王慶麗，宋成偉，盧穎，趙慧穎

(1吉林大學第四醫(yī)院一汽總醫(yī)院,長春130011;2吉林大學第一醫(yī)院)

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血清內(nèi)臟脂肪素、脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白對冠狀動脈粥樣硬化程度的評估價值

王慶麗1，宋成偉1，盧穎1，趙慧穎2

(1吉林大學第四醫(yī)院一汽總醫(yī)院,長春130011;2吉林大學第一醫(yī)院)

目的探討血清內(nèi)臟脂肪素(visfatin)、脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)對評估冠狀動脈粥樣硬化(CAS)程度的臨床價值。方法 選擇88例疑似冠心病者，其中66例經(jīng)冠狀動脈造影術(shù)證實為冠心病，并根據(jù)Gensini積分系統(tǒng)分為輕度AS組、中度AS組和重度AS組；另外22例作為正常對照組。ELISA法測定各組血清visfatin、A-FABP、IL-6。應(yīng)用多元線性逐步回歸分析各指標與CAS之間的關(guān)系，ROC曲線下面積評估各指標的診斷價值。結(jié)果隨CAS程度的加重，血清visfatin、A-FABP、IL-6水平逐漸升高(P均<0.05)；評估CAS嚴重程度的價值大小依次為visfatin、IL-6、A-FABP；血清visfatin、A-FABP、IL-6最佳診斷分界點分別為54.98 ng/mL、19.92 ng/mL、98.57 pg/mL。visfatin評估CAS特異性最高，而A-FABP的靈敏度最高。 結(jié)論 血清visfatin、A-FABP有望成為預(yù)測CAS嚴重程度的參考指標;與A-FABP和IL-6相比，visfatin預(yù)測CAS嚴重程度的作用更大。

動脈粥樣硬化；內(nèi)臟脂肪素；脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白；白細胞介素6

心臟和血管外周有豐富的脂肪組織，由內(nèi)臟脂肪組織分泌的具有活性的脂肪因子在維持心血管穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮了重要作用[1, 2]。血清內(nèi)臟脂肪素(visfatin)、脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)是近年新被發(fā)現(xiàn)的脂肪因子[3, 4]，它們以自分泌或旁分泌的方式介導(dǎo)炎性反應(yīng),并與內(nèi)皮細胞功能障礙、心臟功能紊亂等相關(guān)，進而參與動脈粥樣硬化(AS)的發(fā)生發(fā)展過程，使穩(wěn)定性斑塊向易損性斑塊轉(zhuǎn)化，進一步加重冠狀動脈粥樣硬化(CAS)[5～7]。visfatin作為促炎因子，可誘導(dǎo)多種炎癥因子表達, 如TNF-α、IL-6等，尤以IL-6為著，進一步促進了AS的發(fā)生發(fā)展。A-FABP作為調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的重要介質(zhì)，其傳導(dǎo)信號同c-Jun氨基末端激酶、IκB蛋白激酶、蛋白激酶R等炎癥信號傳導(dǎo)通路一致。通過以上多種途徑，A-FABP的抑制劑或基因缺陷能夠抑制IL-6的表達。動物實驗和臨床調(diào)查數(shù)據(jù)表明，visfatin、A-FABP可作為判斷心血管疾病預(yù)后生物學標志物，并有望成為AS的治療靶點，但更確切的生物學功能及治療靶向仍需進一步研究。目前已有大量研究文獻證實，IL-6水平與心肌缺血、CAS的嚴重程度及斑塊易損性等心血管疾病明顯相關(guān)，是CAS病變程度的重要預(yù)測指標。2011年8～12月，本研究比較了不同程度CAS患者visfatin、A-FABP、IL-6水平，并探討了其相關(guān)性，為探尋CAS防治的新靶點提供參考。

1　資料與方法

1.1臨床資料選擇經(jīng)冠狀動脈造影術(shù)(CAG)證實的CHD患者66例(CHD組)，男46例、女20例，年齡(55.7±9.0)歲；CAG證實冠脈正常者22例(正常對照組),男13例、女9例，年齡(51.8±7.7)歲。排除急、慢性感染，心、肝、腎等臟器疾病及既往行冠脈介入治療者。采用Gensini積分[8]系統(tǒng)評估冠脈病變嚴重程度，將CHD分為3個亞組[9,10]，分別是輕度AS組(23例)、中度AS組(21例)、重度AS組(22例)。

1.2血清中visfatin、A-FABP、IL-6水平檢測采用ELISA法。受試對象均在入院次日清晨留取空腹靜脈血4 mL，即時分離血清(3 000 r/min，10 min)，-80 ℃超低溫冰箱保存待測。檢測試劑盒由美國R&D公司提供。

1.3生化指標檢測應(yīng)用生化自動分析儀(日本日立7600-210)檢測各生化指標。

2　結(jié)果

2.1各組血清visfatin、A-FABP、IL-6水平比較見表1。

表1　各組血清visfatin、A-FABP、IL-6水平比較

注：與正常對照組比較，▲P<0.05 ；與輕度 AS組比較，#P<0.05；與中度 AS組比較，*P<0.05。

2.2血清visfatin、A-FABP、IL-6水平與CAS嚴重程度的關(guān)系因Gensini積分為非正態(tài)分布資料，故作對數(shù)轉(zhuǎn)換后作為因變量(Y)，引進判別標準為P≤0.05，剔除判別標準為P≥0.1。結(jié)果提示：F=24.94，P<0.001，有統(tǒng)計學意義，即回歸方程(包括常量)有意義，故回歸方程Log(Y)=0.4+0.007Xvisfatin+0.010XA-FABP+0.002XIL-6成立。評估CHD嚴重程度的價值大小依次為visfatin、IL-6、A-FABP,見表2。

表2　Gensini積分與血清visfatin、A-FABP、IL-6的多元線性回歸分析

2.3血清visfatin、A-FABP、IL-6對CAS的診斷價值血清visfatin、A-FABP、IL-6評估CAS的ROC曲線下面積(一般記為Az)分別為0.90(95%CI0.83～0.96)、0.83(95%CI0.71～0.95)、0.85(95%CI0.75～0.95)；與參考線(0.5)相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。血清visfatin、A-FABP、IL-6最佳診斷分界點(即截斷點)分別為54.98 ng/mL、19.92 ng/mL、98.57 pg/mL。

2.4血清visfatin、A-FABP、IL-6診斷CAS的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值(PV+)、陰性預(yù)測值(PV-)88例受試對象中，血清visfatin水平大于截斷點(visfatin>54.98 ng/mL)作為標準時，診斷為CHD患者47例，與CAG證實的一致，占CAG診斷66例CHD中的71.2%，即采用血清visfatin評估CAS的靈敏度為71.2%(47/66)。而當血清visfatin水平小于截斷點時(visfatin<54.98 ng/mL)，診斷認為正常者41例，其中22例與CAG證實為正常者一致，占CAG診斷正常者22例的100.0%(22/22)，即血清visfatin評估CAS的特異度為100.0%(22/22)，PV+為100%(47/47)，PV-為53.7%(22/41)。當以A-FABP大于截斷點(A-FABP>19.92 ng/mL)為標準時，血清A-FABP評估CAS的靈敏度為93.9%(62/66)。當A-FABP小于截斷點(A-FABP<19.92 ng/mL)時，血清A-FABP評估CAS的特異度為68.2%(15/22)。PV+=89.9%(62/69)， PV-=78.9%(15/19)。當以IL-6大于截斷點(IL-6>98.57 pg/mL)為標準時，血清IL-6評估CAS的靈敏度為84.8%(56/66)。當IL-6小于截斷點(IL-6<98.57 pg/mL)時，血清IL-6評估CAS的特異度為77.3%(17/22)。PV+=91.8%(56/61)， PV-=63.0%(17/27)。三種指標評估CAS的靈敏度、特異度的比較顯示visfatin的特異性最高，而A-FABP的靈敏度最高。

3　討論

近年研究發(fā)現(xiàn)，除高血壓、糖尿病、高血脂、吸煙等傳統(tǒng)危險因素外，肥胖成為CHD的又一獨立危險因素[11,12]。脂肪組織分泌的脂肪因子廣泛參與到脂質(zhì)代謝，增強胰島素敏感性，調(diào)節(jié)血壓、能量平衡、血管生成等病理生理過程[1, 13]，可能成為潛在的藥物治療方案，具有廣闊的發(fā)展前景。

visfatin是近年新發(fā)現(xiàn)的脂肪因子，可通過參與炎癥反應(yīng)、糖脂代謝調(diào)節(jié)等途徑參與到AS的進程中[5, 14]。既往研究發(fā)現(xiàn)，visfatin在CHD不穩(wěn)定斑塊中作為炎性介質(zhì)富集于泡沫細胞及巨噬細胞中，可能在斑塊易損性中發(fā)揮作用[6]。Fukuhara等[15]證實，visfatin可通過AKT、ERK1/2、AMPK等途徑激活下游蛋白激酶，進一步誘導(dǎo)血管再生，成為斑塊易損的重要原因。此外，人單核細胞分泌的visfatin能夠誘導(dǎo)TNF-α和IL-6表達，進一步促進AS的形成與發(fā)展[16]。A-FABP是脂質(zhì)結(jié)合蛋白超家族中的一種，在哺乳動物的心、肝、小腸、腦、骨骼肌等多種細胞中廣泛存在。近幾年在A-FABP基因缺陷小鼠為動物模型研究中發(fā)現(xiàn)，載脂蛋白E缺陷(APOE-/-)標記的小鼠AS形成減少，對AS起保護作用，證明A-FABP可促進AS的形成[17]。另外，在AS模型中應(yīng)用A-FABP抑制劑BMS309403可抑制巨噬細胞向泡沫細胞轉(zhuǎn)化、減少MCP-1、IL-6等多種炎性物質(zhì)的結(jié)合位點、減少脂質(zhì)沉積[18]。研究表明，脂肪因子visfatin和A-FABP通過多種調(diào)節(jié)機制參與AS的形成與發(fā)展進程。本研究通過對不同程度CAS患者血清中visfatin、 A-FABP、 IL-6水平檢測發(fā)現(xiàn)，隨CAS程度加重，血清visfatin、A-FABP、IL-6水平逐級遞增，這與其他學者的研究結(jié)果一致。但以往研究并未闡明visfatin、A-FABP評價CAS的價值大小。因此，本研究以IL-6作為參考進行病例對照分析研究發(fā)現(xiàn)，與A-FABP相比，visfatin評價CAS嚴重程度的價值更大。

綜上得出visfatin預(yù)測CAS嚴重程度的作用更大；血清visfatin、A-FABP、IL-6有望成為預(yù)測CAS嚴重程度的參考指標。因此抑制visfatin、A-FABP有望成為治療CHD的新靶向。

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趙慧穎(E-mail:zhaohuiying163@163.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.17.014

R541.4

B

1002-266X(2016)17-0041-03

2015-11-30)