陳肖華（CHEN Xiao-hua），劉 衛(wèi)（LIU Wei），蔣連強（JIANG Lian-qiang），凌宙貴（LING Zhou-gui）（廣西醫(yī)科大學第四附屬醫(yī)院，廣西柳州 545005）（Fourth Affiliated Hospital，Guangxi Medical University，Liuzhou 545005，China）

某院主要革蘭陰性菌分布及耐藥性5年動態(tài)變化

陳肖華（CHEN Xiao-hua），劉 衛(wèi)（LIU Wei），蔣連強（JIANG Lian-qiang），凌宙貴（LING Zhou-gui）
（廣西醫(yī)科大學第四附屬醫(yī)院，廣西柳州 545005）
（Fourth Affiliated Hospital，Guangxi Medical University，Liuzhou 545005，China）

目的 了解常見革蘭陰性（G—）菌菌群分布及耐藥性變化，為臨床合理使用抗菌藥物提供可靠依據(jù)。方法 采用回顧性調(diào)查方法，分析某院2009—2013年臨床標本分離的主要G—菌及其耐藥性。結(jié)果 臨床分離的主要G—菌數(shù)由2009年的1 189株增加至2013年的2 364株，常見居前4位的G—菌依次為大腸埃希菌3 331株（37.38%）、肺炎克雷伯菌1 623株（18.22%）、銅綠假單胞菌1 566株（17.58%）、鮑曼不動桿菌1 057株（11.86%）。2009—2013年產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）大腸埃希菌檢出率分別為47.84%（144/301）、56.90% （301/529）、59.49%（395/664）、55.05%（469/852）、52.49%（517/985）；產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌檢出率分別為35.68%（76/213）、41.00%（139/339）、36.75%（122/332）、41.78%（155/371）、36.96%（136/368）。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌耐藥率較高，對大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率＞50%；產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦較敏感。銅綠假單胞菌對氨基糖苷類、喹諾酮類、頭孢吡肟、頭孢他啶、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦保持較強的抗菌活性，耐藥率＜20%；鮑曼不動桿菌對喹諾酮類、氨基糖苷類、頭孢吡肟耐藥率均＞40%，5年間耐藥趨勢變化不大。結(jié)論 該院G—桿菌耐藥性強且多重耐藥，必須加強合理使用抗菌藥物，預防感染。

病原菌；抗藥性，微生物；耐藥性；抗菌藥物

近年，隨著抗菌藥物的廣泛及不合理應用，細菌耐藥率不斷升高，且細菌對抗菌藥物的耐藥性地區(qū)差異大。本研究對某院5年分離的革蘭陰性（G—）菌分布及其耐藥性進行回顧性動態(tài)分析，為指導臨床合理應用抗菌藥物提供可靠依據(jù)。

1　對象與方法

1.1對象 收集2009年1月—2013年12月某院臨床送檢的各類標本，按常規(guī)方法培養(yǎng)分離。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603、銅綠假單胞菌ATCC27853。

1.2方法 對菌株進行鑒定，同時進行藥物敏感性測定，藥敏檢測方法為微量稀釋法測定最低抑菌濃度（MIC），受檢細菌的菌液濃度為0.5麥氏單位，結(jié)果參照美國臨床實驗室標準化協(xié)會（CLSI）標準對抗菌藥物進行耐藥（R）、中介（I）或敏感（S）判讀。采用復合紙片法檢測是否產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）。測試抑菌環(huán)直徑，對高度懷疑產(chǎn)ESBLs的菌株進行確認試驗。比較頭孢他啶、頭孢噻肟在有/無克拉維酸時，對待測菌的抑菌效果，兩種藥物中任何一種含酶抑制劑藥物的抑菌環(huán)與其單藥的抑菌環(huán)相比≥5 mm，即判定為ESBLs陽性。

1.3主要儀器和試劑 美國德靈（DADE BEH-RING）公司的MicroScanAutoScan-40半自動微生物鑒定儀和藥敏系統(tǒng)，以及配套Negative Combo Panel Type21（NC21測試板）和Positive Combo Pane Type11（PC11）。

1.4數(shù)據(jù)分析 原始數(shù)據(jù)應用世界衛(wèi)生組織（WHO）細菌耐藥性檢測網(wǎng)提供的WHONET5.0軟件以及SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗和線性趨勢χ2檢驗，P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1主要G—菌檢出情況 共檢出G—菌8 910株，2009—2013年檢出的G—菌依次為1 189、1 547、1 701、2 109及2 364株。居前4位的G—菌依次為大腸埃希菌3 331株（37.38%）、肺炎克雷伯菌1 623株（18.22%）、銅綠假單胞菌1 566株（17.58%）、鮑曼不動桿菌1 057株（11.86%）。2009—2013年大腸埃希菌在G—菌中所占比例，呈逐年上升趨勢（χ2=91.615，P＜0.001）；2009—2013年銅綠假單胞菌在G—菌中所占比例，呈下降趨勢（χ2=42.517，P＜0.001）。見表1。

表1　2009—2013年某院G—菌分布情況（株數(shù)，%）

2.2主要G—菌耐藥情況

2.2.1大腸埃希菌 2009—2013年臨床分離的大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs菌檢出率依次為47.84% （144/301）、56.90%（301/529）、59.49%（395/664）、55.05%（469/852）、52.49%（517/985）。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌耐藥率均高于非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌；產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率＞50%，對亞阿培南高度敏感，耐藥率為0。各年度產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、左氧氟沙星、阿米卡星、妥布霉素、復方磺胺甲口惡唑耐藥率比較，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05），對其余抗菌藥物的耐藥率變化差異均無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟、氨曲南、阿米卡星、亞胺培南的耐藥率均＜10%。各年度非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對亞胺培南、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、妥布霉素、復方磺胺甲口惡唑、頭孢吡肟的耐藥率比較，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。見表2。

2.2.2肺炎克雷伯菌 2009—2013年產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌檢出率依次為35.68%（76/213）、41.00%（139/339）、36.75%（122/332）、41.78%（155/371）、36.96%（136/368）。2013年產(chǎn)ESBLs菌對亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦較敏感，耐藥率均＜10%。5年間產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、頭孢他啶、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、妥布霉素、復方磺胺甲口惡唑和阿米卡星的耐藥率比較，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。非產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌株對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟、亞胺培南和阿米卡星較敏感，耐藥率均＜10%。見表3。

2.2.3銅綠假單胞菌及鮑曼不動桿菌 銅綠假單胞菌對氨基糖苷類、喹諾酮類、頭孢吡肟、頭孢他啶、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦保持較強的抗菌活性，耐藥率均＜20%。5年間銅綠假單胞菌對氨基糖苷類、頭孢他啶、亞胺培南、環(huán)丙沙星的耐藥率比較，差異無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05），對哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率呈逐年下降趨勢（P＜0.001）。5年中鮑曼不動桿菌對亞胺培南的耐藥率有統(tǒng)計學意義，呈逐年上升趨勢（χ2=221.888，P＜0.001）。2009—2013年鮑曼不動桿菌對喹諾酮類、氨基糖苷類、頭孢吡肟耐藥率均＞40%，耐藥趨勢變化不大（均P＞0.05）；對頭孢他啶的耐藥率呈上升趨勢（均P＜0.05）。詳見表4。

表2　2009—2013年某院大腸埃希菌耐藥率（%）

表3　2009—2013年某院肺炎克雷伯菌耐藥率（%）

表4　2009—2013年某院銅綠假單胞菌及鮑曼不動桿菌耐藥率（%）

3　討論

連續(xù)5年該院常見G—菌為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌及鮑曼不動桿菌，與文獻［1—2］報道的最常見G—菌相同，次序略有不同。臨床分離的主要G—菌由2009年的1 189株增加至2013年的2 364株，2009—2013年大腸埃希菌在G—菌中所占比例，呈逐年上升趨勢（P＜0.001）。

2009—2013年1 826株產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌藥敏試驗結(jié)果顯示，其對左氧氟沙星、環(huán)丙沙星的活性較差，耐藥率＞50%，對加酶抑制劑復方制劑、碳青霉烯類、阿米卡星等耐藥率較低（＜15%），對亞胺培南高度敏感。非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對多數(shù)抗菌藥物敏感，但對左氧氟沙星、環(huán)丙沙星的耐藥率＞28%，可能與近年該院臨床廣泛應用或濫用喹諾酮類藥物有關(guān)。除碳青霉烯類、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復合物、阿米卡星外，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對其他藥物敏感率相對較低，尤其對頭孢菌素、氟喹諾酮類藥物的耐藥率較高，因此，臨床需按藥敏結(jié)果慎重選藥，建議產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌不宜選用頭孢菌素、氟喹諾酮類藥物。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌總檢出率分別為54.82%（1 826/3 331）、38.69%（628/1 623），略低于文獻報道［3—4］。銅綠假單胞菌耐藥機制較多，其多重耐藥性已成為患者反復感染及醫(yī)院感染的常見原因之一。2009—2013年銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥率為7.02%～11.40%，較2011年衛(wèi)生部細菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)的耐藥率（24.8%）低［5］。2009—2013年銅綠假單胞菌對哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率呈逐年下降趨勢（P＜0.001）；對大多數(shù)抗菌藥耐藥率＜20%，低于文獻報道［6—8］，這可能與不同地區(qū)、不同醫(yī)院對抗菌藥物的限制使用有關(guān)。由于銅綠假單胞菌對氨芐西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉維酸、第一/二代頭孢菌素、頭孢噻肟、頭孢曲松、萘啶酸、甲氧嘧啶等具天然耐藥性，藥物敏感試驗的報告中已剔除了以上天然耐藥的藥物。鮑曼不動桿菌對抗菌藥物耐藥性普遍較高，對左氧氟沙星、妥布霉素、頭孢他啶、頭孢吡肟、慶大霉素、氨芐西林/舒巴坦、環(huán)丙沙星、復方磺胺甲口惡唑的耐藥率＞45%；對亞胺培南抗菌藥物的耐藥率上升至51.23%，超過2011年全國細菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)發(fā)布的耐藥率（49.50%）［5］，給臨床感染治療帶來巨大困難。因此，臨床需要關(guān)注常見G—菌耐藥性，合理應用抗菌藥物。

［1］ 王輝，侯萬樂，龔志偉.醫(yī)院感染革蘭陰性桿菌的分布及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2010，20（3）：414—416.

［2］ 魯艷.醫(yī)院感染革蘭陰性桿菌的分布及耐藥性調(diào)查分析［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2012，22（2）：383—385.

［3］ 李德保，任冬梅，田春梅.2008—2010年某院臨床主要病原菌分布及耐藥性變遷［J］.中國感染控制雜志，2013，12（1）：54—58.

［4］ 楊啟文，王輝，徐英春，等.2009年中國13家教學醫(yī)院院內(nèi)感染病原菌的抗生素耐藥性監(jiān)測［J］.中華檢驗醫(yī)學雜志，2011，34（5）：422—430.

［5］ 薛峰，呂媛.衛(wèi)生部全國細菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)2011年度非ICU住院感染患者細菌耐藥監(jiān)測［J］.中國臨床藥理學雜志，2012，28 （12）：910—915.

［6］ 孫迪迪，張亞琴，楊雪華.647株醫(yī)院感染病原菌分布及耐藥性分析［J］.中國感染控制雜志，2008，7（2）：132—174.

［7］ 李露池，沈暉.某三級綜合醫(yī)院多重耐藥菌臨床分布［J］.中國感染控制雜志，2014，13（4）：242—245.

［8］ 沈萍，魏澤慶，陳云波，等.Mohnarin 2011年度報告：非ICU住院患者細菌耐藥性監(jiān)測［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2012，22 （24）：5477—5487.

（本文編輯：左雙燕）

5-year dynamic changes in distribution and antimicrobial resistance of gram-negative pathogens in a hospital

R181.3+2

B

1671—9638（2016）04—0277—04

10.3969/j.issn.1671-9638.2016.04.015

2015—06—12

廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生與計劃生育委員會科研課題（Z2014380）

陳肖華（1985—），女（漢族），廣西壯族自治區(qū)柳州市人，主治醫(yī)師，主要從事細菌耐藥性監(jiān)測及抗菌藥物合理使用研究。

陳肖華 E-mail：qinqingshuok@163.com