肖　莉　萬(wàn)義增　高　月　孫雪竹　李亞娟　張　歡

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧　錦州　121000)

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子宮內(nèi)膜樣腺癌中基質(zhì)金屬蛋白酶14和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)及意義

肖莉萬(wàn)義增1高月2孫雪竹李亞娟張歡

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧錦州121000)

目的針對(duì)子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-14和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá)特征及相關(guān)性進(jìn)行研究，旨在探討二者的關(guān)系及臨床病理意義。方法子宮內(nèi)膜樣腺癌根治手術(shù)的56例患者作為觀(guān)察組，收集術(shù)后的蠟塊組織及臨床資料，25例非腫瘤性的子宮內(nèi)膜作為對(duì)照組。應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)兩組中MMP-14和VEGF的表達(dá)。結(jié)果兩組中MMP-14和VEGF表達(dá)的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀(guān)察組中MMP-14和VEGF的表達(dá)均與肌層浸潤(rùn)深度和宮頸累犯密切相關(guān)。MMP-14的表達(dá)與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。二者均與年齡和分化程度無(wú)相關(guān)性。線(xiàn)性相關(guān)分析顯示觀(guān)察組中MMP-14和VEGF的表達(dá)具有正相關(guān)性。結(jié)論MMP-14和VEGF在子宮內(nèi)膜樣腺癌中表達(dá)升高，二者有一定的協(xié)同作用，對(duì)腫瘤性病變的形成和進(jìn)展有一定價(jià)值。

子宮內(nèi)膜樣腺癌；基質(zhì)金屬蛋白酶14；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；免疫組化

子宮內(nèi)膜樣腺癌是原發(fā)于上皮性的惡性腫瘤，常伴有腺體的分化，具有浸潤(rùn)子宮肌層及遠(yuǎn)處擴(kuò)散的潛能，其常見(jiàn)于中老年人。本病是基于間質(zhì)血管生成的腫瘤，病變的形成和進(jìn)展與血管形成的因素緊密聯(lián)系在一起〔1〕。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是血管形成蛋白，其高表達(dá)與缺氧或腫瘤刺激因子有直接關(guān)系，并可以促進(jìn)腫瘤間質(zhì)血管生成，為腫瘤細(xì)胞提供更多的氧和營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)腫瘤增生和進(jìn)展〔2〕。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-14也稱(chēng)膜型MMP-1，是家族中的重要成員，其異常表達(dá)與多種惡性腫瘤密切相關(guān)〔3〕。本研究觀(guān)察子宮內(nèi)膜樣腺癌中MMP-14和VEGF的表達(dá)，探討其臨床意義及相關(guān)性。

1　資料與方法

1.1一般資料2014～2016年我院子宮內(nèi)膜樣腺癌并進(jìn)行根治手術(shù)的患者作為觀(guān)察組，臨床資料齊全，并留取術(shù)后的蠟塊組織。共觀(guān)察56例，年齡37～83歲，平均58.7歲。均再次經(jīng)病理醫(yī)師閱片復(fù)查，并符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)及分型。25例因子宮肌瘤行子宮全切標(biāo)本的子宮內(nèi)膜組織(非腫瘤性的子宮內(nèi)膜)作為對(duì)照組，年齡45～70歲，平均56.5歲。兩組一般資料無(wú)明顯差別，具有可比性。

1.2免疫組化檢測(cè)MMP-14和VEGF的表達(dá)觀(guān)察組及對(duì)照組術(shù)后標(biāo)本均用甲醛液固定、石蠟包埋，切片后，應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)兩組中MMP-14和VEGF的表達(dá)，行二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。操作均經(jīng)同一名技師完成，減少誤差，做好實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制。

1.3MMP-14和VEGF結(jié)果的判定方法MMP-14和VEGF的陽(yáng)性部位均定位于細(xì)胞質(zhì)中，以染成淺棕黃色-深棕褐色為陽(yáng)性。選擇5個(gè)上皮細(xì)胞集中的高倍視野(400倍)進(jìn)行觀(guān)察并計(jì)數(shù)。MMP-14和VEGF的陽(yáng)性結(jié)果按兩個(gè)指標(biāo)進(jìn)行評(píng)定：①陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)：<5% 0分；5%～25% 1分，26%～50% 2分，51%～75% 3分，≥76% 4分。②染色強(qiáng)度：無(wú)色為0分；淺棕黃色顆粒狀為1分；棕黃色顆粒狀為2分；深棕褐色顆粒狀為3分。最終結(jié)果為二者相乘。0～4分為陰性，5～12分為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SAS7.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線(xiàn)性相關(guān)性分析。

2　結(jié)　果

2.1兩組MMP-14和VEGF陽(yáng)性率的比較觀(guān)察組MMP-14和VEGF表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組。見(jiàn)表1。

2.2觀(guān)察組不同臨床病理特征中MMP-14和VEGF陽(yáng)性率的比較見(jiàn)表2。觀(guān)察組中MMP-14和VEGF的表達(dá)均與肌層浸潤(rùn)深度和宮頸累犯密切相關(guān)。MMP-14的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。二者均與年齡和分化程度無(wú)相關(guān)性。

2.3觀(guān)察組中MMP-14和VEGF的相關(guān)性觀(guān)察組中MMP-14和VEGF具有正相關(guān)性(r=0.47,P=0.041 3)。

表2　觀(guān)察組不同臨床病理特征中MMP-14和VEGF陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

3　討　論

子宮內(nèi)膜樣腺癌在發(fā)達(dá)國(guó)家常見(jiàn)，在我國(guó)的發(fā)病率也呈上升趨勢(shì)。雌激素依賴(lài)性腫瘤占的比例高〔4〕。一般來(lái)說(shuō)，雌激素依賴(lài)性腫瘤的級(jí)別低，常表現(xiàn)為高分化或中分化。此類(lèi)患者常有肥胖、糖尿病、未經(jīng)產(chǎn)、高血壓、絕經(jīng)晚的特征。上述均是子宮內(nèi)膜癌形成的誘因，在這些因素的作用下可以引起腫瘤性的增殖，而腫瘤性增殖過(guò)程中其間質(zhì)的血管生成是重要的。腫瘤間質(zhì)豐富的血管生成，不僅可以為腫瘤的快速生長(zhǎng)提供充分的營(yíng)養(yǎng)，還可以為腫瘤細(xì)胞經(jīng)血道播散提供重要的條件，即脈管侵犯。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤血管生成中主要以血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖為主，在腫瘤生長(zhǎng)的活躍期，血管生長(zhǎng)迅速，其主要為血管的出芽樣生長(zhǎng)，此時(shí)血管無(wú)功能，在血流的沖擊作用下可以形成管腔，此時(shí)具有血管的形態(tài)和血管的功能〔5,6〕。VEGF是由兩條相對(duì)分子量為23 000單鏈組成的蛋白質(zhì)，也是目前研究界公認(rèn)的研究較為深入的促血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，對(duì)腫瘤基質(zhì)血管形成及腫瘤生物學(xué)行為均有重要的影響，VEGF的表達(dá)與腫瘤的預(yù)后有一定關(guān)系〔7,8〕。VEGF能直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，尤其是CD31、CD34陽(yáng)性的血管內(nèi)皮細(xì)胞，引起內(nèi)皮細(xì)胞的有效增殖。MMPs家族成員具有同源性，可以有效地降解細(xì)胞外的基質(zhì)成分和基底膜〔9,10〕。MMP-14是家族的重要成員，不僅可以對(duì)家族中MMP-2等明膠酶進(jìn)行有效活化，發(fā)揮降解細(xì)胞外基質(zhì)的作用，還可以促進(jìn)細(xì)胞的遷移及血管的生成〔11〕。

本研究提示MMP-14和VEGF高表達(dá)是子宮內(nèi)膜樣腺癌區(qū)別于正常子宮內(nèi)膜的重要特征，也提示MMP-14和VEGF可能為子宮內(nèi)膜樣腺癌的癌基因，具有明顯促進(jìn)腫瘤性病變的作用〔12〕。

本文結(jié)果提示MMP-14和VEGF高表達(dá)對(duì)腫瘤的浸潤(rùn)有明顯作用，同時(shí)浸潤(rùn)過(guò)程中對(duì)宮頸的侵襲及周?chē)M織的侵犯有重要的促進(jìn)作用。MMP-14高表達(dá)是腫瘤淋巴道播散的重要促進(jìn)蛋白。MMP-14和VEGF二者具有一定的協(xié)同正向作用。MMP-14促進(jìn)腫瘤間質(zhì)血管生成的作用與促進(jìn)腫瘤血管內(nèi)皮的繁殖有關(guān)，同時(shí)MMP-14高表達(dá)后可以在一定程度上使VEGF的分泌增加，對(duì)促進(jìn)血管生成有更加直接的促進(jìn)作用〔13,14〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示MMP-14和VEGF可能不參與細(xì)胞的分化過(guò)程中。MMP-14可能作為上游基因，對(duì)VEGF有一定的調(diào)節(jié)作用，有效促進(jìn)腫瘤間質(zhì)中新生血管的形成〔15,16〕。VEGF高表達(dá)后，也能增加毛細(xì)血管壁的通透性，有利于細(xì)胞間物質(zhì)的傳遞，更加特異性地促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖，改變內(nèi)皮細(xì)胞基因的表達(dá)方式，增加微血管的新生。

總之，MMP-14和VEGF在子宮內(nèi)膜樣腺癌中表達(dá)升高，二者有一定的協(xié)同作用，對(duì)病變的形成和進(jìn)展均有一定價(jià)值。

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〔2015-02-15修回〕

(編輯苑云杰)

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.14.056

肖莉(1971-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事婦科腫瘤及產(chǎn)科危重癥研究。

R737.33

A

1005-9202(2016)14-3472-03；

1遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院病理科

2遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科