代龍文，胡義強，陳英，胡昌森

（九江市廬山區(qū)人民醫(yī)院，江西 九江332005）

·檢驗與臨床·

中性粒細(xì)胞CD64在慢性前列腺炎診斷中的臨床研究

代龍文，胡義強，陳英，胡昌森

（九江市廬山區(qū)人民醫(yī)院，江西 九江332005）

目的 研究中性粒細(xì)胞CD64在慢性前列腺炎診斷中的臨床價值。方法 選取76例患者作為疾病組，另取健康體檢者58例為對照組，流式細(xì)胞術(shù)檢測前列腺液中中性粒細(xì)胞CD64表達水平，同時使用PCR檢測沙眼衣原體（CT）和解脲脲原體（UU），并行前列腺液培養(yǎng)及顯微鏡鏡檢。結(jié)果 細(xì)菌性感染標(biāo)本中的中性粒細(xì)胞CD64表達水平均比正常組顯著升高，感染細(xì)菌中以模仿葡萄球菌和耳葡萄球菌陽性標(biāo)本CD64表達水平最高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.05）。結(jié)論 中性粒細(xì)胞CD64表達水平可作為慢性前列腺炎細(xì)菌感染的診斷及判斷病情的高效及時檢測指標(biāo)，優(yōu)于細(xì)菌培養(yǎng)；常規(guī)PCR僅可用于診斷CT及UU型慢性前列腺炎，對細(xì)菌型慢性前列腺炎無診斷價值。

CD64；慢性前列腺炎；中性粒細(xì)胞；流式細(xì)胞術(shù)

慢性前列腺炎是男性最常見的泌尿生殖系統(tǒng)疾病，困擾著全世界25%～50%的成年男性［1，2］。慢性細(xì)菌性前列腺炎主要為病原體感染，以逆行感染為主，病原體主要為葡萄球菌屬，其次為大腸埃希菌、棒狀桿菌屬及腸球菌屬等，常有反復(fù)的尿路感染發(fā)作病史或前列腺按摩液中持續(xù)有致病菌存在［3，4］。臨床表現(xiàn)有反復(fù)發(fā)作的下尿路感染癥狀，如尿頻、尿急、尿痛、排尿燒灼感等，持續(xù)時間超過3個月。其實驗室檢查主要有前列腺按摩液常規(guī)檢查、尿常規(guī)分析及尿沉渣檢查、細(xì)菌學(xué)檢查和其他病原體包括沙眼衣原體（CT）和解脲脲原體（UU）等檢查［5］。但目前慢性前列腺炎臨床診斷仍較為困難［6］，而及時快速診斷和準(zhǔn)確用藥是治療慢性前列腺炎成功的關(guān)鍵。本研究目的在于探究中性粒細(xì)胞CD64對于慢性前列腺炎的臨床診斷價值，從而為臨床及時診斷提供依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料選取對象為2015年2月至2016 年1月間我院泌尿外科確診為慢性前列腺炎患者76例，平均46.26±11.19歲；另選取本院健康體檢者58例，均行前列腺按摩檢查排除前列腺炎癥。

1.2儀器與試劑 Beckman Coulter FC-500流式細(xì)胞儀及配套試劑由美國Beckman Coulter公司提供；PCR全自動基因擴增儀由達安基因公司提供；Combas 601化學(xué)發(fā)光儀由羅氏公司提供；PhoenixTM-100全自動細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)及配套試劑由美國BD公司提供。

1.3方法前列腺液標(biāo)本采用“二杯法”留取，并由加蓋的無菌管收集，及時送檢。

1.3.1前列腺液培養(yǎng)依據(jù)全國檢驗標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，取采集的前列腺液進行接種培養(yǎng)，24h后觀察菌落并進行鑒定。

1.3.2前列腺液CD64檢測取兩支流式專用試管每支試管分別加入CD64-FITC和同型對照10μl，再分別加入50μl前列腺液，混勻避光保存15min后，加紅細(xì)胞裂解液500μl，避光10min，洗滌，加入500μl PBS，靜置10min后置于流式細(xì)胞儀，檢測并計算出中性粒細(xì)胞CD64表達水平。

1.4CT、UU檢測采用PCR方法，按說明書進行檢測。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法使用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件，計量資料中呈正態(tài)分布則以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，非正態(tài)分布資料以中位數(shù)表示，先行正態(tài)分布性檢驗，正態(tài)分布資料兩組間比較用t檢驗；非正態(tài)分布資料兩組間比較用U檢驗；非參數(shù)檢驗采用卡方檢驗，以P＜0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1標(biāo)本病原體結(jié)果分布情況76例標(biāo)本中檢出細(xì)菌性感染 62例，占 81.57%；UU 10例，占13.16%；CT 4例，占5.26%。細(xì)菌感染主要以表皮葡萄球菌、糞腸球菌、模仿葡萄球菌為主，對照組標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)均為陰性，見表1。

2.2慢性前列腺炎患者前列腺液中性粒細(xì)胞CD64表達情況分析細(xì)菌性感染者，發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞CD64表達量與正常對照之間的差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義 （t=5.169，P＜0.01），而CT和UU感染者CD64表達量與對照組之間無明顯差異，無統(tǒng)計學(xué)意義。此外研究還發(fā)現(xiàn)模仿葡萄球菌和耳葡萄球菌感染患者中性粒細(xì)胞CD64表達水平最高，其次為溶血葡萄球菌、糞腸球菌，最低為表皮葡萄球菌和人葡萄球菌人型亞種，見表2。

表1　前列腺液中病原體培養(yǎng)及PCR結(jié)果

表2　兩組中性粒細(xì)胞CD64表達水平（個/細(xì)胞±s）比較

表2　兩組中性粒細(xì)胞CD64表達水平（個/細(xì)胞±s）比較

組別感染組病原菌　CD64表達水平模仿葡萄球菌溶血葡萄球菌華納葡萄球菌表皮葡萄球菌糞腸球菌耳葡萄球菌人葡萄球菌人型亞種人葡萄球菌頭部葡萄球菌解脲種木糖葡萄球菌沙眼衣原體解脲脲原體對照組3923.25±452.2 1896.32±325.35 1965.54±236.65 1236.35±256.66 1736.55±235.55 3865.2±125.63 1263.35±224.32 1102.12±12.360 1203.21 1232.25±16.32 896.21±136.54 906.24±122.23 856.35±128.62

3　討論

前列腺炎是泌尿科的常見疾病，同時也是前列腺增生、前列腺癌等疾病誘發(fā)因素，其臨床癥狀多變時間久，病程復(fù)雜。臨床上往往較難診斷，進而耽誤治療時間，導(dǎo)致病情進一步惡化。因此，及時診斷成為治療成功的關(guān)鍵［7］。以往我們通過鏡檢及細(xì)菌培養(yǎng)等方式來進行判斷，而這些方法都不是診斷其的“金指標(biāo)”，這些方法存在人為因素較大、時間較長等不利因素，由此尋找一種快速、準(zhǔn)確、可行的方法顯得尤為重要［8］。

CD64是跨膜糖蛋白，屬免疫球蛋白超家族成員，可通過抗體依賴性細(xì)胞毒作用、細(xì)胞吞噬作用和免疫復(fù)合物清除作用實現(xiàn)對病原微生物的清除［9，10］。正常情況下，CD64主要分布于巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞等抗原遞呈細(xì)胞（APC）表面，中性粒細(xì)胞表面CD64呈低水平表達，甚至幾乎不表達，且表達無性別差異［11，12］。當(dāng)機體感染或內(nèi)毒素入侵時大量致炎細(xì)胞因子釋放，中性粒細(xì)胞激活，CD64在干擾素和中性粒細(xì)胞集落刺激因子刺激下大量表達［13，14］。一般情況下，機體感染或內(nèi)毒素入侵時CD64在刺激后4～6h即可升高［15］。中性粒細(xì)胞CD64檢測的標(biāo)本通常為外周血標(biāo)本，而本研究選用前列腺液作為檢測對象，利用流式細(xì)胞儀分析CD64的表達水平與細(xì)菌培養(yǎng)及PCR檢測結(jié)果相比較。分析發(fā)現(xiàn)細(xì)菌性感染標(biāo)本中的中性粒細(xì)胞CD64表達水平，均比正常組顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。76例標(biāo)本其中檢出細(xì)菌性感染62例占81.57%、UU 10例占13.16%、CT4例占5.26%。主要以表皮葡萄球菌、糞腸球菌、模仿葡萄球菌為主，感染細(xì)菌中以模仿葡萄球菌和耳葡萄球菌陽性標(biāo)本CD64表達水平最高，這與Qian L等［16］文獻報道的CD64表達水平一致。CT、UU檢測陽性的標(biāo)本CD64表達水平與對照組無明顯差異，無統(tǒng)計學(xué)意義。由此可知，中性粒細(xì)胞CD64表達水平與細(xì)菌感染有相關(guān)性，慢性前列腺炎患者中性粒細(xì)胞CD64表達水平的高低，能夠及時有效的提示細(xì)菌感染。能夠作為判斷慢性前列腺炎患者細(xì)菌感染的輔助指標(biāo)，但由于研究條件所限，收集病例不多，目前還不了解感染的嚴(yán)重程度與CD64表達水平高低的關(guān)系，還需進一步研究。

綜上所述，定量檢測患者前列腺液中的中性粒細(xì)胞CD64表達水平，可作為慢性前列腺炎細(xì)菌感染的及時診斷及治療的可靠檢測指標(biāo)，優(yōu)于常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)等檢查。

［1］Magistro G，Wagenlehner FM，Grabe M，et al.Contemporary Management of Chronic Prostatitis/Chronic Pelvic Pain Syndrome［J］. European Urology，2016，69（2）：286-297.

［2］米華，陳凱，莫曾南.中國慢性前列腺炎的流行病學(xué)特征［J］.中華男科學(xué)雜志，2012，18（7）：579-582.

［3］張一沙，吳穎，孫愛華.研究456例慢性前列腺炎患者前列腺液病原體分布及其耐藥性 ［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011，21（6）：1394-1397.

［4］劉浩，耿春惠，黃永祥，等.育齡期慢性前列腺炎患者精液病原體分布與耐藥分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014（8）：1871-1873.

［5］謝紅林，趙旭東，葉純?nèi)A.前列腺炎患者生殖支原體感染檢測的臨床評價［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（18）：4450-4451.

［6］Tijl V，Charles VP，F(xiàn)ilip P，et al.Diagnostic accuracy of urinary prostate protein glycosylation profiling in prostatitis diagnosis［J］. Biochemia Medica，2015，25（3）：439-449.

［7］Videcnik ZJ，Maticic M，Jeverica S，et al.Diagnosis and treatment of bacterial prostatitis［J］.Acta Dermatovenerol Alp Pannonica Adriat，2015，24（2）：25-29.

［8］Gujadhur R，Aning J.Careful assessment key in managing prostatitis［J］.Practitioner，2015，259（1781）：15-19.

［9］Li S，Huang X，Chen Z，et al.Neutrophil CD64 expression as a biomarker in the early diagnosis of bacterial infection：a metaanalysis［J］.Int J Infect Dis，2013，17（1）：e12-e23.

［10］陳雪禮，李觀華，湯金萍，等.CD64、CRP、WBC以及中性粒細(xì)胞百分比在感染性疾病中的診斷價值探討 ［J］.實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2013（6）：590-591.

［11］Yang AP，Liu J，Yue LH，et al.Neutrophil CD64 combined with PCT，CRP and WBC improves the sensitivity for the early diagnosis of neonatal sepsis［J］.Clin Chem Lab Med，2016，54（2）：345-351.

［12］Wiwanitkit V.Neutrophil CD64 level［J］.Geriatr Gerontol Int，2016，16（3）：401.

［13］郝猛，李觀華，梅錦，等.中性粒細(xì)胞CD64的檢測在感染性疾病中的臨床診斷意義［J］.實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2015（5）：627-629.

［14］Xu N，Chen J，Chang X，et al.nCD64 index as a prognostic biomarker for mortality in acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease［J］.Ann Saudi Med，2016，36（1）：37-41.

［15］Xiao W，Li ZY，Ling Z，et al.Neutrophil CD64 expression as a diagnostic marker for sepsis in adult patients：A meta-analysis［J］. Critical Care，2015，19（1）：1-9.

［16］Qian L，Li SB，Yan Z，et al.Determination of CD64 for the Diagnosis of Bacterial Chronic Prostatitis［J］.Am J Reprod Immunol，2015，74（4）：309-312.

R697.33，R446.62

A

1674-1129（2016）04-0485-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.04.023

江西省九江市科技支撐計劃項目，編號：20154416

（2016-03-09；

2016-04-26）