張　謙　劉　娜　肖云峰▲.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)新藥安全評價(jià)研究中心，內(nèi)蒙古呼和浩特　000；.內(nèi)蒙古自治區(qū)巴彥淖爾市醫(yī)院檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古巴彥淖爾　05000

良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范體系下全自動(dòng)血液分析儀的3Q驗(yàn)證

張謙1劉娜2肖云峰1▲
1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)新藥安全評價(jià)研究中心，內(nèi)蒙古呼和浩特010110；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)巴彥淖爾市醫(yī)院檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古巴彥淖爾015000

目的 以Sysmex XT-1800iv全自動(dòng)血液分析儀為例，探討良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范（GLP）體系下全自動(dòng)血液分析儀的3Q驗(yàn)證過程。方法 選擇白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血細(xì)胞比容（HCT）、血小板（PLT）5項(xiàng)檢驗(yàn)指標(biāo)，對儀器的精密度、攜帶污染率、線性進(jìn)行性能驗(yàn)證。結(jié)果 所測指標(biāo)的批內(nèi)精密度CV值＜4.00%，攜帶污染率＜1.0%，線性相關(guān)系數(shù)r值＞0.99。結(jié)論 經(jīng)GLP體系下的3Q驗(yàn)證，該全自動(dòng)血液分析儀各方面性能良好，可以用于臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)工作。

良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范；全自動(dòng)血液分析儀；3Q驗(yàn)證

［Abstract］Objective To explore the procedures of 3Q validation for automatic blood analyzer under the good laboratory practice（GLP）system based on the Sysmex XT-1800iv automatic blood analyzer.Methods 5 test indicators of blood cell（WBC），red blood cell（RBC），hemoglobin（HGB），hematocrit（HCT）and platelet（PLT）were chosen to evaluate the precision，cross contamination，linearity of the automatic blood analyzer.Results The within-run precision of the items was lower than 4.00%，the cross contamination rate was lower than 1.0%，the linear coefficient r was more than 0.99. Conclusion The 3Q validation under the GLP system proves that the automatic blood analyzer is good in performance and is appropriate for clinical laboratories.

［Key words］Good laboratory practice；Automatic blood analyzer；3Q verification

良好實(shí)驗(yàn)規(guī)范 （good laboratory practice，GLP）實(shí)驗(yàn)室是主要針對食品、化妝品、新藥等進(jìn)行的安全性評價(jià)實(shí)驗(yàn)而制訂的規(guī)范［1］，在最大程度上消除可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的主觀和客觀因素，降低誤差，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)可靠［2］。為保證研究數(shù)據(jù)的真實(shí)有效，GLP實(shí)驗(yàn)室不僅在硬件方面具有相應(yīng)儀器設(shè)備，在人員和軟件方面也具有較高的要求［5-6］。國家食品藥品監(jiān)督管理總局、美國食品和藥物管理局均有相應(yīng)文件明確規(guī)范GLP實(shí)驗(yàn)室中備案儀器設(shè)備應(yīng)定期進(jìn)行3Q驗(yàn)證［3］。所謂3Q驗(yàn)證，即指儀器的安裝驗(yàn)證（installation qualification，IQ）、操作驗(yàn)證（operation qualification，OQ）和性能驗(yàn)證（performance qualification，PQ）［4］。而其中涉及到的性能驗(yàn)證是整個(gè)3Q驗(yàn)證中的關(guān)鍵步驟，需要在實(shí)驗(yàn)前精心設(shè)計(jì)驗(yàn)證指標(biāo)和驗(yàn)證方案［7］。本文以Sysmex XT-1800iv全自動(dòng)血液分析儀為例，探討在GLP管理體系下全自動(dòng)血液分析儀的校準(zhǔn)及PQ驗(yàn)證。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑

儀器為Sysmex XT-1800iv全自動(dòng)血液分析儀（儀器編號70440）；試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品為Sysmex公司生產(chǎn)，CELL PACK（批號G5168），STROMATOLYSER-FB（批號R5021），STROMATOLYSER-4DL（批號R5034），SULFOLYSER（批號A5008），STROMATOLYSER-4DS（A5022），質(zhì)控品Level2（批號6050811），SysmexSCS-1000（批號60600525），高、中、低三個(gè)水平的EDTA-K2抗凝血。

1.2方法

1.2.1批內(nèi)精密度 取高、中、低三個(gè)水平的新鮮EDTAK2抗凝血，連續(xù)重復(fù)測定10次，計(jì)算CV、SD。

1.2.2攜帶污染率取高濃度新鮮EDTA-K2抗凝血混勻測定3次，其測定值為H1、H2、H3；取低濃度新鮮EDTA-K2抗凝血測定3次，測定值為L1、L2、L3。通過公式攜帶污染率=（L1-L3）/（H3-L3）×100%計(jì)算攜帶污染率。

1.2.3線性取1份高值新鮮EDTA-K2抗凝血（H），分別按5∶5、4∶5、3∶5、2∶5、1∶5的比例進(jìn)行稀釋，每個(gè)濃度重復(fù)3次測定，計(jì)算平均值。將實(shí)際測定值與理論值相比較，通過方程y=ax+b驗(yàn)證線性范圍。

2　結(jié)果

2.1批內(nèi)精密度

批內(nèi)精密度是衡量儀器性能的重要指標(biāo)，通過對高、中、低3個(gè)水平的新鮮EDTA-K2抗凝血連續(xù)重復(fù)測定，計(jì)算CV、SD值均在判定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，見表1～3。

表1　低值批內(nèi)精密度測定（n=10）

表2　中值批內(nèi)精密度測定（n=10）

表3　高值批內(nèi)精密度測定（n=10）

2.2攜帶污染率

攜帶污染率是直接衡量上一個(gè)樣品對下一個(gè)樣品測定結(jié)果影響大小的指標(biāo)。各項(xiàng)目的攜帶污染率均＜1.0%，符合行業(yè)通用標(biāo)準(zhǔn)，見表4。

表4　攜帶污染率測定結(jié)果（n=6）

2.3線性實(shí)驗(yàn)

RBC、WBC、HGB、HGB、PLT 5項(xiàng)參數(shù)的線性相關(guān)系數(shù)r＞0.99，a值在（1.00±0.05）范圍內(nèi)，表明該儀器在一定稀釋范圍內(nèi)具有良好的線性相關(guān)性。見表5。

表5　線性測定結(jié)果（n=5）

3　討論

GLP實(shí)驗(yàn)室是藥物非臨床研究安全性評價(jià)的一個(gè)必然趨勢，也是世界經(jīng)濟(jì)發(fā)展一體化的要求［8-9］。相對于非GLP的藥理毒理等實(shí)驗(yàn)所得出的結(jié)果更具有嚴(yán)密性和可靠性［10-11］。納入GLP的實(shí)驗(yàn)，從項(xiàng)目負(fù)責(zé)人制訂實(shí)驗(yàn)方案，到機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人的審批，經(jīng)質(zhì)量保障部的檢查，到方案完整實(shí)施，及質(zhì)量保障部在實(shí)驗(yàn)中的監(jiān)督以及最后實(shí)驗(yàn)報(bào)告總結(jié)等，都是十分的周密和詳細(xì)的［12-13］，并且所涉及的每一個(gè)程序都要有相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程做為依據(jù)與指導(dǎo)［14］，整個(gè)實(shí)驗(yàn)排除了許多因素的干擾，所以能夠給新藥研發(fā)提供完整、原始的數(shù)據(jù)［15］，給臨床研究提供更為有價(jià)值的資料［1］。

3Q驗(yàn)證中PQ驗(yàn)證頻率為每年一次［16］。儀器有下列情況之一則需要重新驗(yàn)證：儀器的放置地點(diǎn)改變、儀器的檢測方法改變、儀器進(jìn)行重大維修［17］。GLP體系下儀器的性能驗(yàn)證需在部門負(fù)責(zé)人的監(jiān)督下由有經(jīng)驗(yàn)的工作人員完成［18］：第一，制訂驗(yàn)證方案；第二，對儀器參數(shù)進(jìn)行設(shè)置，對檢測項(xiàng)目進(jìn)行校準(zhǔn)，對儀器精密度、線性、攜帶污染率、準(zhǔn)確性等進(jìn)行性能驗(yàn)證；第三，驗(yàn)證報(bào)告由檢測人員簽名確認(rèn)后連同原始數(shù)據(jù)以書面形式歸檔，3Q驗(yàn)證過程需要質(zhì)量保障部門人員的監(jiān)督［19-20］。

經(jīng)過良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范體系下的3Q驗(yàn)證，臨床檢驗(yàn)部Sysmex XT-1800iv全自動(dòng)血液分析儀各項(xiàng)性能指標(biāo)良好，所測定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)準(zhǔn)確，可用于藥物非臨床研究安全性評價(jià)的臨床檢驗(yàn)中血液學(xué)指標(biāo)的檢測。。

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3Q verification of automatic blood analyzer under good laboratory practice system

ZHANG Qian1LIU Na2XIAO Yunfeng1▲
1.Center for New Drug Safety Evaluation and Research，Inner Mongolia Medical University，Inner Mongolia Autonomous Region，Huhhot010110，China；2.Clinical Laboratory，Bayan Nur Hospital，Inner Mongolia Autonomous Region，Bayan Nur015000，China

R95

A

1673-7210（2016）05（b）-0170-03

內(nèi)蒙古自治區(qū)衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)醫(yī)療衛(wèi)生科研計(jì)劃項(xiàng)目（201302052）。

2016-02-10本文編輯：程銘）