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        TGF—β/smad蛋白在大鼠高氧肺損傷中的表達及意義

        2016-08-19 15:45:43楊軍廖志勇巨容
        中國實用醫(yī)藥 2016年21期

        楊軍+廖志勇+巨容

        【摘要】 目的 探討TGF-β/smad蛋白在大鼠高氧肺損傷中的表達及意義, 探求高氧肺損傷的原因以及TGF-β/smad蛋白的表達及其作用。方法 60只10 d日齡的大鼠, 隨機分為實驗組和對照組, 實驗組大鼠讓其處于95%氧氣的高氧環(huán)境下暴露7 d, 而對照組在正常的空氣環(huán)境下暴露7 d, 觀察檢測大鼠的肺情況, TGF-β/smad蛋白, 肺組織LKB1、TGF-β1、psmad2蛋白的表達和分布, 分析蛋白的表達和意義。結(jié)果 與對照組比較, 實驗組的肺組織LKB1、TGF-β1、psmad2蛋白下降明顯, 呈高表達, 實驗組肺組織中LKB1與TGF-β1蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.474, P=0.04), TGF-β1與psmad2蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.491, P=0.033) 結(jié)論 TGF-β/smad蛋白可以作為判斷高氧的肺損傷的損害程度和判預(yù)后的一種重要指標(biāo), 并且受到信號分子的調(diào)控, 在高氧的情況下, 可影響肺功能的正常情況, 并對肺部產(chǎn)生損傷。

        【關(guān)鍵詞】 TGF-β/smad蛋白;高氧肺損傷;表達及意義

        DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.21.200

        現(xiàn)階段人們經(jīng)常有肺損傷的情況,而其中的原因可能由于細胞、細胞因子和炎癥介質(zhì)構(gòu)成的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的失控, 而導(dǎo)致肺內(nèi)皮細胞肺泡的上皮間質(zhì)細胞等靶細胞受到影響而不能正常接收信號出現(xiàn)障礙, 而TGF-β/smad蛋白則在其中擔(dān)當(dāng)了很大一部分的效果, 醫(yī)療護理的工作者需要盡自己的工作的責(zé)任[1], 發(fā)現(xiàn)TGF-β/smad蛋白在大鼠高氧肺損傷中的表達及意義并且能在后續(xù)的研究中發(fā)現(xiàn)治療方法讓患者盡快康復(fù), 研究蛋白情況與高氧肺損傷關(guān)系, 發(fā)現(xiàn)新的思路等作出探索, 現(xiàn)報告如下。

        1 材料與方法

        1. 1 標(biāo)本來源 選擇60只10 d日齡的大鼠, 隨機分為實驗組和對照組, 各30只。采集大鼠的體重、身長等數(shù)據(jù)并記錄, 制備高氧肺損傷的模型, 使用一個容量適當(dāng)?shù)乃芰先萜鳎?并且在塑料箱中防治一臺測氧儀, 時刻監(jiān)控氧氣含量濃度, 當(dāng)大鼠放入塑料瓶內(nèi)時, 由于呼吸作用會有二氧化碳產(chǎn)生, 在塑料容器內(nèi)放入石灰吸附, 并保持塑料箱的溫度與濕度適中。實驗組大鼠體重30.6~42.3 g, 身長21.3~26.3 cm, 對照組體重29.8~40.1 g, 身長20.2~24.8 cm, 兩組大鼠體重、身長等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05), 具有可比性。

        1. 2 方法 實驗組大鼠稱重、做好標(biāo)記, 記錄數(shù)據(jù)之后放置于高氧濃度的容器中連續(xù)7 d, 而對照組置于空氣中, 其他環(huán)境都不變, 同樣放置7 d, 之后在同一時間對每只大鼠稱重并重新測量身長, 之后處死, 剪開胸腔并觀察, 采用氯胺酮腹腔麻醉, 常規(guī)消毒鋪巾, 沿胸骨中線打開胸腔, 剔除結(jié)締組織和脂肪組織、氣管支氣管及其他非肺組織成分, 取出大鼠的肺臟肺組織, 完整地取出之后肉眼觀察, 并使用生理鹽水沖洗, 觀察之后在甲醛溶液中固定, 做病理解剖切片, 使用活性酶等物質(zhì)做標(biāo)記顯色等, 并做好陰性陽性對照, 采取不用制作的單克隆抗體, 都是相同的品種。采用專業(yè)圖像軟件對其進行分析, 并且測定相關(guān)值[3]。

        1. 3 判定標(biāo)準(zhǔn) 在同一時間, 對于制作成功的每種切片在顯微鏡下依次觀察, 在不同視野下觀察, 陽性的細胞所測得的百分數(shù)<5%則判定為為陰性, 5%~20%是弱陽性, 20%~75%是純陽性, 而>75%則判定為強陽性。

        1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗;計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        60只大鼠接受實驗測定后, 在與對照組比較, 實驗組的肺組織LKB1、TGF-β1、psmad2蛋白下降明顯, 呈高表達, 并且TGF-β/smad蛋白的含量以及變化情況在高氧肺損傷中有顯著的意義。實驗組肺組織中LKB1與TGF-β1蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.474, P=0.04), TGF-β1與psmad2蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.491, P=0.033)

        3 討論

        TGF-β/smad蛋白可以作為判斷高氧下肺損傷的損害程度和預(yù)后的一種重要指標(biāo)[4]。實驗測定之后, 發(fā)現(xiàn)兩組大鼠在各自環(huán)境中生長發(fā)育之后, 大鼠的體重和身長都有所減少說明生長滯后, 并且肉眼觀察肺組織發(fā)生損害。轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β) 通路主要由TGF-β配體、Ⅰ型Ⅱ型受體和smad蛋白介導(dǎo)。并且在TGF-β/smad蛋白關(guān)系通路之下參加上皮細胞生長過程, 而肺組織的上皮細胞與受體結(jié)合之后需要將信號傳送才能繼續(xù)進行合成轉(zhuǎn)錄等, TGF-β通路可促進細胞增殖,并且在一定時候也有抑制的作用, 有時分泌過少則導(dǎo)致細胞過度增殖、增生, LKB1可以調(diào)節(jié)VEGF的水平導(dǎo)致大鼠通路抑制受到抑制而生長停滯。實驗組肺組織中LKB1與, TGF-β1蛋白表達呈正相關(guān), (r=0.474, P=0.04), TGF-β1與psmad2蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.491, P=0.033), 提示LKB1缺失間質(zhì)中, TGF-β1分泌降低, SIK可以負向調(diào)控TGF通路, 間接指出LKB1與TGF通路的相互關(guān)系, 然而LKB1與TGF蛋白相互作用的具體機制仍不明確, 需進行進一步研究。

        參考文獻

        [1] KatajistoP, VaahtomeriK, EkmanN, et al. LKB1 signaling in mesenchymal cells required for suppression of gastrointestinal polyposis. NatGenet, 2008, 40(4):455-459.

        [2] 雷玲, 鐘小寧. Th17與TGFβ1的關(guān)系及在肺纖維化中的作用. 實用醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 29(4):671-673.

        [3] 徐麗娜, 劉倩, 王建海. IL-31與TGF-131在小鼠肺纖維化過程中的表達及關(guān)系.菏澤醫(yī)學(xué)??茖W(xué)校學(xué)報, 2011, 23(4):1-3.

        [4] 李莉, 李燕芹.格列衛(wèi)對肺纖維化小鼠的干預(yù)機制.中國呼吸與危重監(jiān)護雜志, 2009, 8(4):365-370.

        [收稿日期:2016-03-04]

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