李順清

(湖北省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，湖北 武漢 430000)

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主動脈夾層患者性激素水平及性激素受體的表達及意義

李順清

(湖北省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，湖北 武漢 430000)

目的觀察主動脈夾層患者體內(nèi)性激素水平及性激素受體的表達情況，探討其改變與該疾病發(fā)病的關(guān)系。方法選取主動脈夾層患者62例為實驗組，選取同期健康體檢者59例作為正常組,采用Elisa法檢測研究對象體內(nèi)雌二醇、卵泡生成激素、黃體生成激素、孕酮、睪酮、泌乳激素水平。取實驗組中10例行人工血管置換術(shù)取得胸主動脈標本者作為主動脈夾層病變血管組，同時選取10例無心血管疾病遺體捐獻者主動脈血管組織為正常動脈血管組，采用免疫組化法、qRT-PCR法檢測血管組織中性激素受體(ERα、ERβ、PR及AR)蛋白表達水平及mRNA水平。結(jié)果實驗組血清雌二醇水平及雌雄激素的比值明顯低于正常組(P均<0.05)，催乳激素明顯高于正常組(P<0.05)，2組睪酮、卵泡生成激素、黃體生成激素水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；主動脈夾層病變血管組血管組織中ERα、ERβ、PR、AR蛋白及mRNA水平均明顯低于正常動脈血管組(P均<0.05)。結(jié)論主動脈夾層患者體內(nèi)雌激素水平較正常人群下降，且血管中性激素受體表達下降，提示性激素參與了主動脈夾層的形成。

主動脈夾層；性激素；性激素受體

主動脈夾層是具有高病死率的致命性血管疾病，其病理性改變是主動脈內(nèi)膜局部破裂，管腔內(nèi)的血液進入動脈壁內(nèi)使得內(nèi)膜逐步剝離進而在動脈內(nèi)形成真、假兩腔，最終導(dǎo)致管腔破裂死亡。報道顯示西方主動脈夾層年發(fā)病率為3～5/10萬，早期病死率>50%[1-2]，且該疾病發(fā)病率仍處于上升趨勢。目前主動脈夾層的發(fā)病原因尚未完全闡明，普遍認為是多因素作用的結(jié)果。近年來研究發(fā)現(xiàn)性激素與該疾病的發(fā)生有密切關(guān)系[3]。因此本研究以主動脈夾層患者為研究對象，對其體內(nèi)性激素水平及血管組織性激素受體表達情況進行檢測，探討性激素水平與該疾病發(fā)病的關(guān)系，為明確主動脈夾層的發(fā)病機制提供實驗室數(shù)據(jù)。

1　臨床資料

1.1一般資料選取2014年1月—2016年1月本院急救醫(yī)學(xué)科及心臟外科經(jīng)主動脈增強CT(CTA)或主動脈磁共振成像(MRI)確診為主動脈夾層患者62例為實驗組，男50例，年齡41.2～67.8(54.5±13.3)歲；體質(zhì)量指數(shù)(24.48±2.37)kg/m2。女12例(絕經(jīng)后)，年齡45.4～64.6(55.0±11.6)歲；體質(zhì)量指數(shù)(23.97±3.08)kg/m2。選取同期在我院健康體檢者59例作為正常組，男48例，年齡40.8～68.1(54.8±12.7)歲，體質(zhì)量指數(shù)(24.54±2.16)kg/m2；女11例(絕經(jīng)后)，年齡45.8～66.5(54.9±12.4)歲，體質(zhì)量指數(shù)(23.86±2.74)kg/m2。2組患者性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。取實驗組中10例行人工血管置換術(shù)取得胸主動脈標本者作為主動脈夾層病變血管組，男6例，女4例；年齡(59.8±10.8)歲。同時選取10例無心血管疾病遺體捐獻者主動脈血管組織為正常動脈血管組，男5例，女5例；年齡(58.7±11.9)歲。2組患者性別、年齡無統(tǒng)計學(xué)差異(P均>0.05)。入選者均排除急性心肌梗死、慢性消耗性疾病、傳染病、腫瘤等疾病，女性患者除外生殖系統(tǒng)疾病。本研究符合倫理學(xué)規(guī)定并通過醫(yī)院倫理學(xué)委員會論證同意，實驗組和正常組入選個體在入選時均告知其研究方法及其意義，并簽署知情同意。

1.2研究方法

1.2.1性激素水平實驗組患者確診為主動脈夾層后次日晨、正常組受試者于入組后次日晨抽取靜脈血4 mL，離心取血清，置于-80 ℃低溫冰箱保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測卵泡生成激素、黃體生成激素、孕酮、睪酮、催乳激素水平。

1.2.2性激素受體表達情況將血管置換后的主動脈病變血管和正常捐獻者主動脈血管組織離體后2 h內(nèi)放置在液氮速凍后放置于-80 ℃保存，并制作成石蠟包埋切片。通過免疫組化方法檢測血管組織中雌激素受體α(ERα)、ERβ、孕激素受體(PR)、雄激素受體(AR)表達情況；將免疫組化切片在光鏡下進行觀察，按各層細胞核染色密度和范圍積分：陽性為棕褐色0分，陰性；1分，極弱陽性；2分，弱陽性；3分，中度陽性；4分，強陽性；5分，極強陽性。應(yīng)用qRT-PCR法檢測血管組織中ERαmRNA、ERβmRNA、PRmRNA及ARmRNA水平，實驗重復(fù)3次。具體引物設(shè)計見表1，反應(yīng)體系如下：10×PCRbuffer，TaKaRa TaqTM 5 IU/μL，上游引物25 μmol/L，下游引物25 μmol/L，PCR反應(yīng)底物10 mmol/L，Template DNA 10 ng/μL及Sterile deionized water，體積分別為2.5 μL，0.4 μL，0.4 μL，0.4 μL，0.5 μL，7.0 μL，12.3 μL，總體系為25.0 μL。

表1　性激素受體表達情況引物設(shè)計

2　結(jié)　　果

2.1實驗組和正常組性激素水平比較實驗組血清雌二醇含量及雌雄激素比值明顯低于正常組(P均<0.05)，泌乳素含量明顯高于正常組(P<0.05)，2組睪酮、卵泡生成激素、黃體生成激素水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。見表2。

表2　2組血清性激素水平比較±s)

2.2正常動脈血管組和主動脈夾層病變血管組血管組織中性激素受體表達情況性激素受體陽性反應(yīng)存在于血管壁的內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞中。主動脈夾層病變血管組血管壁中ERα、ERβ、PR及AR免疫組化積分及mRNA水平均明顯低于正常動脈血管組(P均<0.05)。見表3及表4。

表3　動脈血管壁中性激素受體免疫組化積分±s，分)

表4　動脈血管壁中性激素受體qRT-PCR檢測結(jié)果

3　討　　論

隨著當今社會人口老齡化的進程，主動脈夾層已成為急診醫(yī)學(xué)科及心臟大血管外科常見的一種疾病，其一旦破裂將直接威脅患者生命。盡管目前已有多種手段如外科手術(shù)、血管介入等對該疾病進行干預(yù)及治療，但仍保持較高的病死率[4-5]，其根本原因為該疾病發(fā)病機制尚未完全清楚。因此開展對其發(fā)病機制的研究對該疾病早期防治及改善臨床預(yù)后有重要意義。流行病學(xué)研究表明，主動脈夾層的發(fā)病率存在明顯性別差異，男女發(fā)病率比率約為4∶1，同時在女性絕經(jīng)期后，女性患者發(fā)病率與男性相似，提示性激素改變或許參與了主動脈夾層的形成[6]。

性激素是體內(nèi)廣泛存在的具有調(diào)節(jié)作用的激素之一，包括雌激素和雄激素，其中雌激素在一定程度上通過調(diào)節(jié)血管功能和脂質(zhì)代謝起到血管保護作用，近年來研究發(fā)現(xiàn)雌激素能直接選擇性誘導(dǎo)血管快速舒張[7]，調(diào)節(jié)血管平滑肌細胞和內(nèi)皮細胞增殖、遷移[8]，并且可以通過UCs-CRHR2系統(tǒng)起到心臟保護作用[9]，當體內(nèi)雌激素水平下降(如絕經(jīng)后)的情況下，因其血管保護作用減弱導(dǎo)致主動脈夾層發(fā)生率增加；而性激素的另一個重要組成部分雄激素與血管方面的研究比較少，已有研究表明雄激素一方面可以直接作用于血管系統(tǒng)[10]，另一方面可以通過單核-巨噬細胞系統(tǒng)參與炎癥形成誘發(fā)動脈粥樣斑塊形成[11]。因此本研究以臨床主動脈夾層患者為研究對象，對其血清性激素水平和動脈血管壁性激素受體進行檢測。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實驗組血清雌二醇含量及雌雄激素比值明顯低于正常組 ，泌乳素含量明顯高于正常組，2組睪酮、卵泡生成激素、黃體生成激素水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；主動脈夾層病變血管組血管組織中ERα、ERβ、PR、AR蛋白及mRNA水平均明顯低于正常動脈血管組。表明性激素可能參與了主動脈夾層的形成，有必要深入研究，對改善其預(yù)后、尋找新的治療手段有重要意義。本研究中也發(fā)現(xiàn)主動脈夾層患者雄激素受體表達下降，但其具體作用和途徑尚需進一步研究證實。

[1]Nienaber CA,Powell JT.Management of acute aortic syndromes[J].Eur Heart J，2012，33(1):26-35

[2]Carpenter SW,Kodolitsch YV,Debus ES,et al.Acute aortic syndromes: definition,prognosis and treatment options[J].J Cardiovasc Surg (Torino)，2014，55(2 Suppl 1):133-144

[3]Makrygiannis G,Courtois A,Drion P,et al.Sex differences in abdominal aortic aneurysm:the role of sex hormones[J].Ann Vasc Surg,2014,28(8):1946-1958

[4]Baikoussis NG,Argiriou O,Argiriou M,et al.Hybrid treatment of a true thyreocervical trunk aneurysm in a patient with Type B aorticdissection[J].Ann Card Anaesth，2016，19(2):363-366

[5]David TE.Adventitial inversion in the distal anastomosis in surgical treatment of acute DeBakey type Iaortic dissection[J].J Thorac Cardiovasc Surg,2016,151(5):1346-1347

[6]Maitusong B,Sun HP,Xielifu D,et al.Sex-related differences between patients with symptomatic acute aortic dissection[J].Medicine (Baltimore)，2016，95(11):e3100

[7]Martin DS,Eyster KM.Assessing direct vascular actions of estrogens[J].Methods Mol Biol，2016，1366:533-548

[8]Lu Q,Schnitzler GR,Ueda K,et al.ER alpha rapid signaling is required for estrogen induced proliferation and migration of vascular endothelial cells[J].PLoS One，2016，11(4):e0152807

[9]Gao L,Cong B,Zhang L,et al.Expression of the calcium-activated potassium channe in upper and lower segment human myometrium during pregnancy and parturition[J].Reptod Biol Endocrinol,2009,7(1):27

[10] Yu J,Akishita M.Role of androgen in the elderly.Roles of androgen on blood vessels[J].Clin Calcium,2013,23(8):1133-1140

[11] Villablanca AC,Jayachandran M,Banka C.Atherosclerosis and sex hormones:current concepts[J].Clin Sci (Lond),2010,119(12):493-513

10.3969/j.issn.1008-8849.2016.24.020

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1008-8849(2016)24-2679-03

2016-02-22