì)比n（%）

表2 標(biāo)志物表達(dá)與鼻咽癌的病例特征分析n（%）

3 討 論

鼻咽癌是頭頸部常見的惡性腫瘤之一，目前認(rèn)為鼻咽癌的發(fā)生與遺傳、EB病毒感染及環(huán)境因素有關(guān)，多發(fā)生于鼻咽部的咽隱窩及頂后壁，發(fā)病部位比較隱蔽，不易早期發(fā)現(xiàn)，臨床確診依靠病理診斷。輔助檢查包括CT以及MRI等進(jìn)行病變范圍的診斷［4］。

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，臨床上開始對(duì)相關(guān)基因的表達(dá)水平進(jìn)行深入研究，得到不錯(cuò)的結(jié)果。其中p53基因最早在七十年代被發(fā)現(xiàn)，同時(shí)被定位為腫瘤抑制基因，對(duì)脆弱的細(xì)胞發(fā)生癌變具有抑制作用［5］。但隨著研究深入發(fā)現(xiàn)p53有突變型，并具有致癌作用。臨床上已經(jīng)有過半的腫瘤患者體內(nèi)檢測(cè)到變異的p53基因，從而引起研究人員的重視。p63和p73都是在1997年被發(fā)現(xiàn)的p53成員，這兩種基因和p53具有極高的同源性。兩者可以在相異的啟動(dòng)子作用下形成不同的異構(gòu)體，但存在極少數(shù)的突變體。當(dāng)p63和p73被誘導(dǎo)后同樣對(duì)細(xì)胞具有凋亡作用，同時(shí)對(duì)p53相應(yīng)的應(yīng)答基因的轉(zhuǎn)錄具有激活效果。在這樣的前提下p63和p73兩個(gè)基因都具有抑癌功能，但當(dāng)他們出現(xiàn)過度表達(dá)時(shí)又會(huì)突變，從而表現(xiàn)為致癌作用。通過對(duì)p53、p63和p73臨床特征分析以及相互之間的關(guān)系，能幫助我們進(jìn)一步了解鼻咽癌的發(fā)生進(jìn)程，并為臨床治療提供依據(jù)。

本文通過對(duì)比鼻咽癌與非鼻咽癌患者相關(guān)水平發(fā)現(xiàn)：觀察組P53、P63和P73陽(yáng)性表達(dá)率均高于對(duì)照組，并且在不同性別、年齡中p53、p63和p73表達(dá)陽(yáng)性率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在具有淋巴轉(zhuǎn)移的鼻咽癌患者中p53、p63表達(dá)陽(yáng)性率更高；在TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的鼻咽癌患者中p63、p73表達(dá)陽(yáng)性率更高以及病理類型為非角化癌鼻咽癌患者中p63表達(dá)陽(yáng)性率更高。p53基因作為常見的抑癌基因已經(jīng)被人們所熟知，尤其是p53對(duì)細(xì)胞具有增殖、凋亡的雙重促進(jìn)作用。當(dāng)細(xì)胞正常生長(zhǎng)時(shí)對(duì)其有維持作用，一旦細(xì)胞受到創(chuàng)傷，p53基因就會(huì)對(duì)DNA產(chǎn)生明顯的誘導(dǎo)作用。使細(xì)胞停止生長(zhǎng)，從而嚴(yán)重抑制細(xì)胞的正常增殖。最嚴(yán)重的將會(huì)對(duì)DNA修復(fù)產(chǎn)生阻止作用，直到細(xì)胞無法修復(fù)而凋亡。一般在野生型p53基因中其細(xì)胞含量偏低，以致免疫組化無法檢測(cè)出來。而突變型p53基因多集中在細(xì)胞核中，采用免疫組化法能高效檢出。尤其是出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移的患者，其p53基因檢出率最高。作為p53家族的p63基因和p73基因，其可能具有對(duì)相應(yīng)突變體腫瘤啟動(dòng)的特性，進(jìn)而保證癌癥細(xì)胞在有利條件下快速增殖。

［1］ 牛道立，李建鋒，何芬，等.siRNA干擾Pokemon基因?qū)Ρ茄拾〤NE-2細(xì)胞生長(zhǎng)作用的研究［J］.中華腫瘤防治雜志，2012，19（14）：1041～1045.

［2］ 黃繼紅，昂杰，牟忠林，等.Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞在鼻咽癌中相關(guān)性的研究［J］.海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，19（9）：1194～1196.

［3］ 鄭大勇，董少婷，陳錦章，等.PTEN與p53在鼻咽癌中的表達(dá)及意義［J］.河北醫(yī)學(xué)，2014，20（9）：1415～1418.

［4］ 樓建林，王升曄，郭良，等.鼻咽癌放療后頸部淋巴結(jié)復(fù)發(fā)或殘留的手術(shù)治療［J］.中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2014，49（4）：300～304.

［5］ 李彩蘋，房太勇.尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子-2，P53和Ki67在胃癌組織中的表達(dá)及意義［J］.中華消化雜志，2015，35 （5）：340～343.

Expression and Clinical Significance of p53 p63 and p73 in Patients w ith Nasopharyngeal Carcinoma

CHEN Tianhui， JIANG Zhengju， WANG Shifei， et al

（The Affiliated Hospital of ZunyiMedical College，Guizhou Zunyi 563003，China）

【Abstract】Objective：To explore the expression and clinical significance of p53，p63 and p73 in patients with nasopharyngeal carcinoma.M ethods：89 cases of nasopharyngeal carcinoma patients diagnosed from August2013 to August2014 in our hospitalwere chosen as the observation group.The other 50 caseswith chronic inflammatory disease were as the control group.The expression of p73，p63 and p53 in the two groups were compared，and the significance of its characteristics in different clinical cases were analyzed.Results：The positive rates of p73，p63 and p53 in the observation group were 67.42%（60/89），87.64%（78/89）and 53.03%（48/89），which were significantly higher than those in the control group（28%），36% （18/ 50），20%（10/50）.Positive rates of p73，p63 and p53 in different sex and agewere not significantly different.In patients with nasopharyngeal carcinoma with lymphatic metastasis，the expression of p63，p53 was higher，and the positive rate of the expression of p63 and p73 in TNM stage was higher and the pathological type was higher than that of the expression of p63 in patients with nasopharyngeal carcinoma.The differences were statistically significant（P＜0.05）.Conclusion：The expression of p63，p73 and p53 gene in nasopharyngeal carcinoma patients is highly expressed，and it has significant correlation with clinical stage，lymph nodemetastasis and pathological typing.The monitoring of p53，p63 and p73 genes have good guidance for clinical treatment and prognosis of nasopharyngeal carcinoma.

Nasopharyngeal carcinoma； p53 gene； p63 gene； p73 gene； Clinical stage

1006-6233（2016）08-1267-04

A 【doi】10.3969/j.issn.1006-6233.2016.08.017

貴州省科技基金資助項(xiàng)目（編號(hào)：［2010］3138號(hào)）