李淑貞，楊曉暉，崔茂香，張?zhí)m蘭滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河北滄州061001

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通絡(luò)玉液湯對(duì)2型糖尿病心肌病大鼠糖脂代謝及氧化指標(biāo)的影響*

李淑貞，楊曉暉，崔茂香，張?zhí)m蘭
滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河北滄州061001

目的：探討通絡(luò)玉液湯對(duì)糖尿病心肌?。―C）大鼠糖脂代謝的改善作用及其機(jī)制。方法：采用高糖高脂飲食+小劑量鏈脲佐菌素腹腔注射的方法復(fù)制2型糖尿病心肌病大鼠模型。將48只大鼠隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組、糖尿病心肌病組、通絡(luò)玉液湯4周組、通絡(luò)玉液湯8周組。分別處理4～8周后，測(cè)定大鼠血糖（FBG）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性的改變，觀察胰島細(xì)胞的病理變化。結(jié)果：用藥組大鼠FBG、TC、TG、LDL-C、MDA水平明顯下降（P＜0.05），HDL-C水平、SOD活性明顯上升（P＜0.05），且隨干預(yù)時(shí)間的延長，治療效果更加顯著。結(jié)論：通絡(luò)玉液湯可能通過抗氧化作用改善糖脂代謝紊亂、修復(fù)胰島β細(xì)胞。

通絡(luò)玉液湯；2型糖尿病心肌病；糖脂代謝；抗氧化

糖尿病心肌?。╠iabetic cardiomyopathy DC）是一種獨(dú)立于冠心病、高血壓、先天性心病和其他種類的心臟病之外的特異的心臟病變，發(fā)病率高、危害大，與糖尿病患者心血管疾病的高發(fā)生率和高病死率密切相關(guān)，是嚴(yán)重威脅人類健康的世界性公共衛(wèi)生問題［1-4］。通絡(luò)玉液湯在玉液湯、生脈散原方基礎(chǔ)上加減化裁組成，具有益氣養(yǎng)陰、活血通絡(luò)之功效。本實(shí)驗(yàn)旨在高糖高脂喂養(yǎng)+小劑量鏈脲佐菌素腹腔注射建立接近臨床特征的實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病心肌病大鼠模型的基礎(chǔ)上，通過觀察空腹血糖（FBG）、血脂、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）等指標(biāo)，探討該藥對(duì)DC大鼠糖脂代謝的改善作用及其機(jī)制。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠，雄性，體質(zhì)量150～180g，SPF級(jí)，中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證號(hào)：SCXK-（軍）2009-003。

1.2藥物及試劑通絡(luò)玉液湯（生曬參、生黃芪、生山藥、麥冬、知母、花粉、葛根、五味子、雞內(nèi)金等）中藥飲片均購自滄州同仁堂藥店。浸泡，煎煮、濃縮成每毫升含2.5 g生藥的液體；鏈脲佐菌素（STZ），購自美國Sigma公司；FBG、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、MDA、SOD試劑盒均購自南京建成生物制品研究所。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1分組與造模48只SD雄性大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，參考董世芬等［3］方法，并根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分為正常對(duì)照組（NC組）和模型組。NC組一直采用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，模型組先用高脂高糖飼料（20%蔗糖、10%豬油、2.5%膽固醇和67.5%基礎(chǔ)飼料）喂養(yǎng)4周，然后一次性腹腔注射1%STZ 30 mg/kg，NC組僅給予等量枸櫞酸鈉緩沖液（pH=4.4）腹腔注射，不采血。72小時(shí)后測(cè)大鼠FBG，大于11.1 mmol/L認(rèn)為是2型糖尿病模型成功大鼠，持續(xù)高脂高糖飼料喂養(yǎng)6周，即成DC模型。選擇成模大鼠36只，隨機(jī)分為3組：糖尿病心肌病組（DC組）、通絡(luò)玉液湯4周組（TYD4周組）、通絡(luò)玉液湯8周組（TYD8周組）；每組數(shù)量均為12只。

1.3.2給藥方法DC模型成功后開始給藥，TYD組灌服通絡(luò)玉液湯25 g/（kg·d）；NC組和DC組每日灌服相應(yīng)劑量的生理鹽水，每周根據(jù)大鼠體質(zhì)量以及飼料消耗來調(diào)整藥物劑量。4周組連續(xù)灌藥4周，8周組連續(xù)灌藥8周。各組大鼠均以原飼料繼續(xù)喂養(yǎng)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中自由攝食和飲水。

1.4指標(biāo)測(cè)定

1.4.1血生化指標(biāo)測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)束后各組動(dòng)物禁食12小時(shí)從頸總動(dòng)脈取血2 mL，制備血清-20℃保存以備檢測(cè)各生化指標(biāo)。葡萄糖氧化酶法測(cè)定FBG，全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定TC、TG、LDL-C、HDL-C、MDA、SOD。

1.4.2胰腺組織形態(tài)學(xué)檢查取胰腺以4%多聚甲醛固定，石蠟切片，常規(guī)HE染色，光鏡下觀察胰島細(xì)胞的病理變化。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法全部數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)量資料用±s）表示，多組間比較用單因素方差分析和q檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1血糖、血脂水平與NC組比較，DC組大鼠血清中FBG、TC、TG、LDL-C含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），HDL-C水平明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；經(jīng)用藥干預(yù)后，各治療組大鼠血清中FBG、TC、TG、LDL-C含量明顯降低，HDL-C含量明顯升高，與DC組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與TYD4組比較，TYD8組大鼠血清中FBG、TC含量明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），TG、LDL-C水平下降，HDL-C升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1　各組大鼠血糖、血脂水平的比較s）mmol/L

表1　各組大鼠血糖、血脂水平的比較s）mmol/L

注：與NC組比較，**表示P＜0.01；與DC組比較，△△表示P＜0.01；與TYD4組相比，★表示P＜0.05，★★表示P＜0.01，※表示P＞0.05。

組別NC組DC組TYD4組TYD8組只數(shù)12 12 12 12 FBG 5.82±1.12 22.57±2.84**14.91±2.48△△10.42±2.52△△★★TC 1.29±0.13 3.36±0.21**2.69±0.17△△2.50±0.19△△★TG 0.17±0.05 0.82±0.12**0.43±0.09△△0.34±0.07△△※LDL-C 0.33±0.10 0.79±0.08**0.66±0.08△△0.60±0.09△△※HDL-C 1.37±0.16 0.86±0.11**1.12±0.09△△1.16±0.09△△※

2.2各組大鼠血清SO D活性、M D A含量與NC組比較，DC組大鼠血清中MDA含量明顯升高（P＜0.01），SOD水平明顯下降（P＜0.01）；經(jīng)用藥干預(yù)后，各治療組大鼠血清中MDA含量明顯降低，SOD含量明顯升高，與DC組比較有顯著差異（P＜0.05）；與TYD4組比較，TYD8大鼠血清中MDA含量明顯降低（P＜0.05），SOD水平明顯上升（P＜0.01）。見表2。

2.3胰島細(xì)胞的病理學(xué)變化光鏡下觀察：NC組大鼠胰島清晰可辨且體積較大，胰島細(xì)胞的數(shù)量最多且細(xì)胞分布均勻，細(xì)胞核居中，胞漿豐富均勻；DC組大鼠胰島體積縮小，細(xì)胞數(shù)量減少，分布稀疏，腺泡細(xì)胞間有明顯的脂肪空泡，胞漿疏松，嗜酸性染色明顯減弱，細(xì)胞核固縮，胰島內(nèi)有少量的淋巴細(xì)胞浸潤；與DC組比較，各治療組大鼠胰島細(xì)胞有不同程度的修復(fù)增生，胰島體積相對(duì)增大，細(xì)胞數(shù)目相對(duì)增多，胞漿較豐富。見圖1。

表2　各組大鼠血清SO D活性、M D A含量比較±s）

表2　各組大鼠血清SO D活性、M D A含量比較±s）

注：與NC組相比，**表示P＜0.01；與DC相比，△表示P＜0.05，△△表示P＜0.01；與TYD4組比較，★表示P＜0.05。

組別NC組DC組TYD4組TYD8組例數(shù)12 12 12 12 SOD/（nU·mL-1）261.40±61.58 143.59±15.09**190.86±28.34△234.35±46.46△△★MDA/（nmol·mL-1）3.69±0.87 7.24±1.68**5.93±0.71△4.68±0.83△△★

圖1　各組大鼠胰腺組織HE染色（×400）

3　討論

胰島素抵抗和β細(xì)胞功能障礙是2型糖尿病主要發(fā)病機(jī)制［4-9］。本實(shí)驗(yàn)先采用高糖高脂飲食喂養(yǎng)大鼠，誘導(dǎo)其產(chǎn)生胰島素抵抗，并引起血脂升高，繼以小劑量鏈脲佐菌素腹腔注射，破壞大鼠胰島β細(xì)胞，造成大鼠胰島素分泌缺陷，成功復(fù)制出與臨床2型糖尿病心肌病的發(fā)生發(fā)展過程較相似的2型糖尿病心肌病大鼠模型［10-14］。大量研究表明高血糖是誘發(fā)糖尿病心肌病的主要病因。長期高血糖刺激，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)，產(chǎn)生過量高活性的自由基，導(dǎo)致心肌細(xì)胞壞死，心肌肥厚、纖維化，影響心臟正常功能，最終導(dǎo)致糖尿病心肌病的發(fā)生［15-17］。

中醫(yī)學(xué)中并無糖尿病心肌病之名，大部分醫(yī)家將其歸屬于“消渴”“胸痹”“真心痛”等范疇。中醫(yī)認(rèn)為消渴病經(jīng)久不愈，耗氣傷陰，導(dǎo)致氣陰兩傷，久病及心，因虛致瘀，瘀血痹阻心脈，形成消渴病心病即糖尿病心肌病。氣陰兩虛，瘀血阻絡(luò)為其主要病機(jī)。

通絡(luò)玉液湯是在玉液湯、生脈散原方基礎(chǔ)上加減化裁而成，具有益氣養(yǎng)陰、活血通絡(luò)之效。本實(shí)驗(yàn)顯示，模型組大鼠FBG升高，血清中MDA水平升高，SOD活性下降，TC、TG、LDL-C增高和HDL-C降低，與文獻(xiàn)描述一致。給予通絡(luò)玉液湯干預(yù)后，糖尿病心肌病大鼠FBG、MDA水平明顯下降，SOD活性明顯上升，TC、TG、LDL-C降低和HDL-C增高，且隨干預(yù)時(shí)間的延長，治療效果更加顯著，表明通絡(luò)玉液湯的抗氧化作用可能是改善糖脂代謝紊亂、修復(fù)胰島β細(xì)胞的作用機(jī)理之一。

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The Effects of TongLuo YuYe Tang on Oxidation Index，Glucose and Lipid Metabolism of the Rats with Type Two Diabetic Cardiomyopathy

LI Shuzhen，YANG Xiaohui，CUI Maoxiang，ZHANG Lanlan Cangzhou Medical College，Cangzhou 061001，China

Objective：To explore the mechanism of TongLuo YuYe Tang improving glucose and lipid metabolism of type two diabetic cardiomyopathy（DC）rats and its improvement effects.Methods：DC rat model was prepared by the method of high sugar and high fat diet，and peritoneal injection of small dose of streptozotocin.All 48 rats were randomized into four groups：normal control group，DC group，the group of TongLuo YuYe Tang for four weeks and the group of TongLuo YuYe Tang for eight weeks，the levels of FBG，TC，TG，LDL-C and HDL-C，the contents of MDA and the activity of SOD in the rats were detected，pathological changes of islet cells were observed after dealing in four to eight weeks respectively.Results：The levels of FBG，TC，TG，LDL-C and MDA decreased obviously in the medication groups（P＜0.05），the level of HDL-C and the activity of SOD rose notably（P＜0.05），as the intervention time prolonged，therapeutic effects became more evident.Conclusion：TongLuo YuYe Tang could improve the disorder of glucose and lipid metabolism and repair islet β cells by antioxidant effects.

TongluoYuye Tang；type 2 diabetic cardiomyopathy；glucose and lipid metabolism；antioxidation

R285.5

A

1004-6852（2016）06-0004-03

2015-12-28

2013年滄州市科學(xué)技術(shù)研究及發(fā)展指導(dǎo)計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào)131302077）。

李淑貞（1971—），女，碩士學(xué)位，副教授。研究方向：中醫(yī)藥防治糖尿病、心肌病。