吳水清，鄭樂(lè)云*，黃種持，仇登高，許朝輝，鄭君飄，邱峰巖，吳精靈，劉銀華

(1.福建省水產(chǎn)研究所，福建省海洋生物增養(yǎng)殖與高值化利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 廈門 361013；2.廈門小嶝水產(chǎn)科技有限公司，福建 廈門 361000)

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云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交子代胚胎發(fā)育及仔稚幼魚(yú)形態(tài)觀察

吳水清1，鄭樂(lè)云1*，黃種持1，仇登高1，許朝輝1，鄭君飄2，邱峰巖2，吳精靈1，劉銀華1

(1.福建省水產(chǎn)研究所，福建省海洋生物增養(yǎng)殖與高值化利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 廈門 361013；2.廈門小嶝水產(chǎn)科技有限公司，福建 廈門 361000)

對(duì)云紋石斑魚(yú)(♀)與鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交子代胚胎及仔稚幼魚(yú)的生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)行了觀察與研究。在水溫(22±1)℃、鹽度33、pH7.8的海水中，雜交受精卵經(jīng)過(guò)35h23min完成整個(gè)胚胎發(fā)育。胚胎發(fā)育可分為卵裂期、囊胚期、原腸期、神經(jīng)胚期和器官形成期，其中在卵裂期、囊胚期和仔魚(yú)出膜前后，雜交子代胚胎的死亡率較高。雜交石斑魚(yú)的孵化率為91.5%，低于對(duì)照組的93.1%；畸形率為10.5%，高于對(duì)照組的5.3%。根據(jù)雜交子代卵黃囊消失與否、第二背鰭棘和腹鰭棘的生長(zhǎng)與收縮、體色和鱗片的出現(xiàn)，可將雜交石斑魚(yú)胎后發(fā)育分為：前期仔魚(yú)(03日齡)、后期仔魚(yú)(427日齡)、稚魚(yú)期(2845日齡)、幼魚(yú)期(46日齡以后)；通過(guò)與其親本早期發(fā)育進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，云紋石斑魚(yú)(♀)與鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交子代具有一定的雜交優(yōu)勢(shì)。

云紋石斑魚(yú)；鞍帶石斑魚(yú)；雜交子代；胚胎發(fā)育；形態(tài)觀察

云紋石斑魚(yú)(Epinephelus moara)和鞍帶石斑魚(yú)(E.lanceolatus)都隸屬于鱸形目(Perciformes)，鮨科(Serranidae)、石斑魚(yú)亞科(Epinephelinae)，石斑魚(yú)屬。云紋石斑魚(yú)俗稱草斑或真油斑，主要分布在日本、韓國(guó)和中國(guó)沿岸[1]。鞍帶石斑魚(yú)俗稱龍躉、龍膽石斑魚(yú)，是石斑魚(yú)類群中體型最大的魚(yú)類，主要產(chǎn)于東南亞、大洋洲海域，在中國(guó)的南海也可捕撈到，但是數(shù)量稀少[2-5]。云紋石斑魚(yú)和鞍帶石斑魚(yú)都是肉食性魚(yú)類，是具有較高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的名貴海產(chǎn)魚(yú)類，也是中國(guó)華南沿海地區(qū)重要的海水養(yǎng)殖種類之一[6-7]。

近年來(lái)雜交育種作為海水魚(yú)類新品種選育的有效方法，也被廣泛地用于石斑魚(yú)新品種培育。目前國(guó)內(nèi)外科研工作者已進(jìn)行人工雜交的石斑魚(yú)種類有：云紋石斑魚(yú)(♀)×七帶石斑魚(yú)(E.septem faciatus)(♂)[8]、 斜帶石斑魚(yú)(E.coioides)(♀)×赤點(diǎn)石斑魚(yú)(E.akaara)(♂)[9]、 巨石斑魚(yú)(E.tauvina)(♀)×赤點(diǎn)石斑魚(yú)(♂)[10]、 地中海石斑魚(yú)(E.costae)(♀)×東大西洋石斑魚(yú)(E.marginatus)(♂)[11]、 棕點(diǎn)石斑魚(yú)(E.fuscoguttatus)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)[12]、 斜帶石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)[12-13]、 云紋石斑魚(yú)(♀)×赤點(diǎn)石斑魚(yú)(♂)[7，14]。

本研究對(duì)云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交子代早期胚胎發(fā)育及仔稚幼魚(yú)發(fā)育過(guò)程中的形態(tài)變化特征進(jìn)行較為系統(tǒng)的觀察。旨在為石斑魚(yú)新品種的選育提供參考，豐富雜交石斑魚(yú)基礎(chǔ)生物學(xué)文庫(kù)，并為實(shí)現(xiàn)雜交石斑魚(yú)規(guī)?；B(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)于2015年4月至6月在廈門小嶝水產(chǎn)科技有限公司進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)所用的云紋石斑魚(yú)和鞍帶石斑魚(yú)均取自經(jīng)馴養(yǎng)的野生石斑魚(yú)親魚(yú)，馴養(yǎng)時(shí)間為2～3年。親魚(yú)經(jīng)注射促黃體激素釋放激素(LHRH-A3)和人類絨毛膜促性腺激素(HCG)促熟、催產(chǎn)，對(duì)成熟的雌性云紋石斑魚(yú)與雄性鞍帶石斑魚(yú)進(jìn)行人工授精(干受精法)，得到的受精卵(云紋石斑魚(yú)♀×鞍帶石斑魚(yú)♂)作為實(shí)驗(yàn)組；對(duì)成熟的云紋石斑魚(yú)進(jìn)行人工授精(干受精法)，所得受精卵(云紋石斑魚(yú)♀×云紋石斑魚(yú)♂)作為對(duì)照組。

1.2雜交受精卵的孵化及仔稚幼魚(yú)的培育

將收集到的受精卵放入圓形孵化桶中孵化直至仔魚(yú)孵出，期間要定時(shí)換水(8h換水一次，每次換水量為50%)，孵化時(shí)水溫為(22±1)℃，鹽度33，pH7.8；待仔魚(yú)孵出后，將仔魚(yú)移入幼苗培育池中培育，水溫(24±1)℃，鹽度33，pH7.8。仔魚(yú)開(kāi)口后投喂牡蠣受精卵，連續(xù)投喂3d，之后開(kāi)始投喂輪蟲(chóng)，17d后補(bǔ)充投喂鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體，20d后補(bǔ)充投喂橈足類和大鹵蟲(chóng)，30d后以投喂橈足類和大鹵蟲(chóng)為主，并根據(jù)各階段幼體生長(zhǎng)狀況、存活數(shù)量和育苗池中生物餌料的存量，調(diào)整橈足類和大鹵蟲(chóng)的投喂量和投餌次數(shù)，培育水體中每天補(bǔ)充小球藻。

1.3胚胎發(fā)育和仔稚幼魚(yú)的形態(tài)觀察

在孵化桶中每次隨機(jī)取50cell受精卵，用NikonE200顯微鏡進(jìn)行胚胎發(fā)育的連續(xù)觀測(cè)和顯微拍照，并詳細(xì)記錄受精卵發(fā)育過(guò)程的時(shí)間和發(fā)育特征，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均采用相同的操作方法。25日齡之前每天取樣，26～50日齡每隔2天取樣一次，50日齡之后每隔5天取樣一次，每次均隨機(jī)取樣30尾。在NikonE200顯微鏡和OlympusSZX7解剖鏡下觀察雜交斑早期的形態(tài)發(fā)育，并拍照。

1.4數(shù)據(jù)處理

雜交斑胚胎和仔稚幼魚(yú)的可量性狀數(shù)據(jù)均用Image-Proexpress5.1 軟件采集分析，所得數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±SD)表示。

2　結(jié)果

2.1胚胎發(fā)育

云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交受精卵呈透明的球形(圖版 Ⅰ-1)，油球明顯，卵徑為(0.861±0.012)mm，油球徑為(0.210±0.008)mm，在水溫(22±1)℃、鹽度33的海水中孵化，經(jīng)過(guò)35h23min完成整個(gè)胚胎發(fā)育過(guò)程，早期胚胎發(fā)育各個(gè)階段的形態(tài)如圖版Ⅰ所示。胚胎發(fā)育可分為卵裂期、囊胚期、原腸期、神經(jīng)胚期和器官形成期，胚胎發(fā)育時(shí)序如表1所示。

表1　云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交子代受精卵胚胎發(fā)育過(guò)程時(shí)序

續(xù)表1

注：受精卵孵化溫度(22±1)℃，鹽度33。

Note：Hatchingtemperatureandsalinitywere(22±1)℃and33respectively.

2.1.1卵裂期

云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交受精卵卵裂方式屬于盤狀卵裂，受精后32min可見(jiàn)胚盤隆起(圖版Ⅰ-2)；受精后1h1min開(kāi)始第一次卵裂，此時(shí)受精卵一分為二，產(chǎn)生2個(gè)對(duì)等的細(xì)胞，進(jìn)入2細(xì)胞期(圖版Ⅰ-3)；受精后1h35min，受精卵進(jìn)行第二次分裂，進(jìn)入4細(xì)胞期(圖版Ⅰ-4)；受精后2h5min開(kāi)始第三次分裂，進(jìn)入8細(xì)胞期(圖版Ⅰ-5)；受精后2h43min開(kāi)始第四次分裂，進(jìn)入16細(xì)胞期(圖版Ⅰ-6)；而后隨著細(xì)胞的等分裂，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，經(jīng)32細(xì)胞期(圖版Ⅰ-7)、64細(xì)胞期，此時(shí)分裂的細(xì)胞大小不等，排列不規(guī)則(圖版Ⅰ-8)和多細(xì)胞期(圖版Ⅰ-9)，受精4h38min后進(jìn)入桑葚期(圖版Ⅰ-10)，此時(shí)的細(xì)胞體積變得更小，細(xì)胞間界限不明顯，整個(gè)細(xì)胞團(tuán)呈圓形。

2.1.2囊胚期

隨著細(xì)胞分裂的進(jìn)行，細(xì)胞的層數(shù)和數(shù)量不斷增加，此時(shí)在胚盤與卵黃之間形成囊胚腔，囊胚中部呈高帽狀突起，胚胎開(kāi)始進(jìn)入高囊胚期(圖版Ⅰ-11)；受精后6h30min，囊胚隆起開(kāi)始變低，細(xì)胞逐漸下包，胚胎發(fā)育進(jìn)入低囊胚期(圖版Ⅰ-12)。

2.1.3原腸胚期

隨著細(xì)胞分裂的進(jìn)行，胚胎動(dòng)物極細(xì)胞向植物極遷移和下包，受精后9h33min，胚層下包卵黃的四分之一，此時(shí)通過(guò)側(cè)面觀察可見(jiàn)一個(gè)新月形的胚盾，胚胎發(fā)育進(jìn)入原腸初期(圖版Ⅰ-13)；受精后12h53min，胚層下包卵黃的二分之一，胚環(huán)位于胚胎中間位置，胚胎發(fā)育進(jìn)入原腸中期(圖版Ⅰ-14)；受精后14h40min，胚層下包卵黃的四分之三，胚胎發(fā)育進(jìn)入原腸末期(圖版Ⅰ-15)。

2.1.4神經(jīng)胚期

原腸期結(jié)束后，隨著細(xì)胞分裂的進(jìn)行，開(kāi)始進(jìn)入神經(jīng)胚期，受精后15h45min，胚體形成神經(jīng)板，其中央可見(jiàn)圓柱形脊索，胚體雛形，開(kāi)始進(jìn)入胚體形成期(圖版Ⅰ-16)；隨后胚環(huán)逐漸下包收縮成小圓孔(即胚孔)，受精后17h40min，胚層下包整個(gè)胚胎，胚孔閉合，此時(shí)胚胎發(fā)育進(jìn)入胚孔封閉期(圖版Ⅰ-17)。

2.1.5器官形成期

受精后18h47min，在胚體頭部的前兩側(cè)分化出眼原基，形成視囊，胚體進(jìn)入視囊形成期(圖版Ⅰ-18)；受精后21h15min，脊索兩側(cè)出現(xiàn)肌節(jié)原基，胚體進(jìn)入肌節(jié)出現(xiàn)期(圖版Ⅰ-19)；受精后22h18min，胚體肌節(jié)變多，在視囊后方兩側(cè)出現(xiàn)1對(duì)聽(tīng)囊，胚體進(jìn)入聽(tīng)囊形成期(圖版Ⅰ-20)；受精后24h55min，胚體的視囊之間出現(xiàn)腦泡，呈橢圓形板狀，此時(shí)的腦泡尚未分室，胚體進(jìn)入腦泡形成期(圖版Ⅰ-21)；受精后27h10min，胚體逐漸形成鰭?cǎi)?，尾部逐漸與卵黃囊分離，胚體發(fā)育至尾芽期(圖版Ⅰ-22)；受精后28h45min，此時(shí)視囊內(nèi)可見(jiàn)折光性強(qiáng)的透明狀晶體，胚體抽動(dòng)明顯，胚體發(fā)育進(jìn)入晶體形成期(圖版Ⅰ-23)；受精后30h5min，可見(jiàn)胚體心臟開(kāi)始跳動(dòng)，胚體進(jìn)入心臟跳動(dòng)期(圖版Ⅰ-24)；受精后31h20min，仔魚(yú)孵化時(shí)胚體的頭部先破膜伸出，尾部仍在膜內(nèi)劇烈擺動(dòng)(圖版Ⅰ-25)。受精后32h06min，大部分的仔魚(yú)孵出，仔魚(yú)浮于水面，無(wú)游泳能力(圖版Ⅰ-26)。

2.2雜交受精卵胚胎發(fā)育孵化率及畸形

云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交受精卵呈透明的球形，油球明顯，卵徑為(0.861±0.012)mm，油球徑為(0.210±0.008)mm。云紋石斑魚(yú)的卵子和鞍帶石斑魚(yú)的精子具有較好的配子相容性，可受精產(chǎn)生正常發(fā)育的雜交子代。雜交組合的孵化率為91.5%，略低于對(duì)照組的93.1%，影響雜交受精卵孵化率的是在胚胎發(fā)育的卵裂期和囊胚期(圖版Ⅰ-27)。雜交組合的畸形率為10.5%，也較云紋石斑魚(yú)(♀)×云紋石斑魚(yú)(♂)的受精卵高(畸形率5.3%)，畸形主要分布在仔魚(yú)出膜前后：(1)仔魚(yú)在卵膜中就已經(jīng)是畸形造成不能正常出膜(圖版Ⅰ-28)；(2)仔魚(yú)出膜之后出現(xiàn)畸形不能正常發(fā)育(圖版Ⅰ-29)。

2.3仔稚幼魚(yú)形態(tài)發(fā)育

2.3.1前期仔魚(yú)

仔魚(yú)初孵至卵黃囊消失為前期仔魚(yú)階段。

初孵仔魚(yú)：仔魚(yú)浮于水面，無(wú)游泳能力，卵黃囊呈橢圓形，鰭?cǎi)奁鹱灶^部后方，繞過(guò)尾部，終止于肛門后部，仔魚(yú)脊索細(xì)長(zhǎng)，身體透明，初孵仔魚(yú)全長(zhǎng)：(2.215±0.091)mm(圖版Ⅰ-26)。

1日齡仔魚(yú)：卵黃囊較前一天明顯收縮(圖版Ⅱ-1)。

2日齡仔魚(yú)：卵黃囊即將消失，油球明顯，仔魚(yú)口裂形成，但未攝食，仍為內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)階段(圖版Ⅱ-2)。

3日齡仔魚(yú)：眼部黑色素增加，視覺(jué)形成。魚(yú)體出現(xiàn)2處黑色素沉積，一處在消化道中央上方位置，另一處在肛門與尾端之間，胸鰭呈葉狀，游泳能力較之前明顯增強(qiáng)，仔魚(yú)口裂明顯，消化道中還未見(jiàn)生物餌料(圖版Ⅱ-3)。

2.3.2后期仔魚(yú)

卵黃囊消失至第二背鰭棘和腹鰭棘達(dá)到仔稚魚(yú)階段的最大值。

4日齡仔魚(yú)：消化系統(tǒng)的發(fā)育更加完善，腹部的黑色素幾乎包圍整個(gè)消化道，仔魚(yú)已攝食，消化道中可見(jiàn)生物餌料，腹鰭棘開(kāi)始出現(xiàn)，胸鰭進(jìn)一步生長(zhǎng)、呈透明的扇形，仔魚(yú)開(kāi)始有集群行為(圖版Ⅱ-4)。

7日齡仔魚(yú)：腹鰭棘明顯，背鰭棘原基開(kāi)始出現(xiàn)，鰓蓋骨明顯，胸鰭更加發(fā)達(dá)，活力更強(qiáng)，仔魚(yú)游動(dòng)速度加快，集群在池邊和池角活動(dòng)(圖版Ⅱ-5)。

10日齡仔魚(yú)：魚(yú)體肌節(jié)呈“V”型，第二背鰭棘已明顯可見(jiàn)，第二背鰭棘末端開(kāi)始出現(xiàn)少量的黑色素，腹鰭棘進(jìn)一步增長(zhǎng)，腹鰭棘比第二背鰭棘長(zhǎng)，尾部鰭膜開(kāi)始出現(xiàn)黑色的鰭條絲(圖版Ⅱ-6)。

15日齡仔魚(yú)：第一背鰭棘出現(xiàn)，第二背鰭生長(zhǎng)迅速，長(zhǎng)度開(kāi)始超過(guò)腹鰭棘，長(zhǎng)棘仍呈鋸齒狀，尾柄中部的黑色素減少，尾椎開(kāi)始向上彎曲，尾鰭呈輻射狀扇形，肌節(jié)呈“W”型(圖版Ⅱ-7)。

27日齡仔魚(yú)：仔魚(yú)各鰭基本形成，尾鰭已由圓形轉(zhuǎn)變?yōu)榻匦挝?，尾椎骨出現(xiàn)黑色素，第二背鰭棘和腹鰭棘長(zhǎng)度達(dá)到仔稚魚(yú)階段的最大值，第二背鰭棘長(zhǎng)度超過(guò)體長(zhǎng)的一半，此后第二背鰭棘和腹鰭棘開(kāi)始收縮(圖版Ⅱ-8)。

2.3.3稚魚(yú)期

第二背鰭棘和腹鰭棘開(kāi)始收縮至稚幼魚(yú)階段的最小值，鱗片和體色開(kāi)始出現(xiàn)。

30日齡稚魚(yú)：第二背鰭棘和腹鰭棘收縮明顯，鰭棘上面的小刺開(kāi)始收回，鰭棘末端的黑色素消失，臀鰭明顯，眼睛后緣出現(xiàn)黑色素群(圖版Ⅱ-9)。

38日齡稚魚(yú)：尾椎骨上的黑色素明顯，第二背鰭棘和腹鰭棘較之前已明顯收縮，但是第二背鰭棘的長(zhǎng)度仍是鰭棘中最長(zhǎng)的，鱗片在背鰭基部的兩側(cè)以及身體的背面開(kāi)始出現(xiàn)(圖版Ⅱ-10)。

2.3.4幼魚(yú)期

體色與成魚(yú)相似，全身覆蓋鱗片。

46日齡幼魚(yú)：幼魚(yú)各鰭的形態(tài)與成魚(yú)相似，幼魚(yú)條帶和體色明顯，全身覆蓋鱗片，第二背鰭棘和腹鰭棘收縮到稚幼魚(yú)階段最小值之后又開(kāi)始生長(zhǎng)(圖版Ⅱ-11)。

3　討論

3.1雜交子代與其親本胚胎發(fā)育的比較

云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交受精卵的胚胎發(fā)育，與其親本具有共同的特性，同時(shí)也存在差異：雜交受精卵的卵徑為(0.861±0.012)mm，大于鞍帶石斑魚(yú)受精卵的0.790～0.850mm[15]，與對(duì)照組云紋石斑魚(yú)的受精卵接近；在相同孵化條件下，雜交受精卵與云紋石斑魚(yú)受精卵兩者所經(jīng)歷的各個(gè)時(shí)期及各時(shí)期的形態(tài)特征無(wú)明顯差別，但是仔魚(yú)初孵的時(shí)間比對(duì)照組(云紋石斑魚(yú)♀×云紋石斑魚(yú)♂)快1h；雜交受精卵的胚胎發(fā)育的大部分時(shí)期都晚于其父本鞍帶石斑魚(yú)的胚胎發(fā)育，但是初孵仔魚(yú)全長(zhǎng)(2.215±0.091)mm與云紋石斑魚(yú)仔魚(yú)全長(zhǎng)接近，較鞍帶石斑魚(yú)仔魚(yú)長(zhǎng)(1.660±0.060)mm[2]。3.2雜交子代與其親本仔稚幼魚(yú)生長(zhǎng)的比較

在石斑魚(yú)早期發(fā)育階段的劃分中，大多數(shù)學(xué)者將背鰭棘、腹鰭棘和軟鰭鰭條的發(fā)育程度作為各個(gè)階段劃分的標(biāo)準(zhǔn)。鄒記興等[16]將點(diǎn)帶石斑魚(yú)仔魚(yú)的腹、背鰭棘開(kāi)始收縮，鱗片長(zhǎng)出前為后期仔魚(yú)結(jié)束的標(biāo)志。張海發(fā)等[17]將斜帶石斑魚(yú)各鰭基本形成、腹鰭棘和第二背鰭棘開(kāi)始收縮以及鰭棘上小刺數(shù)目急劇減少、鱗片開(kāi)始長(zhǎng)出作為仔、稚魚(yú)分界點(diǎn)，將腹鰭棘和第二背鰭棘絕對(duì)長(zhǎng)度收縮到稚幼魚(yú)階段的最小值作為進(jìn)入幼魚(yú)階段的標(biāo)志。郭仁湘等[18]將鞍帶石斑魚(yú)各鰭基本形成作為進(jìn)入稚魚(yú)期的標(biāo)志。綜合以上學(xué)者的劃分標(biāo)準(zhǔn)，可以將本研究27日齡作為結(jié)束后期仔魚(yú)期進(jìn)入稚魚(yú)期的時(shí)間，46日齡進(jìn)入幼魚(yú)階段。通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)雜交子代具有其父本生長(zhǎng)速度快的優(yōu)勢(shì)，雜交斑27日齡時(shí)第二背鰭棘和腹鰭棘長(zhǎng)度達(dá)到最大值，各鰭已基本上發(fā)育完成，發(fā)育到稚魚(yú)階段的時(shí)間要晚于鞍帶石斑魚(yú)的22日齡(水溫27～30℃)[18]，但是進(jìn)入稚、幼魚(yú)階段要明顯早于云紋石斑魚(yú)的31日齡和66日齡[水溫(23±1)℃][19]。

3.3親本組合的可行性

云紋石斑魚(yú)和鞍帶石斑魚(yú)為同屬不同種，染色體數(shù)目2n=48[20-21]，這具備了雜交的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。本研究屬于種間的遠(yuǎn)緣雜交，該雜交組合的母本云紋石斑魚(yú)與父本鞍帶石斑魚(yú)能產(chǎn)生正常分裂的受精卵，并能夠發(fā)育到幼魚(yú)階段。雜交組合的孵化率為91.5%，略低于對(duì)照組的93.1%，影響雜交受精卵孵化率的時(shí)期主要是在卵裂期和囊胚期，但是雜交受精卵在神經(jīng)胚期和器官形成期一般都能正常發(fā)育，造成這一現(xiàn)象的原因還有待進(jìn)一步研究。雜交受精卵的畸形率為10.5%，要高于對(duì)照組的5.3%，畸形發(fā)生主要分布在仔魚(yú)出膜前后：(1)仔魚(yú)在卵膜中就已經(jīng)是畸形造成不能正常出膜；(2)仔魚(yú)出膜之后出現(xiàn)畸形不能正常發(fā)育。楊求華等[14]對(duì)云紋石斑魚(yú)與赤點(diǎn)石斑魚(yú)雜交的研究也表明，雜交受精卵的孵化率較云紋石斑魚(yú)與赤點(diǎn)石斑魚(yú)低，畸形率也高于對(duì)照組。

目前，對(duì)云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交育種的研究還未見(jiàn)報(bào)道，對(duì)雜交子代各方面特性了解還不夠充分，有關(guān)雜交子代的低溫耐受性、抗病力等方面是否優(yōu)于親本，還需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)。雜交子代有生長(zhǎng)發(fā)育速度較快的雜種優(yōu)勢(shì)，也有其不同于親本的發(fā)育特點(diǎn)。本文探討云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)雜交子代胚胎發(fā)育和仔、稚幼魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育，為雜交石斑魚(yú)的魚(yú)苗培育和人工養(yǎng)殖提供了科學(xué)參考。

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1.受精卵；2.胎盤隆起；3.2細(xì)胞期；4.4細(xì)胞期；5.8細(xì)胞期；6.16細(xì)胞期；7.32細(xì)胞期；8.64細(xì)胞期；9.多細(xì)胞期；10.桑葚期；11.高囊胚期；12.低囊胚期；13.原腸初期；14.原腸中期；15.原腸末期；16.胚體形成期；17.胚孔封閉期；18.視囊形成期；19.肌節(jié)出現(xiàn)期；20.聽(tīng)囊形成期；21.腦泡形成期；22.尾芽期；23.晶體形成期；24.心臟跳動(dòng)期；25.孵化期；26.初孵仔魚(yú)；27.死亡的囊胚期胚胎；28.畸形仔魚(yú)；29.未能出膜的仔魚(yú)。

1.Fertilizedegg；2.Blastodiscformation；3.2-cellstage；4.4-cellstage；5.8-cellstage；6.16-cellstage；7.32-cellstage；8.64-cellstage；9.Multi-cellstage；10.Morulastage；11.Highblastulastage；12.Lowblastulastage；13.Earlygastrulastage；14.Middlegastrulastage；15.Lategastrulastage；16.Embryobodystage；17.Closureofblastoporestage；18.Opticcapsulestage；19.Muscleburlstage；20.Otocyststage；21.Brainvesiclestage；22.Tail-budstage；23.Crystalstage；24.Heart-beatingstage；25.Hatchingstage；26.Newlyhatchedlarvae；27.Embryostoppedatblastulastage；28.Abnormallarvae；29.Deformedembryo.

1.1d仔魚(yú)；2.2d仔魚(yú)；3.3d仔魚(yú)；4.4d仔魚(yú)；5.7d仔魚(yú)；6.10d仔魚(yú)；7.15d仔魚(yú)；8.27d仔魚(yú)；9.30d稚魚(yú)；10.38d稚魚(yú)；11.46d幼魚(yú)。

1.Larva1dafterhatching(DAH)；2.2DAH；3.3DAH；4.4DAH；5.7DAH；6.10DAH.7.15DAH；8.27DAH；9.30djuvenile；10.38djuvenile；11.46dyoungfish.

Embryonic and morphological development in larva，juvenile，and young stages of hybrid grouper (Epinephelus moara ♀×E.lanceolatus ♂)

WU Shuiqing1，ZHENG Leyun1*，HUANG Zhongchi1，QIU Denggao1，XU Chaohui1，ZHENG Junpiao2，QIU Fengyan2，WU Jingling1，LIU Yinhua1

(1.KeyLaboratoryofCultivationandHigh-valueUtilizationofMarineOrganismsinFujianProvince，F(xiàn)isheriesResearchInstituteofFujian，Xiamen361013，China2.XiamenXiaoDengAquaticScienceandTechnologyCo.，Ltd.，Xiamen361013，China)

Hybridizationisthemostwidelyusedandeffectivemethodofartificialbreedinginaquaculture.Wedocumentedembryonicdevelopmentandthegrowthandmorphologicalcharacteristicsoflarva，juveniles，andyoungfishinthehybrid(Epinephelus moara ♀× E.lanceolatus ♂)byartificialmethods.Theembryonicdevelopmentofthehybridwasdividedintocleavagestage，blastulastage，gastrulastage，neurulastage，andorganogenesisstage.Inseawater[(22±1)℃，salinity33，pH7.8]，35h23minwasrequiredforhybridembryonicdevelopment.Incleavagestage，blastulastage，beforeandafterthelarvae，thehybridhadhighermortality.Statisticsshowedthathybridhatchingratewas91.5%lowerthancontrolgroup(93.1%)，deformityratewas10.5%higherthancontrolgroup(5.3%).Basedonthefeaturesoftheyolksac，seconddorsalfinspine，pelvicfinspine，scalesandbodycolor，thepost-embryonicdevelopmentofthehybridwasdividedintolarval(0～27d)，juvenile(28～45d)，andyoungfishstages(46d).TheresultssuggestedthatthehybridgrowsmorerapidlythanE.moara.

Epinephelus moara；E.lanceolatus；hybrid；embryonicdevelopment；morphologicalobservation

2015-12-30

廈門南方海洋研究中心項(xiàng)目(14PZY017NF17).

吳水清(1987-)，男，實(shí)習(xí)研究員，碩士，主要從事海水魚(yú)類繁育生物學(xué).E-mail：wushuiqing@163.com

鄭樂(lè)云(1969-)，男，教授級(jí)高級(jí)工程師，主要從事海水魚(yú)類繁養(yǎng)殖及育種.E-mail：lyzheng69@sina.com

S961.5

A

1006-5601(2016)01-0027-09