葉金明，吳康，叢寧，董同瑚，顏慧，孫龍生

（1.揚州市水產(chǎn)生產(chǎn)技術(shù)指導站，江蘇　揚州　225003；2.揚州大學動物科學與技術(shù)學院，江蘇　揚州　225009；3.揚州市董氏特種水產(chǎn)有限公司，江蘇　揚州　225634）

黃顙魚一年二次人工繁殖性能的比較

葉金明1，吳康2，叢寧1，董同瑚3，顏慧1，孫龍生2

（1.揚州市水產(chǎn)生產(chǎn)技術(shù)指導站，江蘇揚州225003；2.揚州大學動物科學與技術(shù)學院，江蘇揚州225009；3.揚州市董氏特種水產(chǎn)有限公司，江蘇揚州225634）

黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）是底棲小型經(jīng)濟魚類，其肉質(zhì)鮮美、肌間刺少，營養(yǎng)價值高，頗受消費者青睞，具有較高的經(jīng)濟價值。受市場消費需求的影響，黃顙魚目前已發(fā)展成為全國性的養(yǎng)殖魚類品種之一。隨著黃顙魚人工繁殖技術(shù)的突破［1-2］，全雄黃顙魚的養(yǎng)殖正逐步得到大面積推廣。目前對許多魚類人工繁殖的研究和生產(chǎn)實踐表明，即使是一些一次產(chǎn)卵類型的魚類，通過人工調(diào)控生態(tài)因子或強化培育，也能實現(xiàn)一年多次的人工繁殖［3］。盡管已有研究表明黃顙魚為多次產(chǎn)卵類型的魚類［4］，但相關(guān)報道并不多見。鑒于此，為提高全雄黃顙魚人工繁殖的效率，試驗開展了對同批雌魚一年二次人工繁殖的研究，并對二次人工繁殖之間的親魚產(chǎn)卵量、受精率、孵化率和出苗率進行了比較，旨在為黃顙魚人工繁殖提供參考數(shù)據(jù)，滿足規(guī)?；斯し敝车纳a(chǎn)要求。

1　材料與方法

1.1親魚來源

父本為超雄魚（性染色體為“YY”型），購自廣東省佛山市水產(chǎn)研究所，年齡為3冬齡，個體體質(zhì)量500 g以上，體質(zhì)健壯，無病無傷。母本從該場養(yǎng)殖的商品魚中擇優(yōu)挑選，年齡為2冬齡，個體體質(zhì)量100 g以上，體型正常、體格健壯、體表光滑、無疾病、無畸形，體色黃黑間隔明顯。

1.2親魚培育

1.2.1池塘條件池塘面積約4 700 m2，水深1.5～2.0 m，池底平坦，淤泥深少于20 cm，進排水分開，排灌方便，池塘土質(zhì)符合無公害水產(chǎn)品產(chǎn)地環(huán)境要求。水源為三洋河水，水量充足、水質(zhì)清新無污染，水質(zhì)符合漁業(yè)水質(zhì)標準。

1.2.2親魚放養(yǎng)雌雄魚分開單獨飼養(yǎng)，在催產(chǎn)前的50 d進行分池培育，放養(yǎng)密度為0.3 kg/m2，每667 m2可套養(yǎng)規(guī)格200 g/尾的白鰱100尾，親魚放養(yǎng)前用2%的食鹽+1 mg/L的高錳酸鉀浸泡消毒15 min。

1.2.3飼料投喂投喂的飼料為黃顙魚專用膨化飼料，每天晚上投喂1次，投喂地點在固定餌料臺內(nèi)，投喂量為魚體質(zhì)量的0.3%～1.0%，并根據(jù)天氣、水溫和吃食情況適時調(diào)整。

1.2.4日常管理每天早晚巡塘各1次，觀察天氣、水質(zhì)變化、親魚活動和攝食情況，發(fā)現(xiàn)問題及時解決。保持水質(zhì)清新，溶氧在4 mg/L以上，防止親魚浮頭，催產(chǎn)前的一個月每隔5～7 d換新水1次。保持池塘清潔衛(wèi)生，發(fā)現(xiàn)魚病，及時治療。

1.3試驗方法

同批親魚在同一繁殖季節(jié)進行二次人工繁殖，兩次人工繁殖催產(chǎn)的間隔時間為45 d。每次人工繁殖各催產(chǎn)3個批次，每批次催產(chǎn)雌魚4 000尾，間隔5 d催產(chǎn)1批。測定并記錄各催產(chǎn)批次的產(chǎn)卵量、受精率、孵化率和出苗率。

1.3.1人工催產(chǎn)催產(chǎn)池采用內(nèi)壁貼有瓷磚的水泥池，面積5 m2，池深0.6 m。雌魚放養(yǎng)密度為20 kg/ m2，要進行微流水和充氣增氧，溶氧保持在5 mg/L以上。催產(chǎn)池遮光避陽，周圍環(huán)境安靜。

催情激素采用促黃體素釋放激素類似物（LRH-A2）、馬來酸地歐酮（DOM）和絨毛膜促性腺激素（HCG），劑量參考羅雙玉、駱小年等的研究［5-6］，每千克魚用LRH-A2（25～40 μg）+DOM（5～9 mg）+ HCG（1 000～1 800 IU）。根據(jù)性腺發(fā)育的成熟度、水溫和肥滿度調(diào)整，用0.9%的氯化鈉溶液配制，注射量為0.5 mL/尾。分2次注射，第一次單獨注射LRH-A2總劑量的1/2，第二次注射其余的劑量，注射部位為背鰭基部，針距視溫度而定，間隔時間為10～18 h。

1.3.2擠卵授精達到預計效應時間后，解剖超雄魚，取出精巢，稱重后放入研缽中加入適量精子保存液研磨，研碎后用孔徑0.25～0.35 mm的金屬篩網(wǎng)濾去殘渣，每克精巢用50 mL的精子保存液稀釋后避光保存待用。

達到預計的效應時間后，每隔30 min檢查一次雌魚。檢查時，擠壓雌魚腹部，卵粒能順暢流出時，即可采卵。采卵時擦干雌魚體表水分，一只手抓住魚的頭部，另一只手的大拇指和食指壓住魚體腹部從前向后擠壓，將卵擠入干燥的不銹鋼碗中，注意不要有水帶入卵中。采集的卵每20 min人工授精一次，每500 g卵取稀釋后的精液5 mL，放入到200 mL濃度為0.4%的生理鹽水中，均勻攪拌1 min，再加入經(jīng)過濾后的黃泥水脫黏，然后將受精卵倒入到孵化池孵化。

1.3.3孵化管理孵化缸為水泥混凝土結(jié)構(gòu)，內(nèi)部形狀為上半部圓柱形（口徑為0.65～0.70 m，高度為0.2 m）、下半部為圓錐形。水從底部進水口進入，流量通過閥門調(diào)節(jié)，從上面溢水口溢出。微流水孵化，孵化密度為100萬～120萬粒/缸。

1.3.4卵黃苗暫養(yǎng)在水溫23～30℃時，仔魚要經(jīng)過48～70 h孵化出膜。出膜后10 h左右，用虹吸管將卵黃苗轉(zhuǎn)移至暫養(yǎng)池，暫養(yǎng)池為方形水泥池，四壁及池底貼有瓷磚，面積25 m2左右，水深0.5～0.6 m，微流水和充氣增氧，放養(yǎng)密度為10萬尾/m2。經(jīng)過2～3 d暫養(yǎng)，待卵黃囊消失，將魚苗轉(zhuǎn)入池塘培育。

1.4測定指標及統(tǒng)計分析

測定指標包括產(chǎn)卵量、受精率、孵化率、出苗率等，計算公式如下：

產(chǎn)卵量（粒）=產(chǎn)卵重量（g）×每克卵的卵粒數(shù)量

受精率（%）=受精卵/產(chǎn)卵量×100%

孵化率（%）=孵化出膜的卵黃苗數(shù)/受精卵粒數(shù)×100%

出苗率（%）=出池魚苗數(shù)/孵化出膜的卵黃苗數(shù)×100%

試驗結(jié)束后用EXCEL整理數(shù)據(jù)，采用SPSS 16.0軟件包對所得數(shù)據(jù)進行獨立樣本t檢驗（Independent-Sample T Test），顯著水平設(shè)定為P＜0.01。分析結(jié)果以平均值加減標準差表示（Means± SD）。

2　結(jié)果與分析

同批親魚一年二次人工繁殖的產(chǎn)卵量、受精率、孵化率和出苗率的試驗結(jié)果見表1。

由表1可知，第一次人工繁殖的產(chǎn)卵量雖高于第二次人工繁殖的產(chǎn)卵量，但無統(tǒng)計學意義差異，兩次人工繁殖之間的孵化率也無統(tǒng)計學意義的差異（P＞0.05）。然而第二次人工繁殖的受精率高達83.33%，比第一次人工繁殖的受精率高出15%（P＜0.01）；出苗率方面，第二人工繁殖的出苗率高達95.00%，顯著高于第一次83.33%的出苗率（P＜0.01）。

表1　黃顙魚二次人工繁殖產(chǎn)卵量、受精率、孵化率和出苗率比較

3　小結(jié)

在硬骨魚類中，環(huán)境因子與其生殖周期、排卵和產(chǎn)卵密切相關(guān)，外界因子通過外感受器把興奮或抑制傳遞到中樞神經(jīng)系統(tǒng)，進而控制腦垂體激素的分泌，刺激或抑制性腺細胞發(fā)育成熟、排卵和產(chǎn)卵［7］。研究表明，對鯉科魚類，其主要環(huán)境暗示是光周期和溫度的結(jié)合，對性腺發(fā)育和排卵的調(diào)節(jié)取決于光照持續(xù)時間、溫度高低和在性周期中的位置［8］。這在許多魚類的人工繁殖研究和生產(chǎn)實踐中也得到證實，通過親魚培育過程中環(huán)境因子的調(diào)控或強化培育，即使是典型的一次產(chǎn)卵類型的魚類，如草魚、白鰱和翹嘴鱖等，也能實現(xiàn)一年多次人工繁殖［9］。該試驗的結(jié)果表明，黃顙魚屬分批產(chǎn)卵類型的魚類，通過強化親魚培育，黃顙魚也能夠?qū)崿F(xiàn)一年二次人工繁殖，在提高親魚利用率的同時，也延長了繁殖周期。至于環(huán)境因子與黃顙魚產(chǎn)卵周期的調(diào)節(jié)關(guān)系，以及調(diào)控措施對黃顙魚人工繁殖次數(shù)的影響，還要進一步深入研究，這將有利于提升人工繁殖的效率。

魚類人工繁殖大體可分為親魚培育、人工催產(chǎn)、授精和孵化4個基本過程，除了受水溫、溶解氧、pH值和水流動等外在因子的影響外，性腺成熟度和精卵質(zhì)量等內(nèi)在因子起主導的作用［10］。通過對試驗兩次人工繁殖產(chǎn)卵量、受精率和孵化率的結(jié)果對比表明，多次人工繁殖，不會影響黃顙魚的產(chǎn)卵量、受精率和孵化率。試驗中觀察到第二次人工繁殖的卵粒大小比第一次更加均勻，卵粒之間的成熟度更加一致，且第二次人工繁殖的水溫高而穩(wěn)定，這可能是影響兩次人工繁殖受精率和出苗率的主要因素。因此，生產(chǎn)實踐中，通過親魚培育提高成熟度和精卵的質(zhì)量，提高催產(chǎn)率和受精率，還應采取適當?shù)拇胧┛刂茰囟?、溶解氧和pH值等生態(tài)因子使胚胎發(fā)育處于最佳狀態(tài)，提高孵化率和出苗率。

在合適的溫度范圍內(nèi)，通過強化黃顙魚親魚培育，對雌魚實施一年二次人工繁殖是可行的，在提高親魚利用率的同時，也延長了繁殖周期，提升了黃顙魚人工繁殖的效率和效益。

參考文獻：

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資助項目：2011年江蘇省水產(chǎn)三新工程項目（PJ2011-40）

doi:10.3969/j.issn.1004-2091.2016.08.002

收稿日期：（2016-01-14）

作者簡介：葉金明（1964-），男，研究員級高級工程師，主要從事水產(chǎn)技術(shù)推廣.E-mail：yzscyjm@126.com