王　蔥，李生兵（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院內(nèi)分泌科，重慶400010）

·論著·

2型糖尿病合并冠心病患者血漿CTRP9水平和胰島素抵抗的相關(guān)性研究*

王蔥，李生兵（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院內(nèi)分泌科，重慶400010）

目的檢測2型糖尿?。═2DM）合并冠心病（CHD）患者血漿C1q/腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9（CTRP9）水平，探討CTRP9與胰島素抵抗的關(guān)系。方法選取2014年1月至2015年8月該院收治的單純T2DM患者39例（T2DM組）、T2DM合并CHD患者32例（T2DM+CHD組）、單純CHD患者36例（CHD組）、健康體檢者40例（HC組），均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法測定空腹血漿CTRP9水平，分析血漿CTRP9水平與體質(zhì)量指數(shù)（BMI）、腰臀比（WHR）、收縮壓（SBP）、胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）、胰島β細(xì)胞分泌指數(shù)（HOMA-β）、三酰甘油（TG）等指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果T2DM組、CHD組血漿 CTRP9水平［分別為（128.24±12.77）、（116.73±10.36）ng/mL］顯著低于HC組［（176.31±21.57）ng/mL］，T2DM+ CHD組血漿CTRP9水平［（89.91±9.01）ng/mL］顯著低于CHD組和T2DM組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。血漿CTRP9水平與BMI、WHR、SBP、空腹血糖、餐后2小時血糖、糖化血紅蛋白、空腹胰島素、餐后2小時胰島素、HOMA-IR和TG呈負(fù)相關(guān)（r=-0.541、-0.212、-0.234、-0.308、-0.361、-0.377、-0.282、-0.247、-0.492、-0.329，P＜0.01），與高密度脂蛋白膽固醇和HOMA-β呈正相關(guān)（r=0.323、0.415，P＜0.01），而與年齡、性別無關(guān)（r=0.046、0.103，P＞0.05）。HOMA-IR和BMI是血漿CTRP9水平的獨立影響因素（P＜0.05）。結(jié)論T2DM合并CHD患者血漿CTRP9水平顯著降低，且與胰島素抵抗密切相關(guān)。

補體系統(tǒng)蛋白質(zhì)類；腫瘤壞死因子類；胰島素抗藥性；糖尿病，2型；冠心病

近年來，隨著我國經(jīng)濟的快速發(fā)展，2型糖尿?。═2DM）合并心血管疾病的患病率和因心血管疾病死亡的風(fēng)險均逐年增加，然而其病因和發(fā)病機制尚未完全闡明。C1q/腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9（CTRP9）是新近發(fā)現(xiàn)的脂肪細(xì)胞因子，主要在人類脂肪組織中表達［1］。動物實驗證明，CTRP9具有正性調(diào)節(jié)作用，能降低血糖水平，改善糖脂代謝紊亂，穩(wěn)定動脈粥樣硬化斑塊，具有抗炎、保護心肌、舒張血管和改善內(nèi)皮功能等多種生物學(xué)效應(yīng)［2-4］。既往有研究顯示，CTRP9在單純T2DM患者或冠心?。–HD）患者循環(huán)血中的水平降低［5-6］。目前對CTRP9的認(rèn)識主要集中于基礎(chǔ)研究，缺乏進一步的臨床研究。為探討T2DM合并CHD患者血漿CTRP9水平及其與胰島素抵抗（IR）的關(guān)系，本研究通過采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法檢測健康者、單純CHD患者、單純T2DM患者及T2DM合并CHD患者血漿CTRP9水平，并評價其與IR的關(guān)系，為T2DM的臨床研究提供理論依據(jù)。

1　資料與方法

1.1資料

1.1.1一般資料選取本院2014年1月至2015年8月收治的T2DM患者71例，另選取心內(nèi)科住院的CHD患者36例及門診年齡和性別相匹配的健康體檢者40例，共147例。所有受試對象共分為四組：健康對照組（HC組）40例，其中男21例，女19例，平均年齡（55.26±7.10）歲；單純T2DM組（T2DM組）39例，其中男23例，女16例，平均年齡（53.11±9.09）歲；單純CHD組（CHD組）36例，其中男21例，女l5例，平均年齡（56.19±5.25）歲；T2DM合并CHD組（T2DM+CHD組）32例，其中男19例，女13例，平均年齡（57.21±8.33）歲。

1.1.2納入標(biāo)準(zhǔn)（1）年齡40～75歲；（2）T2DM均符合WHO（1999）糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)；（3）CHD以經(jīng)冠狀動脈造影檢查提示單支以上血管狹窄大于50%為診斷標(biāo)準(zhǔn)；（4）HC組和CHD組均經(jīng)75 g口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）證實為正常糖耐量者。HC組無心絞痛病史，心電圖、動態(tài)心電圖檢查正常。

1.1.3排除標(biāo)準(zhǔn)（1）T2DM組排除1型糖尿病，繼發(fā)性肥胖，糖尿病急、慢性并發(fā)癥，原發(fā)性高血壓，周圍動脈硬化，正在服用降糖、降脂、降壓藥及使用胰島素治療的患者。T2DM組及HC組排除心臟病變。HC組及CHD組經(jīng)OGTT證實無糖調(diào)節(jié)受損及糖尿病。（2）各組受試對象均排除其他原因所致的高血糖，急、慢性炎癥性疾病，肝、腎疾病，嚴(yán)重腦血管意外，惡性腫瘤，甲狀腺功能亢進，痛風(fēng)及垂體疾病等內(nèi)分泌疾病及妊娠、哺乳期婦女。

1.2方法

1.2.1資料采集由專人測量身高、體質(zhì)量、腰圍、臀圍、血壓等，并按體質(zhì)量指數(shù)（BMI）=體質(zhì)量（kg）/身高2（m2）、腰臀比（WHR）=腰圍/臀圍公式計算BMI和WHR。

1.2.2血漿相關(guān)生化指標(biāo)和CTRP9水平測定所有受試對象在未攝入任何熱量8 h后，采集清晨空腹靜脈血、口服75 g無水葡萄糖后2 h再次采集靜脈血，分別為5 mL，測定空腹血糖（FPG）、餐后2小時血糖（2hPG）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、空腹胰島素（FINS）、餐后2小時胰島素（PINS）、血脂等。血漿葡萄糖測定采用葡萄糖氧化酶法；血漿胰島素測定采用放射免疫法（中國原子能科學(xué)研究院藥盒）；HbA1c測定采用高效液相色譜法（美國Bio-Rad藥盒）；血脂測定采用酶法（浙江東甌生物工程有限公司藥盒）。穩(wěn)態(tài)模型評估胰島素抵抗指數(shù)［HOMAIR=FPG（mmol/L）×FINS（mU/L）/22.5］及胰島β細(xì)胞分泌指數(shù)｛HOMA-β=20×FINS（mU/L）/［FPG（mmol/L）-3.5］｝。血漿CTRP9水平測定采用ELISA法（試劑為Adipobioscience公司產(chǎn)品），批內(nèi)變異系數(shù)（CV）＜8%；批間CV＜4%。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以±s表示，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)取自然對數(shù)分析。多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗；采用直線相關(guān)及多元逐步回歸分析CTRP9水平與其他指標(biāo)的關(guān)系。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)　果

2.1各組一般資料及生化指標(biāo)檢測結(jié)果比較各組受試對象性別及年齡匹配；四組受試對象總膽固醇（TC）和三酰甘油（TG）比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。與HC組比較，T2DM組的WHR、HbA1c、FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）均升高，而HOMA-β降低；CHD組收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、LDL-C均升高，而高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）降低；T2DM+CHD組BMI、WHR、SBP、DBP、FPG、HbA1c、2hPG、FINS、HOMA-IR、LDL-C均升高，而HOMA-β、HDL-C降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與CHD組比較，T2DM組HbA1c、FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR均升高，而HOMA-β降低；T2DM+CHD組HbA1c、FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR均升高，而HOMA-β降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與T2DM組比較，T2DM+CHD組BMI、SBP、DBP均升高，而HDL-C降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2各組血漿CTRP9水平比較

2.2.1不同性別患者血漿CTRP9水平比較男性患者血漿CTRP9水平為（111.54±9.18）ng/mL，女性為（127.25± 11.01）ng/mL，不同性別患者CTRP9水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.149）。各組不同性別患者CTRP9水平比較，差異也無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.114）。

2.2.2各組血漿CTRP9水平比較CHD組、T2DM組、T2DM+CHD組患者血漿CTRP9水平均顯著低于HC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （P=0.028、0.030、0.013）。而T2DM組患者血漿CTRP9水平與CHD組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.100）；與CHD組比較，T2DM+CHD組患者血漿CTRP9水平顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P= 0.015）。

2.3T2DM+CHD組血漿CTRP9水平與糖脂代謝及胰島β細(xì)胞功能各參數(shù)的相關(guān)性雙變量相關(guān)分析提示，血漿CTRP9水平與BMI、WHR、SBP、FPG、2hPG、HbA1c、FINS、PINS、HOMA-IR和TG呈負(fù)相關(guān)（r=-0.541、-0.212、-0.234、-0.308、-0.361、-0.377、-0.282、-0.247、-0.492、-0.329，P＜0.01），與HDL-C和HOMA-β呈正相關(guān)（r=0.323、0.415，P＜0.01），而與年齡、性別無關(guān)（r=0.046、0.103，P＞0.05）。見表2。以血漿CTRP9水平為因變量，BMI、WHR、SBP、DBP、FPG、2hPG、HbA1c、FINS、PINS、HOMA-IR、HOMA-β、TG、TC、HDL-C及LDL-C為自變量進行多元逐步回歸分析結(jié)果顯示，HOMA-IR［回歸系數(shù)（β）=-0.521，P=0.001］和BMI（β=-0.350，P=0.019）是血漿CTRP9水平的獨立影響因素。

表1　各組一般資料及生化指標(biāo)檢測結(jié)果比較

表2　血漿CTRP9水平與糖脂代謝及胰島β細(xì)胞功能各參數(shù)的相關(guān)性

3　討　論

CTRP9是新近發(fā)現(xiàn)的具有多種生理功能的脂肪細(xì)胞因子，是與脂聯(lián)素結(jié)構(gòu)最接近的旁系同源蛋白，與脂聯(lián)素具有相似的代謝調(diào)節(jié)功能［7］。CTRP9最早于2009年由Wong等［7］發(fā)現(xiàn)，是由333個氨基酸組成的分泌型糖蛋白，主要在人類和鼠的脂肪組織中表達。細(xì)胞實驗發(fā)現(xiàn)，CTRP9能減少炎癥因子的表達［8］。動物實驗發(fā)現(xiàn)，db/ db糖尿病小鼠血漿CTRP9水平顯著降低，但補充外源性CTRP9后，其血糖水平降低，胰島素水平升高［2］；另有研究發(fā)現(xiàn)，CTRP9能降低載脂蛋白Apoe-/-小鼠冠狀動脈粥樣硬化斑塊中的炎癥因子水平，進而增加斑塊的穩(wěn)定性［8］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，單純CHD患者和單純初診T2DM患者血漿CTRP9水平均顯著降低，且與血糖水平呈負(fù)相關(guān)［5-6］。這些研究均表明，CTRP9可能參與了糖尿病、CHD的發(fā)生和發(fā)展。但目前CTRP9在糖尿病合并CHD患者血漿中的表達如何，以及是否與其胰島素敏感性相關(guān)鮮有報道。

本研究以健康者、單純T2DM、單純CHD及T2DM合并CHD患者為研究對象，探討CTRP9在T2DM合并CHD患者血循環(huán)中的表達及其與IR的關(guān)系，結(jié)果顯示，與HC組比較，單純T2DM患者血漿CTRP9水平明顯降低，單純CHD患者血漿CTRP9水平也明顯下降，但T2DM組患者血漿CTRP9水平與CHD組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。劉云濤等［5］和Wang等［6］也得出相似的結(jié)論。Kambara等［3］研究發(fā)現(xiàn)，采用高脂、高糖飼料喂養(yǎng)誘導(dǎo)的肥胖小鼠和db/db糖尿病小鼠血漿CTRP9水平顯著降低。Su等［2］研究也顯示，用高脂飼料喂養(yǎng)8周的小鼠，其血漿CTRP9水平顯著降低。另外，有研究構(gòu)建了小鼠心肌缺血/再灌注模型，通過檢測其脂肪組織和血漿CTRP9水平，發(fā)現(xiàn)其均下降，而給予CTRP9基因治療后，能縮小再灌注后心肌梗死面積［9］。因此，本研究與其他臨床研究或動物實驗均表明，CTRP9水平降低可能參與了T2DM、冠狀動脈粥樣硬化病變的發(fā)生與發(fā)展，其或許可以作為鑒別T2DM合并CHD患者遠期心血管意外事件發(fā)生的新血清學(xué)標(biāo)志物。其次，本研究發(fā)現(xiàn)，T2DM合并CHD患者血漿CTRP9水平較單純T2DM或單純CHD患者進一步下降；相關(guān)分析顯示，血漿CTRP9水平與BMI、WHR、SBP、FPG、2hPG、HbA1c、FINS、PINS和HOMA-IR呈負(fù)相關(guān)，與HOMA-β呈正相關(guān)，而與年齡、性別無關(guān)。這些結(jié)果均提示，CTRP9可能通過增加胰島素敏感性、抗炎及調(diào)節(jié)糖脂代謝紊亂等機制介導(dǎo)T2DM動脈粥樣硬化的發(fā)生及發(fā)展過程。而且動物實驗已證實，CTRP9具有降低血糖、減輕高胰島素血癥、減輕體質(zhì)量、降低肝臟脂質(zhì)堆積、保護心肌缺血再灌注損傷、舒張血管和改善內(nèi)皮功能等多種生物學(xué)功能［2-3，10］。

糖尿病合并CHD的發(fā)病機制復(fù)雜、眾多，迄今仍未完全闡明。其中IR作為糖尿病和CHD的共同發(fā)病基礎(chǔ)已經(jīng)得到廣泛的認(rèn)識。已有研究表明，IR可導(dǎo)致高胰島素血癥，進而一方面通過增強氧化應(yīng)激反應(yīng)引起血管內(nèi)皮受損；另一方面通過介導(dǎo)脂質(zhì)代謝途徑誘導(dǎo)動脈粥樣硬化的發(fā)生。這些研究表明，IR可能導(dǎo)致T2DM合并動脈粥樣硬化的發(fā)生。本研究相關(guān)分析顯示，血漿CTRP9水平與HOMA-IR呈負(fù)相關(guān)，而與HOMA-β呈正相關(guān)；多元線性逐步回歸分析也提示，HOMA-IR是CTRP9的獨立相關(guān)因素，表明CTRP9可能參與了T2DM和CHD的共同發(fā)病機制——IR。劉云濤等［5］對肥胖及T2DM患者的研究也發(fā)現(xiàn)，HOMA-IR與CTRP9呈正相關(guān)，且是CTRP9的獨立影響因素。新近動物實驗結(jié)果顯示，敲除小鼠的CTRP9基因，可使外周組織產(chǎn)生IR，增加空腹胰島素水平及損害肝臟的胰島素信號通路［11］。因此，本研究及動物實驗均表明，CTRP9與IR關(guān)系密切，提示CTRP9水平下降可能導(dǎo)致外周組織中胰島素刺激的葡萄糖攝取和蛋白激酶磷酸化減弱，進一步導(dǎo)致IR的發(fā)生。因此推測，CTRP9可能具有改善外周組織的胰島素敏感性，進而抑制T2DM及其心血管并發(fā)癥發(fā)生、發(fā)展的作用，但其在T2DM合并CHD中的具體作用機制和分子生物學(xué)靶點尚需進一步研究。

綜上所述，本研究結(jié)果表明，T2DM和CHD患者血漿CTRP9水平顯著降低，T2DM合并CHD患者血漿CTRP9水平進一步降低，并可能與高血糖、高血脂、肥胖、IR密切相關(guān)。因此，作者認(rèn)為，CTRP9可能是一種與胰島素敏感性有關(guān)的脂肪細(xì)胞因子，但在T2DM合并CHD患者中的具體作用機制，尚需進一步研究。

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本刊編輯部

Study on correlation between plasma CTRP9 level with insulin resistance in patients with type 2 diabetes mellitus complicating coronary heart disease*

Wang Cong，Li Shengbing（Department of Endocrinology，Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University，Chongqing 400010，China）

ObjectiveTo detect plasma C1q/tumor necrosis factor related protein 9（CTRP9）level in the patients with type 2 diabetes mellitus（T2DM）complicating coronary heart disease（CHD）and to investigate its relation with insulin resistance. Methods39 cases of pure T2DM（T2DM group），36 cases of pure CHD（CHD group），32 cases of T2DM complicating CHD （T2DM+CHD group）and 40 individuals undergoing the healthy physical examination（HC group）were selected.Fasting plasma CTRP9 level was determined by ELISA.Meanwhile，the relationship between plasma CTRP9 level with the body mass index （BMI），waist-hip ratio（WHR），systolic blood pressure（SBP），homeostasis model assessment of insulin resistance（HOMA-IR），HOMA-β and TG was analyzed.ResultsThe levels of plasma CTRP9 were significantly decreased in the T2DM group and CHD groupthan those in the HCgroup［（128.24±12.77）ng/mLvs.（176.31±21.57）ng/mL，（116.73±10.36）ng/mLvs.（176.31±21.57）ng/mL，P＜0.05］.Compared with CHD group and T2DM group，the level of plasma CTRP9 in the T2DM+CHD group was significantly decreased，the differences were statistically significant［（116.73±10.36）ng/mL，（128.24±12.77）ng/mL vs.（89.91±9.01）ng/mL，P＜0.05］. The plasma CTRP9 level was negatively correlated with BMI，WHR，SBP，F(xiàn)PG，2hPG，HbA1c，F(xiàn)INS，PINS，HOMA-IR and TG （r=-0.541，-0.212，-0.234，-0.308，-0.361，-0.377，-0.282，-0.247，-0.492，-0.329，P＜0.01），and positively correlated with HDL-C and HOMA-β（r=0.323，0.415，P＜0.01）.But there were no correlation between the plasma CTRP9 with age and sex（r=0.046、0.103，P＞0.05）.HOMA-IR and BMI were independent influence factors of plasma CTRP9 level（P＜0.05）.ConclusionPlasma CTRP9 level in the patients with T2DM complicating CHD is significantly decreased and closely related with insulin resistance.

Complement system proteins；Tumor necrosis factors；Insulin resistance；Diabetes mellitus，type 2；Coronary disease

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.01.001

A

1009-5519（2016）01-0001-04

國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金資助項目（81501199）。

王蔥（1985-），博士研究生，主要從事糖尿病及其并發(fā)癥的研究。

（2015-11-12）