翟曉斌，葛朝明，范禎禎，蔡宏斌，劉志艷，王浩玥

急性缺血性卒中患者血清Ox-LDL水平與疾病嚴重程度及預后的相關性

翟曉斌1，葛朝明1，范禎禎1，蔡宏斌1，劉志艷1，王浩玥1

目的 探討急性缺血性卒中患者血清氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）水平與卒中嚴重程度及預后的相關性。方法 入選141例急性缺血性卒中患者（AIS組）和30例正常人（對照組）的血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測兩組血清Ox-LDL水平，并在入院第1 d進行神經功能缺損程度評分（NIHSS），第6個月進行日常生活活動能力量表評分（BI）。比較AIS組與對照組Ox-LDL水平結果，并分析AIS組患者Ox-LDL水平與入院時NIHSS評分及6個月后BI評分的相關性。結果 急性缺血性卒中組血清Ox-LDL水平明顯高于對照組（P＜0.05），其Ox-LDL水平與第1天NIHSS評分存在顯著相關性（r =0.056，P＜0.05），與第6個月BI評分無明顯相關性（P＞0.05）。結論 急性缺血性卒中患者血清Ox-LDL水平與臨床嚴重程度有相關性，但與缺血性卒中預后指標的相關性不明顯。

急性缺血性卒中；氧化型低密度脂蛋白；嚴重程度；預后

急性缺血性卒中（AIS）已成為全球致死和致殘的首要原因［1，2］，對人類健康的危害極大。目前公認動脈粥樣硬化（AS）是缺血性腦卒中的主要發(fā)病原因，且后者已被發(fā)現(xiàn)與氧化應激損傷密切相關［3-5］。氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）是由低密度脂蛋白（LDL）在體內氧化修飾形成，LDL的核心含有大量不飽和脂肪酸，易發(fā)生自身氧化。氧化應激學說認為，LDL的氧化修飾是啟動和大量不飽和脂肪酸，易發(fā)生自身氧化。氧化應激學說認為，LDL的氧化修飾是啟動和加速AS病變形成的關鍵［6］。國內外多項研究證實，AIS患者血清Ox-LDL水平明顯高于健康人群［7-9］。據(jù)此推測血清Ox-LDL可能參與了AIS的發(fā)病過程，因此本研究擬通過對比檢測AIS患者和健康體檢者的血清Ox-LDL，進一步驗證Ox-LDL在兩組的表達差異，在此基礎上評估其表達水平與AIS發(fā)病嚴重程度及預后的相關性。

1　資料和方法

1.1研究對象和分組 入選2014年2月～6月在蘭州大學第二醫(yī)院神經內科入院治療的急性缺血性卒中患者141例，其中男性86例，年齡25～92 （59.09±12.54）歲；女性55例，年齡28～88 （65.58±12.47）歲。入選標準：①年齡≥18歲；②所有患者均符合中國急性缺血性腦卒中診治指南 2010 的診斷標準［10］，均經頭顱CT和（或）MRI檢查，部分經DSA檢查證實，責任病灶與臨床癥狀相符合；③發(fā)病時間≤7 d。排除標準：①影像學排除出血和其他病理性疾?。ㄈ缪芑?、腫瘤、膿腫、多發(fā)性硬化或其他常見的非缺血性疾?。虎诙虝盒阅X缺血發(fā)作（TIA）；③血管成形術或血管外科手術導致的醫(yī)源性卒中。入選同期門診體檢健康人群30例作為對照組，均經體格檢查、頭顱CT和（或）MRI、血生化檢查均未發(fā)現(xiàn)異常，既往無心腦血管疾病史；其中男性21例，年齡27～86（63.70±16.04）歲；女性9例，年齡51～83（72.60±10.62）歲。入組患者均簽署知情同意書。

1.2 采用相關量表評定患者嚴重程度及預后

1.2.1卒中嚴重程度評定方法 入院24 h內，對AIS患者進行NIHSS評分，評估患者卒中的嚴重程度。1.2.2 卒中預后評定方法 發(fā)病后第6個月，對AIS患者進行BI評分［11，12］，評估患者的臨床預后。

均由兩名臨床經驗豐富的神經科主治醫(yī)師，參照NIHSS量表及BI量表評分標準進行評分，取其均值作為最終評分。若兩組評分差異較大，則由第三名神經科醫(yī)師再次評分，取前兩者中更接近第三評分值的評分，與第三評分值的均值作為最終評分。

1.3血清Ox-LDL的檢測

1.3.1血液樣本的采集與保存 采集AIS患者空腹時肘靜脈血4 ml，置于已加入抗氧化劑及抗凝劑的試管中。搖勻后，3000 r/min離心5 min后析出血清；微量移液器移取1～1.5 ml新鮮血清置于塑料試管中，-4℃保存。

1.3.2檢測方法 兩周內采用ELISA法測定血清Ox-LDL濃度。本研究使用的 Ox-LDL ELISA 試劑盒由上?？婆d生物科技有限公司生產，所有操作步驟嚴格按試劑盒所附說明書進行。

1.4統(tǒng)計學處理 采用SPSS19.0 軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料采用（±s）表示，兩組均數(shù)比較采用立樣本t檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析方法進行；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.1兩組人群一般資料及Ox-LDL水平比較 AIS組與對照組臨床基線數(shù)據(jù)及Ox-LDL水平的比較見表1。兩組患者在年齡、空腹血糖、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平的差異均無無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。AIS組患者血清Ox-LDL水平明顯高于對照組（P ＜0.05）。

2.2AIS患者血清Ox-LDL水平與疾病嚴重程度及預后相關性 AIS患者血清Ox-LDL水平與其發(fā)病嚴重程度（即NIHSS評分）及預后的相關性分析見表2。AIS患者血清Ox-LDL水平與其發(fā)病時嚴重程度呈正相關（P＜0.05），與其預后無明顯相關性（P＞0.05）。

3　討論

氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）及其所含的生理活性脂質溶血磷脂酰膽堿（LPC）、溶血磷脂酸（LPA）等，與心血管、免疫、神經系統(tǒng)、炎癥、動脈硬化和癌癥的發(fā)生發(fā)展關系密切。這些生理活性物質通過激活多種類型的G蛋白偶聯(lián)受體，發(fā)揮維持細胞鈣離子的動態(tài)平衡，促進細胞骨架重排，促進細胞增殖和存活、遷移和黏附的作用［13］。在動脈粥樣硬化的形成過程中，Ox-LDL是導致血管內皮損傷的主要因素之一，是動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的關鍵環(huán)節(jié)。長期持續(xù)性的氧化應激反應會產生大量的活性物質，后者可進一步被脂質過氧化產生大量的Ox-LDL［14］。此外Ox-LDL還可通過促進血管平滑肌遷移及增殖、促進泡沫細胞形成及引發(fā)血管炎癥反應等機制參與動脈粥樣硬化［15，16］。由于動脈粥樣硬化是急性缺血性腦卒中的最主要病因，而Ox-LDL是動脈粥樣硬化發(fā)生的關鍵環(huán)節(jié)，由此推測Ox-LDL可能與動脈粥樣硬化所致急性缺血性卒中密切相關。

本研究發(fā)現(xiàn)AIS患者血清Ox-LDL水平與其卒中嚴重程度正相關，與其預后無明顯相關性。我們的研究結果與RIINA等［7］研究結果不完全相符，RIINA的研究結果認為AIS患者血清Ox-LDL水平與患者發(fā)病時嚴重程度及其預后均無相關性。但RIINA研究所采集的患者血標本，已為發(fā)病5～7 d。而Uno等［17］的研究顯示，AIS患者Ox-LDL血清水平峰值出現(xiàn)在發(fā)病第3 d，Polidori等［18］研究表明脂質過氧化指標濃度峰值出現(xiàn)在發(fā)病5 d內的卒中患者，且與其嚴重程度正相關。此外，Masaaki等［19］的研究亦證明，AIS患者Ox-LDL水平與NIHSS評分正相關，血清Ox-LDL水平可反映初始神經功能缺損情況。據(jù)此我們推測RIINA等在檢測血清Ox-LDL時錯過了峰值以致實驗結果存在偏差。

有研究發(fā)現(xiàn)［20］，血清Ox-LDL含量多少與動脈斑塊的不穩(wěn)定性密切相關［21］。王崢等［22］還發(fā)現(xiàn)血清Ox-LDL水平與斑塊最大厚度呈正相關。由此可見，缺血性腦卒中和斑塊不穩(wěn)定性存在相關性。李宏等［23］研究發(fā)現(xiàn)大面積腦梗死患者血清Ox-LDL水平顯著高于小面積腦梗死，這可能是血清Ox-LDL水平與腦梗死嚴重程度正相關的解釋之一。此外Uno等［17］的研究表明Ox-LDL水平與嚴重的皮質梗死密切相關。Ox-LDL水平可能至少反映了動脈粥樣硬化性腦梗死患者體內氧化應激水平［24］。氧化應激是指體內氧化應激物質產生和消失的平衡失調，或者外源性的氧化活性物質攝入過多從而引起氧化反應的狀態(tài)［25］。其值高，說明氧化應激水平高，故急性缺血性卒中發(fā)生時神經功能缺損愈嚴重，NIHSS評分愈高。本研究的不足之處在于未進一步探討血清Ox-LDL與AIS患者梗死面積及部位的關系。

表1　兩組人群一般治療及Ox-LDL水平比較

表2　Ox-LDL水平與AIS發(fā)病時嚴重程度及預后的相關性

本研究結果顯示，血清Ox-LDL與AIS患者的預后不存在明顯的相關性，這一點與RIINA的研究結果相符。這可能是由于AIS患者在發(fā)病的嚴重程度、所合并的基礎疾病、診治方案及康復的時機、時程等方面存在差異，從而導致研究結果出現(xiàn)偏倚。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)血清Ox-LDL水平與急性缺血性卒中嚴重程度存在正相關，檢測血清Ox-LDL對于預判急性缺血性卒中嚴重程度有重要的意義。通過檢測血清Ox-LDL，我們可以針對性地使用抗氧化劑對AIS患者進行治療，但其深入的分子機制尚需進一步研究。此外，Ox-LDL水平與急性缺血性卒中預后是否存在相關性，尚需大樣本研究進一步明確。

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本文編輯：田國祥

The correlation between oxidized low-density lipoprotein level with severity and outcome of acute ischemic stroke

ZHAI Xiao-bin*， GE Zhao-ming， Fan Zhen-zhen， CAI Hong-bin， LIU Zhi-yan， WANG Hao-yue.*Department of Neurology， Second Hospital of Lanzhou University， Lanzhou 730030， China.

GE Zhao-ming. E-mail: 13893285120@163.com

Objective To investigate the associations between oxidized low-density lipoprotein （Ox-LDL）with severity and outcome of acute ischemic stroke （AIS）. Methods Serum of 141 AIS patients （AIS group） and 30 normal subjects （control group） were collected. Enzyme linked immunosorbent assay （ELISA） was used to test the level of serum Ox-LDL in two groups， the NIH Stroke Scale （NIHSS） were used to evaluate their neurological deficit on the first day of admission， and the Barthel Index （BI） were used to measure activities of daily living at sixth month. Results Ox-LDL level of AIS group was significantly higher than control group （P＜0.05）. Ox-LDL level of AIS group was correlated with NIHSS score （r=0.056， P＜0.05）， but not related to BI score （P＜0.05）. Conclusion Ox-LDL level of AIS patients is correlated with severity but not related to prognostic indicator.

Acute ischemic stroke； Ox-LDL； Severity； Outcome

R743.3

A

1674-4055（2016）04-0436-04

1730030 蘭州，蘭州大學第二醫(yī)院神經內科

葛朝明，E-mail：13893285120@163.com

10.3969/j.issn.1674-4055.2016.04.15