劉　麗，楊文東

(1.東營市東營區(qū)婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心，山東 東營　257091；2.東營市利津縣第二人民醫(yī)院，山東 東營　257447)

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·經(jīng)驗(yàn)與總結(jié)·

圍生期孕婦生殖道B族鏈球菌感染與耐藥性分析

劉麗1，楊文東2

(1.東營市東營區(qū)婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心，山東 東營257091；2.東營市利津縣第二人民醫(yī)院，山東 東營257447)

目的：分析圍生期孕婦生殖道B族鏈球菌(GBS)的感染與耐藥性，為臨床醫(yī)師制定有效的預(yù)防和治療措施提供依據(jù)。方法：對795例圍生期孕婦生殖道分泌物進(jìn)行GBS培養(yǎng)鑒定與藥敏試驗(yàn)，分析試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果：795例孕婦中共檢出GBS攜帶者256例，帶菌率32.20%。<30歲組(28.88%)與≥30歲組(42.35%)的帶菌率具顯著性差異(P<0.01)。GBS陽性者與陰性者的臨床癥狀發(fā)生率(18.75%、7.98%)也具有顯著性差異(P<0.01)；萬古霉素、利奈唑胺、青霉素等10種抗菌藥物的耐藥率為0%～58.1%，D-抑菌圈試驗(yàn)陽性率為23.9%。結(jié)論：本研究中圍生期孕婦GBS帶菌率較高，以高齡者易于感染，感染GBS者對萬古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨芐西林、頭孢曲松及呋喃妥因敏感率高(89.8%～100.0%)。

B族鏈球菌；圍生期孕婦；帶菌率；藥敏試驗(yàn)

優(yōu)先數(shù)字出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20160624.1117.006.html

B族鏈球菌(group BStreptococcus，GBS)也稱無乳鏈球菌，是一種β溶血的需氧革蘭陽性鏈球菌。GBS主要定植于人的陰道和肛門周圍，此區(qū)域的GBS是孕婦和新生兒感染的主要致病菌之一。大部分新生兒感染GBS與母嬰垂直傳播關(guān)系密切[1]。GBS可導(dǎo)致孕婦的泌尿系統(tǒng)感染、產(chǎn)褥感染及產(chǎn)后敗血癥等，還與孕婦胎膜早破[2]、早產(chǎn)、晚期流產(chǎn)以及胎兒生長受限、新生兒感染等一系列母嬰不良結(jié)局有關(guān)，GBS是圍生期感染的首要致病菌之一[3]。為了降低圍生期孕婦感染及不良妊娠結(jié)局，應(yīng)采取積極有效的預(yù)防和治療措施。本研究對圍生期孕婦生殖道GBS的感染與耐藥性進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1研究對象2013年1月至2015年2月，選擇在門診就診或產(chǎn)科住院的圍生期孕婦795例。孕期35～37周，年齡21～38歲，其中：≥30歲組196例，<30歲組599例。排除2周內(nèi)有抗生素?cái)z入史和(或)并發(fā)復(fù)雜內(nèi)科疾病的孕婦。本研究取得所有孕婦的知情同意，符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)要求。

1.2試劑與儀器 哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基和5%綿羊血Mueller-Hinton(MH)瓊脂培養(yǎng)基均為上?？片敿挝⑸锛夹g(shù)有限公司產(chǎn)品，菌株鑒定采用法國生物梅里埃公司VITEK2全自動細(xì)菌鑒定分析儀及配套的相關(guān)鑒定和藥敏卡片(萬古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨芐西林、頭孢曲松、呋喃妥因、左氧氟沙星、克林霉素、紅霉素及四環(huán)素)。質(zhì)控菌株為肺炎鏈球菌ATCC49619，購于衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。D-抑菌圈試驗(yàn)使用英國OXOID公司的紙片(15 μg紅霉素紙片和2 μg克林霉素紙片)。

1.3方法 標(biāo)本采集：由婦產(chǎn)科醫(yī)生采集生殖道分泌物標(biāo)本，孕婦在取樣前2周內(nèi)未使用任何抗菌藥物，取樣部位未使用過栓劑和洗液，不作清潔處理，使用消毒窺器(未經(jīng)濕潤的)擴(kuò)張陰道，以無菌棉拭子涂擦陰道下1/3分泌物，30 min內(nèi)送檢。試驗(yàn)方法：送檢的無菌棉拭子接種于哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基上，在35 ℃的5% CO2培養(yǎng)箱中孵育18～24 h。觀察血平板上菌落特點(diǎn)，挑選、挑取可疑菌落，在血平板上進(jìn)行分純培養(yǎng)。然后再進(jìn)行涂片、革蘭染色鏡檢、菌株鑒定及藥敏試驗(yàn)。鑒定方法按全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行[4]，判讀標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)2012年美國臨床試驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)M100-S22文件[5]。對紅霉素耐藥和克林霉素敏感或中介的GBS菌株采用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行D-抑菌圈試驗(yàn)，培養(yǎng)基為MH瓊脂，紙片間距離12 mm，置35 ℃的5%CO2培養(yǎng)箱中孵育20～24 h。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用配對χ2檢驗(yàn)。

2　結(jié)　　果

2.1圍生期孕婦GBS帶菌率795例孕婦中共檢出GBS攜帶者256例，帶菌率32.20%。256例GBS陽性者中，<30歲者173例，≥30歲者83例，<30歲組孕婦GBS帶菌率28.88%(173/599)，≥30歲組孕婦GBS帶菌率42.35%(83/196)，2組的帶菌率具顯著性差異(χ2=19.095，P<0.01)。

2.2臨床表現(xiàn)本研究以具有陰道分泌物增多、尿頻和陰道瘙癢3種臨床癥狀中1種或以上判為具有GBS定植的臨床表現(xiàn)。256例GBS陽性者中，48例具有臨床癥狀，發(fā)生率為18.75%；539例GBS陰性者中43例具有臨床癥狀，發(fā)生率為7.98%，兩者的臨床癥狀發(fā)生率具顯著性差異(χ2=39.514，P<0.01)。

2.3圍生期孕婦感染GBS的耐藥性分析256株GBS陽性標(biāo)本全部進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，10種抗菌藥物耐藥率見表1。以萬古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨芐西林、頭孢曲松及呋喃妥因敏感率為高(89.8%～100.0%)。

表1　256例圍生期孕婦感染GBS的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.4D-抑菌圈試驗(yàn)結(jié)果256株GBS中對紅霉素耐藥、克林霉素敏感或中介的菌株共71株，其中17株D-抑菌圈試驗(yàn)陽性，陽性率為23.94%。

3　討　　論

GBS是一種條件致病菌。當(dāng)機(jī)體內(nèi)環(huán)境紊亂或微生態(tài)平衡遭到破壞時(shí)，可發(fā)生感染，引起人類的多種疾病。妊娠期GBS可導(dǎo)致母嬰感染，是新生兒敗血癥、肺炎和腦膜炎最常見的病因[6-7]。陰道分泌物增多、尿頻和陰道瘙癢是GBS定植孕婦最常見的3種臨床癥狀。本研究GBS陽性者臨床癥狀發(fā)生率顯著高于GBS陰性者，但僅據(jù)臨床癥狀難以確診GBS感染。

試驗(yàn)室診斷GBS感染最經(jīng)典的常規(guī)方法是細(xì)菌培養(yǎng)，不足之處是GBS的分離培養(yǎng)與鑒別診斷的操作過程較為復(fù)雜，耗時(shí)較長；血清學(xué)GBS檢測可短時(shí)間內(nèi)獲得結(jié)果，不足之處是假陰性率和假陽性率高。2者在臨床應(yīng)用時(shí)均受到限制。熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(FQ-PCR)檢測GBS，具有快速、準(zhǔn)確及敏感性高的特點(diǎn)[8-10]，目前只有三級醫(yī)院開展此項(xiàng)目檢測。對于條件較差的二級醫(yī)院，細(xì)菌培養(yǎng)仍是診斷GBS感染的常規(guī)方法。

為了有效降低圍生期感染率，應(yīng)對孕婦進(jìn)行GBS篩查。GBS帶菌率的檢測受檢測方法、采集部位、采集時(shí)間、種族等的影響，在不同的國家、不同的地區(qū)差異性較大。如我國北京地區(qū)孕婦帶菌率為7.10%[11]，上海地區(qū)孕婦帶菌率為3.70%[12]，桂林地區(qū)為7.50%[13]、江西地區(qū)為8.76%[14]、秦皇島地區(qū)為9.50%[15]、南京地區(qū)為4.2%[16]。本研究采用細(xì)菌培養(yǎng)方法對本地795例孕婦進(jìn)行了檢測，總帶菌率為32.2%，明顯高于以上地區(qū)，與漢中地區(qū)的36.0%相近[17]。其中≥30歲組孕婦GBS帶菌率顯著高于<30歲組，可能原因?yàn)椋骸?0歲婦女較<30歲婦女存在性生活活躍、發(fā)生人工流產(chǎn)的概率高、人數(shù)多，以及妊娠期雌激素水平較高等。上述因素均可導(dǎo)致生殖道細(xì)菌的微環(huán)境發(fā)生改變，使得≥30歲孕婦生殖道中的GBS易于生存與繁殖。

對GBS攜帶孕婦應(yīng)采取積極有效的預(yù)防和治療措施。有效的抗生素可治療圍生期孕婦感染GBS，減少新生兒感染及降低新生兒死亡率[18]。美國疾控中心推薦青霉素G、氨芐青霉素預(yù)防性治療妊娠期GBS，對青霉素變態(tài)反應(yīng)者可以采用克林霉素或紅霉素[18]。本研究分離出的256株GBS對10種抗菌藥物耐藥率為0%～58.1%。其中，萬古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨芐西林、頭孢曲松及呋喃妥因的敏感率為89.8%～100.0%，左氧氟沙星、克林霉素、紅霉素及四環(huán)素的敏感率為18.9%～69.9%，與國內(nèi)相關(guān)研究敏感率一致[19-20]。臨床治療圍生期孕婦感染GBS可根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇、調(diào)整使用敏感藥物，對預(yù)防、控制圍生期孕婦感染GBS是很有必要的。國內(nèi)高晶等[21]推薦分娩期婦女預(yù)防GBS感染可使用青霉素或氨芐西林。

綜上所述，本研究中圍生期孕婦GBS帶菌率較高，高齡孕婦易于感染GBS，敏感藥物為萬古霉素、利奈唑胺、青霉素、氨芐西林、頭孢曲松和呋喃妥因，此為更加準(zhǔn)確有效地治療GBS感染提供了依據(jù)。孕齡期攜帶GBS的婦女，其圍生期可感染GBS或加重感染，應(yīng)積極采取有效的預(yù)防與治療措施。

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Group BStreptococcusInfection in Genital Tract of Perinatal Pregnant Women and its Drug Resistance Analysis

LIU Li1， YANG Wendong2

(1.Maternal and Child Health Care of Family Planning Service Center of Dongying District， Shandong Dongying 257091，China; 2.Second People’s Hospital of Lijin County， Dongying， Shandong 257447，China)

Objective:To analyze the group BStreptococcus(GBS) infection in genital tract of perinatal pregnant women and its drug resistance， and to provide a reference for treating and preventing this infection. Methods: From January 2013 to February 2015， the vaginal secretions were sampled from 795 perinatal pregnant women for culture of GBS; the final results were statistically analyzed. Results: In 795 pregnant women， there were 256 GBS carriers; the germ-carrying rate was 32.20%. There was a significant difference in the germ-carrying rate between < 30 years old group (28.88%) and ≥ 30 years old group (42.35%)(χ2=19.095，P<0.01).The incidence of clinical symptoms between GBS negative cases and GBS positive ones (18.75%， 7.98%) also had statistical difference(χ2=39.514，P<0.01). The antimicrobial resistant rate of vancomycin， linezolid，penicillin，ampicillin，ceftriaxone， nitrofurantoin，levofloxacin， clindamycin，erythromycin and tetracycline to GBS was 0，0，0.6%，3.1%，6.6%，9.6%，21.9%，23.8%，29.9% and 58.1%，respectively. The positive rate of D-bacteriostatic ring test was 23.9%. Conclusion: The GBS-carrying rate of perinatal pregnant women is higher in this region， and the elderly is relatively vulnerable. GBS are highly sensitive to vancomycin， linezolid， penicillin， ampicillin， ceftriaxone and nitrofurantoin in perinatal pregnant women.

group BStreptococcus(GBS); perinatal pregnant women; germ-carrying rate; drug sensitive test

2015-09-06)

楊文東，yangwendong007@126.com

R714.7；R446.5

A

10.11851/j.issn.1673-1557.2016.04.009