周麗萍，王 化，李夢(mèng)莎，何丹嬈，張 悅

（黑龍江省科學(xué)院自然與生態(tài)研究所，哈爾濱 150040）

野生軟棗獼猴桃的多酚含量及抗氧化能力研究

周麗萍，王 化，李夢(mèng)莎，何丹嬈，張 悅

（黑龍江省科學(xué)院自然與生態(tài)研究所，哈爾濱 150040）

以野生軟棗子獼猴桃果實(shí)為原料，通過(guò)有機(jī)溶劑提取，得到野生軟棗子獼猴桃的多酚提液。測(cè)得野生軟棗子獼猴桃的多酚含量為1.83±0.09mg/g鮮重，總還原力為3.97±0.29總還原力/g鮮重，野生軟棗獼猴桃多酚提取物0.1mg/mL對(duì)DPPH自由基的清除率可達(dá)到78.64±1.25%，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明野生軟棗子獼猴桃富含多酚類物質(zhì)，具有抗氧化、清除自由基的功效。

軟棗獼猴桃；多酚；抗氧化能力；清除自由基

軟棗獼猴桃（Actinidia argutaSieb.et Zucc.），又名軟棗子，獼猴梨，屬于獼猴桃科（Actinidiaceae）、獼猴桃屬（Actinidia）多年生落葉藤本植物。分布于黑龍江、吉林、山東、華北、西北及長(zhǎng)江流域各省區(qū)，朝鮮、日本、俄羅斯亦有分布［1］。以黑龍江省完達(dá)山南部、張廣才嶺及老爺嶺山地分布較多。野生軟棗獼猴桃營(yíng)養(yǎng)豐富，100g鮮果含蛋白質(zhì)2.52g、脂肪0.52g、糖類12.6g、有機(jī)酸1.95g、維生素C 532～930mg，含有20多種氨基酸，并且富含多糖、SOD及黃酮等活性物質(zhì)，具有抗衰老、提高免疫力、降血糖、預(yù)防心血管疾病等功能，是營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高的綠色野果［2-5］。

多酚是一類具有多元酚結(jié)構(gòu)，廣泛存在于植物體內(nèi)具有抗氧化、清除自由基、預(yù)防心血管疾病、抗腫瘤、延緩衰老等多種保健和藥理功能的植物源活性物質(zhì)。野生軟棗獼猴桃富含多酚類物質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)研究了野生軟棗獼猴桃的多酚含量及其多酚提取物的抗氧化活性，為野生軟棗獼猴桃資源進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

野生軟棗獼猴桃果實(shí)，采自黑龍江省張廣才嶺。沒(méi)食子酸標(biāo)品和1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）美國(guó)Sigma公司。鹽酸、氯化鉀、乙酸、乙酸鈉、鎢酸鈉、鉬酸鈉等所用試劑均為分析純。

1.2儀器與設(shè)備

紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)：UV-VisEVO300Thermo公司；電子天平：ALC-110北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；電熱恒溫水浴鍋：DK-98-1天津市泰斯特儀器有限公司。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1樣品前處理

取新鮮野生軟棗獼猴桃，洗凈、吸干水分，研磨后，準(zhǔn)確稱量1.0000g，用70%乙醇溶液定容到10mL，放入超聲波中，溫度35℃，功率100W，超聲提取30min，重復(fù)提取3次，合并提取液，備用。按上述操作進(jìn)行3組平行試驗(yàn)。

1.3.2多酚測(cè)定方法

采用福林酚比色的方法，標(biāo)準(zhǔn)曲線參照參考文獻(xiàn)［6］。樣品測(cè)定，取1.0mL樣品提取液，按文獻(xiàn)操作進(jìn)行3組平行試驗(yàn)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出含量，按公式（1）計(jì)算每克野生軟棗獼猴桃果實(shí)中的多酚含量，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

其中（1）式中：C為根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的多酚含量（ug）；m為樣品質(zhì)量（g）。

1.3.3抗氧化活性測(cè)定方法

總還原能力的測(cè)定選取Tsai等［7］采用的是鐵氰化鉀還原顯色法，結(jié)果以總還原力/g表示，結(jié)果根據(jù)公式（2）進(jìn)行計(jì)算。

其中（2）式中：A0為以蒸餾水為對(duì)照的空白組吸光度值；A1為樣品組吸光度值；m為樣品質(zhì)量（g）。

DPPH自由基清除能力測(cè)定方法按照Blois［8］的方法測(cè)定。平行測(cè)定3次，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。DPPH自由基清除率根據(jù)公式（3）進(jìn)行計(jì)算。

其中（3）式中，A0為以乙醇為對(duì)照的空白組吸光度值；A1為樣品組吸光度值；A2為樣品對(duì)照組的吸光度值。

2　結(jié)果與分析

2.1多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線建立及多酚含量結(jié)果

根據(jù)多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線建立方法，以吸光度為縱坐標(biāo)，沒(méi)食子酸含量（μg）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如圖1。

圖1　多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of polyphenols

回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：y=0.011x+0.005，其中R2=0.999，說(shuō)明方程線性關(guān)系良好。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和公式得到野生軟棗獼猴桃的多酚含量為：1.83± 0.09mg/g鮮重。蘋果中多酚含量為1.031mg/g干重［6］，蘋果的含水率一般在80%以上，折合成鮮重，野生軟棗子獼猴桃中多酚含量是蘋果中多酚含量的10倍。由此可見(jiàn)，日常飲食中食用同樣重量的野生軟棗子獼猴桃可以比食用蘋果獲得更多的多酚類物質(zhì)。

2.2抗氧化活性測(cè)定結(jié)果

還原能力是衡量抗氧化能力的重要指標(biāo)，具有還原性的物質(zhì)可以發(fā)生氧化反應(yīng)，從而保護(hù)其他物質(zhì)，達(dá)到抗氧化的目的。野生軟棗獼猴桃多酚提取物的總還原力平行測(cè)定3次，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。由表2可見(jiàn)，野生軟棗獼猴桃的還原能力為3.97±0.29總還原力/g鮮重，表明野生軟棗獼猴桃具有很強(qiáng)的抗氧化能力。

表1　野生軟棗獼猴桃的總還原力和清除DPPH自由基能力Tab.1 Total reducing capacity and DPPH radical scavenging activity ofActinidia arguta

DPPH自由基是一種體外自由基，主要來(lái)自環(huán)境、大氣污染，從而對(duì)人體造成傷害。野生軟棗獼猴桃多酚提取物0.1mg/mL對(duì)DPPH自由基的清除率就可以達(dá)到78.64±1.25%，表明野生軟棗獼猴桃多酚可以抑制由于環(huán)境污染等而產(chǎn)生的自由基對(duì)人體造成的傷害。

3　結(jié)論

通過(guò)本研究表明，野生軟棗獼猴桃富含多酚類物質(zhì)，是天然多酚獲取的良好原料。野生軟棗獼猴桃具有抗氧化、清除自由基的功效。日常膳食中多食用野生軟棗獼猴桃可以獲得天然植物多酚，保護(hù)機(jī)體免受自由基的侵害，起到抗氧化延緩衰老等作用。

［1］ 李坤明，胡忠榮，陳偉.昭通地區(qū)野生獼猴桃資源及其利用評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)野生植物資源，2006，25（2）：39-41.

［2］ 梁攀，李書倩，張博，等.野生軟棗獼猴桃中脂肪酸成分分析［J］.食品科學(xué)，2011，32（2）：237-239.

［3］ 潘松，劉長(zhǎng)江，梁爽.軟棗獼猴桃多糖的分離與純化及其分子質(zhì)量的測(cè)定［J］.食品科學(xué)，2012，33（15）：66-70.

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［6］ 周麗萍，楊瑞華，張悅.響應(yīng)面法優(yōu)化研磨珠輔助超聲波萃取蘋果多酚的工藝研究［J］.食品工業(yè)科技，2012，33（21）：277-281.

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［8］ Blois MS.Antioxidant determinations by the use of a stable free radical［J］. Nature，2002，（26）：1199-1200.

Research on the polyphenol content and the antioxidant capacity of wild Actinidia arguta

ZHOU Li-ping，WANG Hua，LI Meng-sha，HE Dan-rao，ZHANG Yue
（Institute of Natural and Ecology，Heilongjiang Academy of Sciences，Harbin 150040，China）

The polyphenol extract was extarcted from fruits of wildActinidia argutaby an organic solvent.The polyphenol content and the total reducing power of the extract was 1.83±0.09mg/g fresh weight and 3.97±0.29/g fresh weight，respectively.The DPPH radical scavenging rate of the polyphenol extracts reached 78.64±1.25%when the extract concentration was 0.1mg/mL.The results showed that wildActinidia argutais rich in polyphenols，and have antioxidant and free radical scavenging effect.

Actinidia arguta；Polyphenol；Antioxidant；Free radical scavenging

TS201.2

A

1674-8646（2016）12-0014-02

2016-05-17

黑龍江省科學(xué)院院基金項(xiàng)目“藍(lán)靛果花色苷抗氧化功能及其構(gòu)效關(guān)系研究”（2014）

周麗萍（1976-），女，吉林長(zhǎng)嶺人，博士研究生，助理研究員，從事植物活性成分研究。

張悅（1962-），男，黑龍江哈爾濱人，學(xué)士，研究員，從事植物學(xué)研究，e-mail∶zyszy1962@163.com。