張秋杰

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胃癌組織中CDX2表達(dá)及其與KI67的關(guān)系分析

張秋杰

目的探討CDX2在胃癌組織中的表達(dá)情況及其與Ki67的相關(guān)性。方法收集新鮮胃癌組織標(biāo)本50例，應(yīng)用免疫組化檢測CDX2和Ki67在胃癌組織中的表達(dá)情況。結(jié)果胃癌組織中的CDX2、Ki67的表達(dá)水平升高(P<0.05)；與分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分期有相關(guān)性(P<0.05)，且分化不好、浸潤深度T3-4、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，分期較晚的胃癌組織，CDX2表達(dá)較低，Ki67表達(dá)較高，兩者可能與胃癌的增殖分化有關(guān)，但兩者的表達(dá)無明顯相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論CDX2、Ki67在胃癌中高度表達(dá)，對于分析胃癌的惡性程度并判斷預(yù)后有很高的臨床價(jià)值。

胃癌；CDX2；Ki67

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.07.006

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1062～1064)

胃癌是全球常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率逐年上升，研究證實(shí)，其發(fā)生發(fā)展與基因改變密切相關(guān)[1]。尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子-2(CDX2) 是1種核轉(zhuǎn)錄因子，在腸道特異性表達(dá)，發(fā)揮抑癌基因的作用[2]。Ki67蛋白反映細(xì)胞的增殖狀態(tài)，存在于G1，S，G2和有絲分裂期細(xì)胞[3]。本實(shí)驗(yàn)通過應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測在胃癌組織中CDX2、Ki67的表達(dá)變化情況，探討CDX2、Ki67的表達(dá)與胃癌發(fā)展以及兩者之間的關(guān)系。

1　材料與方法

1.1研究對象

選取2014年1月至2015年1月我院行胃癌根治性切除術(shù)的50例患者作為實(shí)驗(yàn)組，經(jīng)病理檢查證實(shí)，且未經(jīng)放、化療，取新鮮胃癌組織中最典型的癌旁組織(癌旁組織選自距癌組織邊緣15 cm區(qū)域，切緣經(jīng)病理證實(shí)未見癌細(xì)胞)，男性25例，女性25例，年齡31～81歲，平均(51.23±2.63)歲?；颊叩男詣e、年齡等方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。標(biāo)本切除后立即取100 mg 標(biāo)本,在-80 ℃超低溫冰箱凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.2試劑與儀器

兔抗人CDX2、Ki67多克隆抗體、SP通用型試劑盒、DAB 試劑盒、多聚賴氨酸、檸檬酸抗原修復(fù)液、PBS、過氧化氫、二甲苯，無水乙醇，石蠟，蘇木精，中性樹膠(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司) 。

超凈工作臺(Formal205型，美國)；倒置顯微鏡(Olympus，日本)；組織包埋機(jī)(SAKURA，日本)；脫水機(jī)(TIYODA，日本)；超薄切片機(jī)(Leica，德國)；臺式恒溫振蕩器(中國上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；電熱風(fēng)干燥箱(中國上海圣欣科學(xué)儀器有限公司)；計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)(惠普，美國)。

1.3免疫組織化學(xué)法

福爾馬林液固定；脫水、透明；浸蠟、包埋；切片、貼片、烤片；脫蠟、脫水；高壓熱修復(fù)；阻斷：3%過氧化氫孵育10 min；封閉：山羊血清封閉液室溫孵育10 min；加一抗50 μl室溫靜置1 h；加辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗50 μl靜置10 min；加鏈霉親和素-過氧化物酶50 μl靜置10 min；顯色；終止；蘇木精復(fù)染，鹽酸酒精分化；常規(guī)脫水、透明；封片；顯微鏡下觀察。

1.4判斷標(biāo)準(zhǔn)

以已知的該指標(biāo)的免疫組化染色陽性片作為陽性對照，以PBS緩沖液代替一抗作陰性對照，HE 切片作對照觀察。

CDX2、Ki67陽性結(jié)果判定以細(xì)胞核不染色，細(xì)胞膜或胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕色或棕黃色顆粒為陽性染色，陰性(-)：染色細(xì)胞數(shù)≤10%；弱陽性(+)：染色細(xì)胞數(shù)11%～25%；陽性(++)：染色細(xì)胞數(shù)26%～50%；強(qiáng)陽性(+++)：染色細(xì)胞數(shù)>50%。以上均以(-)為陰性；(+)～(+++)為陽性。圖像分析：計(jì)算機(jī)圖像系統(tǒng)拍照，每張切片隨機(jī)選取5個(gè)視野，并記錄。

1.5數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，單因素分析采用卡方檢驗(yàn)，多因素分析采用Logistic回歸模型，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1胃癌組織及癌旁組織中CDX2、Ki67的表達(dá)

采用免疫組織化學(xué)法對胃癌組織、癌旁組織進(jìn)行CDX2、Ki67的檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中CDX2陽性率為80%，Ki67陽性率為72%；癌旁組織CDX2、Ki67陽性率分別為16%、20%；胃癌組織中CDX2、Ki67陽性表達(dá)率明顯較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1　胃癌組織及癌旁組織中CDX2、Ki67表達(dá)情況/例

2.2CDX2、Ki67表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CDX2、Ki67表達(dá)與性別、年齡、腫瘤大小、原發(fā)部位、Lauren分型、脈管癌栓無相關(guān)性(P>0.05)，與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分期相關(guān)(P<0.05)，且分化不好、浸潤深度T3-4、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分期較晚的胃癌組織中CDX2表達(dá)水平較低，Ki67表達(dá)水平較高，具體結(jié)果見表2。

2.3胃癌組織中CDX2與Ki67表達(dá)的相關(guān)性

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CDX2表達(dá)與Ki67表達(dá)無明顯相關(guān)性(P>0.05)，具體結(jié)果見表3。

3　討論

胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，威脅人類生命健康，其發(fā)生、發(fā)展與基因密切相關(guān)[4]。同源盒轉(zhuǎn)錄因子-2(CDX2) 是同源盒基因家族的一員，是腸道特異性轉(zhuǎn)錄因子，在細(xì)胞增殖、胚胎發(fā)育、組織分化等方面中起重要作用[5]。CDX2在正常胃黏膜無表達(dá)，在腸化生陽性表達(dá)，是胃黏膜腸化生的起始，進(jìn)而誘導(dǎo)特異性基因表達(dá)，腸型上皮細(xì)胞分化形成[5]。Ki67是1種核抗原，存在于增殖細(xì)胞中，與細(xì)胞有絲分裂有關(guān)。Ki67>10%為陽性，>45% 為高表達(dá)，其表達(dá)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、pTNM 分期、分化程度相關(guān)[6-7]。

在本研究中，選取在我院行手術(shù)切除的胃癌患者，采用免疫組織化學(xué)法對胃癌組織、癌旁組織進(jìn)行CDX2、Ki67的檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中CDX2陽性率為80%，Ki67陽性率為72%；癌旁組織CDX2、Ki67分別為16%、20%；胃癌組織CDX2、Ki67表達(dá)明顯升高；從胃癌患者的性別、年齡、腫瘤大小、原發(fā)部位、分化程度、Lauren分型、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分期、脈管癌栓方面，與胃癌組織中CDX2、Ki67的表達(dá)進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CDX2、Ki67表達(dá)與性別、年齡、腫瘤大小、原發(fā)部位、Lauren分型、脈管癌栓無相關(guān)性，與分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分期有相關(guān)性，且分化不好、浸潤深度T3-4、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，分期較晚的胃癌組織，CDX2表達(dá)較低，Ki67表達(dá)較高，說明CDX2與Ki67的表達(dá)水平可能與胃癌組織的增殖分化有一定關(guān)系；對二者的相關(guān)性進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)CDX2的表達(dá)水平與Ki67的表達(dá)無明顯相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn)CDX2 蛋白表達(dá)強(qiáng)度隨癌細(xì)胞由分化好到分化差逐漸減少[8]。隨著胃癌浸潤深度增加、淋巴結(jié)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移、分期增加，Ki67陽性表達(dá)率增加，與腫瘤惡性程度正相關(guān)[9]。

表2　CDX2、Ki67表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系(例，%)

表3　胃癌組織中CDX2與Ki67表達(dá)的相關(guān)性/例

注：P>0.05。

綜上所述，CDX2、Ki67在胃癌組織中均有高表達(dá)，二者的表達(dá)水平與分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分期有相關(guān)性，分化不好、浸潤深度高、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，分期較晚的胃癌組織CDX2表達(dá)較低，Ki67表達(dá)較高，可能與胃癌組織的增殖分化有一定關(guān)系，但二者之間無相關(guān)性。在臨床工作中，及時(shí)檢測CDX2、Ki67的表達(dá)水平，對于分析胃癌的惡性程度并判斷預(yù)后有很高的臨床價(jià)值。

[1]王永輝,陳敬,沈朋,等.胃癌組織中Src激酶激活和HER2、Ki-67的表達(dá)及相關(guān)性研究〔J〕.中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志,2012,21(4):389-395.

[2]Baba Y,Nosho K,Shima K,et al.Relationship of CDX2 loss with molecular features and prognosis in colorectal cancer〔J〕.Clin Cancer Res,2009,15(14):4665-4673.

[3]王永輝,毛衛(wèi)波,樓建,等.CD44V6、HER2及 Ki67在胃癌和癌旁組織中的表達(dá)及相關(guān)性分析〔J〕.浙江實(shí)用醫(yī)學(xué),2014,19(3):160-164.

[4]郁巖杰,趙治國,于泳,等.萎縮性胃炎伴腸上皮化生淺表隆起灶黏膜中Reg4和Ki67表達(dá)高于淺表凹陷灶黏膜〔J〕.腫瘤,2011,31(10):937-941.

[5]Kang JM,Lee BH,Kim N,et al.CDX1 and CDX2 expression in intestinal metaplasia,dysplasia and gastric cancer〔J〕.J Korean Med Sci,2011,26(5):647-653.

[6]夏加增,李建平,李承龍,等.Survivin和PTEN及Ki67蛋白在胃癌中的表達(dá)及其相關(guān)性〔J〕.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,2008,25(10):1344.

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(編輯：吳小紅)

Analysis of Relationship between Expression of CDX2 and Ki67 in Gastric Cancer Tissues

ZHANGQiujie.

TheFirstPeople'sHospitalofJining,Jining,272011

ObjectiveTo investigate the expression of CDX2 in gastric cancer tissues and its correlation with Ki67.Methods50 cases of fresh gastric cancer tissues were collected,and CDX2 and Ki67 expression in gastric cancer tissues received immunohistochemical detection.ResultsExpression of CDX2 and Ki67 levels in gastric cancer tissues was higher(P<0.05);and it was correlated with differentiation degree,infiltration depth,lymph node metastasis,and staging(P<0.05),and gastric cancer tissues of poor differentiation,invasive depth T3-4 stages,with lymph node metastasis,and late staging had low CDX2 expression and high Ki67 expression,and it may be associated with gastric cancer proliferation and differentiation,but there had no significant correlation(P>0.05).ConclusionHigh expression of CDX2 and Ki67 in gastric cancer has high clinical value in the analysis of malignancy and prognosis of gastric cancer.

Gastric cancer;CDX2；Ki67

濟(jì)寧市科技局項(xiàng)目[編號:濟(jì)科字(2011)57號-二-50]

272011 山東省濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院

R735.2

A

1001-5930(2016)07-1062-03

2015-07-21

2016-05-31)