周麗華 趙俊

臨床研究

血清脂質(zhì)運載蛋白-2對冠心病的臨床意義

周麗華 趙俊

目的 檢測冠心病患者血清脂質(zhì)運載蛋白-2（Lipocalin-2）濃度水平，探討脂質(zhì)運載蛋白-2在冠心病中的臨床意義。方法 用酶聯(lián)免疫反應方法檢測冠心病患者167例（CHD組）及127名健康對照者（對照組）血清脂質(zhì)運載蛋白-2水平，同時收集血糖、血脂等一般性資料。結果 CHD組患者血清脂質(zhì)運載蛋白-2濃度明顯高于對照組［（417.78±55.87）pg/ml比（231.67±71.71）pg/ml，P=0.000］。相關分析表明，脂質(zhì)運載蛋白-2與MDA（r=0.257，P=0.006）、hs-CRP（r=0.178，P=0.018），TNF-α（r=0.245，P=0.005）、HOMA-IR（r=0.214，P=0.001）呈正相關，與HDL-C（r=-0.184，P=0.027）、GSH（r=-0.358，P=0.000）呈負相關。多重線性回歸分析提示，MDA、HOMA-IR是影響脂質(zhì)運載蛋白-2水平的獨立相關因素，血清脂質(zhì)運載蛋白-2診斷冠心病ROC曲線下面積為0.812（0.765，0.861）。結論 血清脂質(zhì)運載蛋白-2與胰島素抵抗、氧化應激及炎癥密切相關，它有助于冠心病診斷及病情檢測。

脂質(zhì)運載蛋白-2； 冠狀動脈疾??； 臨床意義

冠心?。╟oronary heart disease，CHD）是一種主要由于冠狀動脈粥樣硬化導致心肌供血不足的臨床代謝綜合征[1，2]。冠心病發(fā)病率高、危害大，病死率居高不下，嚴重影響廣大人民的身心健康。目前，冠心病的確切發(fā)病機制尚未明了。國內(nèi)學者現(xiàn)一致認為內(nèi)皮細胞損傷是冠心病發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié)，而其損傷與內(nèi)皮細胞氧化應激及機體胰島素抵抗密切相關[2,3]。

脂質(zhì)運載蛋白-2是kjeldsen在1993年用免疫沉淀法及免疫印跡法在中性粒細胞中發(fā)現(xiàn)并成功分離的蛋白[4]。既往研究發(fā)現(xiàn)，脂質(zhì)運載蛋白-2廣泛參與慢性炎癥和脂肪代謝[5,6]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，脂質(zhì)運載蛋白-2參與肥胖、代謝綜合征及糖尿病的發(fā)生發(fā)展[7,8]。本研究旨在檢測血清脂質(zhì)運載蛋白-2在冠心病患者中的表達水平，以探討其對冠心病的臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2014年1月至 2015年8月在我院心內(nèi)科導管室經(jīng)過冠狀動脈造影明確診斷為CHD的患者167例，其中男性86例、女性81例，年齡（48.12±13.23）歲。診斷標準：管腔直徑狹窄70%～75%或以上[9]。選取同期健康體檢正常者127例作為對照組，其中男性65例、女性62例，年齡（49.35±14.12）歲。所有受試者測量血壓、血糖，以確定是否有高血壓病及糖尿病。所有CHD患者均為初次發(fā)現(xiàn)，在接受造影前均未接受抗凝、PCI及支架等治療。所有操作和測量必須征得患者同意并簽署知情同意書。

1.2 方法 測量受試者以下形態(tài)學指標：身高、體重、腰圍，按相關公式計算人體質(zhì)量指數(shù)（BMI），體重指數(shù)=體重/身高2（kg/m2）。所有研究對象在醫(yī)院清晨抽取空腹靜脈血，按照常規(guī)經(jīng)典方法檢測空腹血糖（FPG）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等血脂指標，以及超敏C-反應蛋白（hs-CRP）水平。采用南京建成生物公司相關試劑盒檢測丙二醛（MDA）；采用武漢谷歌生物有限公司相關試劑盒檢測血清脂質(zhì)運載蛋白-2和還原型谷胱甘肽（GSH）。胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）計算如下：

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 18.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料符合正態(tài)分布采用±s描述，組間有關參數(shù)比較采用t檢驗；計數(shù)資料采用卡方檢驗。脂質(zhì)運載蛋白-2與血糖、血脂、氧化應激等參數(shù)之間的關系采用Pearson或者Sperm相關分析。多元線性回歸探討影響血清脂質(zhì)運載蛋白-2因素。Logistic回歸分析冠心病發(fā)病的危險因素；進行受試者工作特征（ROC）曲線分析脂質(zhì)運載蛋白-2對CHD診斷。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較 兩組之間年齡、性別上未見統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；BMI、腰圍、MDA、LDL-C、TG、TC、hs-CRP、HOMA-IR、HDL-C、GSH、高血壓及糖尿病兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05或P＜0.01）。見表1。

2.2 血清脂質(zhì)運載蛋白-2在各組人群分布 CHD患者血清脂質(zhì)運載蛋白-2濃度明顯高于對照組［（417.78±55.87）pg/ml比（231.67±71.71）pg/ml，P= 0.000］。

2.3 相關分析及多元線性回歸分析 血清脂質(zhì)運載蛋白-2與年齡（r=0.414，P=0.126）、BMI（r= 0.254，P=0.376）、腰圍（r=0.358，P=0.297）、LDL-C（r=0.287，P=0.027）、TG（r=0.426，P=0.026）、TC（r= 0.524，P=0.046）無相關性；而與HDL-C（r=-0.184，P=0.027）、GSH（r=-0.358，P=0.000）呈負相關，與MDA（r=0.257，P=0.006）、hs-CRP（r=0.178，P= 0.018）、TNF-α（r=0.245，P=0.005）、HOMA-IR（r= 0.214，P=0.001）呈正相關。以脂質(zhì)運載蛋白-2為因變量，上述與之呈顯著關系的指標作為自變量進行多元線性逐步回歸，結果顯示，MDA、HOMA-IR與脂質(zhì)運載蛋白-2獨立相關，回歸方程Y脂質(zhì)運載蛋白-2= 321.36－12.26XMDA－9.25XHOMA-IR，所得模型決定系數(shù)R2=0.812（F=40.36，P=0.020）。

2.4 血清脂質(zhì)運載蛋白-2對冠心病的檢驗效能分析 繪制ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)血清脂質(zhì)運載蛋白-2脂肪因子對冠心病的檢驗ROC曲線下面積為0.812（0.765，0.861），最佳截點434.78 ng/ml（敏感度為68.8%，特異度為83.4%，P=0.041），約登指數(shù)為0.522。

3 討論

冠心病現(xiàn)已成為常見疾病，然而其確切機制尚不明了。在冠心病發(fā)生發(fā)展過程中存在諸多病理生理方面的改變，其中胰島素抵抗、氧化應激以及炎癥在冠心病的發(fā)生發(fā)展進程中起著至關重要的作用[2]。生理情況下機體脂肪細胞因子處于正常水平。而在冠心病發(fā)展過程中脂肪細胞因子可能通過參與肥胖-炎癥-血脂異常等幾個方面介導血管內(nèi)皮細胞受損最終參與冠心病的發(fā)生發(fā)展[2]。

表1 兩組受試者一般資料比較（±s）

表1 兩組受試者一般資料比較（±s）

注：HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇；TG：甘油三酯；TC：總膽固醇；MDA：丙二醛；GSH：還原型谷胱甘肽；hs-CRP：超敏C-反應蛋白水平；TNF-α：腫瘤壞死因子-α；HOMA-IR：胰島素抵抗指數(shù)。

組別 例數(shù) 年齡（歲） 男/女 體重指數(shù)（kg/m2） 腰圍（cm） HDL-C（mmol/L） LDL-C（mmol/L） TG（mmol/L）對照組 127 49.35±14.12 65/62 23.58±5.32 70.03±10.34 2.06±0.98 2.10±0.54 2.89±0.81 CHD組 167 48.12±13.23 86/81 25.59±4.06 78.04±14.18 1.79±0.54 3.71±1.09 3.71±0.54 P值 0.671 0.912 0.002 0.000 0.019 0.000 0.000組別 TC（mmol/L） MDA（μmol/L） GSH（μmol/L） hs-CRP（ng/ml） TNF-α（pg/ml） HOMA-IR 高血壓（例） 糖尿?。ɡφ战M 3.47±1.22 2.34±0.56 358.96±27.31 2.56±0.86 13.25±5.47 2.66±0.96 11 5 CHD組 3.95±1.35 4.11±0.47 241.36±35.25 2.81±0.62 16.38±5.31 3.69±0.79 74 23 P值 0.005 0.000 0.000 0.015 0.000 0.000 0.000 0.000

脂質(zhì)運載蛋白-2廣泛分布于人體肺、肝臟、胸腺、腎臟、小腸等器官和組織。既往已對脂質(zhì)運載蛋白-2在肥胖、代謝綜合征、糖尿病等疾病臨床意義進行大量的研究。然而脂質(zhì)運載蛋白-2在冠心病患者血清表達水平及臨床意義鮮見報道。本研究發(fā)現(xiàn)，冠心病組患者血清脂質(zhì)運載蛋白-2濃度均明顯高于健康對照組。相關分析發(fā)現(xiàn)，脂質(zhì)運載蛋白-2與胰島素抵抗、氧化應激以及炎癥密切相關。Wang等[10]進行的臨床試驗發(fā)現(xiàn)，循環(huán)血液中的脂質(zhì)運載蛋白-2濃度與hs-CRP水平呈高度正相關。為了排除混雜因素的影響，校正了性別、年齡、脂肪量等混雜因素后，這種相關性仍然存在。Lin等[11]利用ob/ ob小鼠進行研究，發(fā)現(xiàn)肥胖小鼠肝臟組織中的脂質(zhì)運載蛋白-2表達水平明顯升高，而在脂肪組織中該分子的表達水平亦高于正常。Yah等[12]將純化的脂質(zhì)運載蛋白-2添加在3T3-L1脂肪細胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)24 h后檢測胰島素誘導下和基礎狀態(tài)下的葡萄糖攝取量，實驗結果表明，脂肪細胞無論在基礎狀態(tài)下還是在胰島素刺激狀態(tài)下，都較對照組的葡萄糖攝取量顯著升高。Wang等[10]利用體內(nèi)酶聯(lián)免疫吸附試驗對229名中國人的血清脂質(zhì)運載蛋白-2水平進行檢測時發(fā)現(xiàn)，血脂代謝紊亂者血清脂質(zhì)運載蛋白-2濃度明顯升高，而且可能與肥胖相關的代謝異常有關。綜上所述，在機體中血清脂質(zhì)運載蛋白-2增高時可介導氧化應激、胰島素抵抗及炎癥的發(fā)生，最終導致冠心病發(fā)生發(fā)展。然而血清脂質(zhì)運載蛋白-2在冠心病患者內(nèi)增高的機制及脂質(zhì)運載蛋白-2對冠心病的作用需從分子機制進一步探討。

目前臨床上冠脈造影檢查是用于冠心病診斷及病情監(jiān)測的“金標準”，但因存在有創(chuàng)性、取樣標本穿刺偏移、價格高昂、存在一定風險等缺陷，嚴重制約著其在臨床中的廣泛應用[13]。臨床工作迫切需要操作簡單且重復性好的無創(chuàng)診斷方法，既便于冠心病診斷又利于病情監(jiān)測。血清生物標志物診斷因其重復性好、取樣創(chuàng)傷小，近年來在臨床CHD病情檢測方面得到廣泛應用[14]。本研究繪制ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清脂質(zhì)運載蛋白-2對冠心病檢驗ROC曲線下面積分別為0.812，最佳截點434.78 ng/ml（敏感度為68.8%，特異度83.4%，P=0.041），約登指數(shù)為0.522。上述結果提示，血清脂質(zhì)運載蛋白-2用于冠心病診斷及病情監(jiān)測方面檢驗效能良好，在臨床上值得應用和推廣。

綜上所述，脂質(zhì)運載蛋白-2與冠心病發(fā)生發(fā)展中氧化應激、炎癥、胰島素抵抗緊密相關，并且在一定程度上可以運用于CHD的診斷。進一步研究探討脂質(zhì)運載蛋白-2在CHD中的分子機制及其上下游調(diào)控因素將具有重要的臨床意義和良好的研究前景。

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The clinical value of serum lipocalin-2 in coronary heart disease

ZHOU Li-hua，ZHAO Jun.Department of Geriatric，Huangshi Center Hospital，Huangshi 435000，China

ZHAO Jun，E-mail：35320220@qq.com

Objective To detect the serum levels of lipocalin-2 in patients of coronary heart disease（CHD），and to analysis clinical value in coronary heart disease.MethodsEnzyme linked immunosorbent assay（ELISA）was used to detect the serum lipocalin-2 in 167 CHD patients and 127 healthy controls.ResultsThe serum Lipocalin-2 concentration in coronary heart disease was significantly higher than in healthy controls［（417.78±55.87）pg/ml vs（231.67±71.71）pg/ml，P=0.000］.Lipocalin-2 associated positively with MDA（r= 0.257，P=0.006），hs-CRP（r=0.178，P=0.018），TNF-α（r=0.245，P=0.005），HOMA-IR（r=0.214，P= 0.001），but negatively with（r=-0.184，P=0.027），GSH（r=-0.358，P=0.000）.The area under the receiver operating characteristic curve for CHD diagnosis was estimated to be 0.812（0.765，0.861）.ConclusionLipocalin-2 is closely related to oxidative stress，inflammation and insulin resistance in CHD.It is useful for disease surveillance and diagnosis of CHD by serum lipocalin-2.

Lipocalin-2； Coronary heart disease； Clinical value

435000 湖北省黃石市，黃石市中心醫(yī)院老年病科

趙俊，E-mail：35320220@qq.com

10.3969/j.issn.1672－5301.2016.04.015

R541.4

A

1672-5301（2016）04-0345-03

2015-10-17）