董秋霞　潘賢英　馬吉成　南　征　李　葉　賀文財(cái)

(青海省第五人民醫(yī)院(青海省腫瘤醫(yī)院)腫瘤一科，青海　西寧　810007)

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DC-CIK細(xì)胞免疫治療聯(lián)合PC化療方案對(duì)晚期肺腺癌患者的治療效果

董秋霞潘賢英馬吉成南征李葉賀文財(cái)

(青海省第五人民醫(yī)院(青海省腫瘤醫(yī)院)腫瘤一科，青海西寧810007)

目的探討DC-CIK聯(lián)合PC方案化療對(duì)晚期肺腺癌的臨床療效。方法52例晚期肺腺癌患者,隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組各26例。治療組采用DC-CIK回輸聯(lián)合PC化療的方案,對(duì)照組只采用全身化療方案。比較兩組患者治療前后的免疫細(xì)胞水平、臨床效果、不良反應(yīng)及生活質(zhì)量。結(jié)果治療后，對(duì)照組患者體內(nèi)CD3+、CD3+CD4+及CD3+CD8+，CD3+CD56+細(xì)胞比例明顯下降，而治療組患者CD3+、CD3+CD4+及CD3+CD8+細(xì)胞比例較治療前無(wú)顯著變化，CD3+CD56+細(xì)胞比例顯著上升，且與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療組的客觀緩解率(ORR)及疾病控制率(DCR)均高于對(duì)照組，其中DCR在兩組間差異顯著(P<0.05)。治療組出現(xiàn)體力下降及食欲降低的患者比例顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，而兩組間抑郁、低質(zhì)量睡眠以及體重減輕患者的比例無(wú)明顯差異(P>0.05)；治療組患者出現(xiàn)Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制及惡心嘔吐的發(fā)生率均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論臨床上治療晚期肺腺癌時(shí)使用DC-CIK細(xì)胞免疫治療聯(lián)合PC化療的方案可以提高治療效果，解決化療后免疫功能下降的問(wèn)題,提高患者的生活質(zhì)量。因而該方案有在臨床上廣泛應(yīng)用的潛力，需要更多的研究對(duì)療效進(jìn)行確認(rèn)。

細(xì)胞免疫治療；樹(shù)突細(xì)胞；細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞；晚期肺腺癌

肺癌的臨床治療仍處于瓶頸期〔1〕。惡性腫瘤的治療更強(qiáng)調(diào)提高患者生存質(zhì)量，要求高效、低毒、耐受性好的治療方式。細(xì)胞免疫治療因其副作用小，療效明確，且能夠提高患者對(duì)化療藥物的耐受性以及患者化療后的生活質(zhì)量，而成為目前腫瘤治療界的研究熱點(diǎn)。本研究采用臨床實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)樹(shù)突狀殺傷細(xì)胞(DC-CIK)免疫治療聯(lián)合PC方案化療對(duì)晚期肺腺癌患者的臨床療效。

1　材料與方法

1.1研究對(duì)象經(jīng)細(xì)胞學(xué)及組織學(xué)相關(guān)檢查確診的晚期肺腺癌患者。52例，其中男28例，女24例；年齡52～77(平均65.8)歲；卡氏評(píng)分(KPS)50～70，平均55.6分；臨床分期包括ⅢA期17例，ⅢB期21例，Ⅳ期14例。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有其他惡性腫瘤患者；②預(yù)期生存期低于3個(gè)月；③合并有嚴(yán)重心、肝、腎功能缺失者；④對(duì)本研究相關(guān)用品有禁忌證者；⑤臨床資料不全者。采用RandA1.0軟件將患者隨機(jī)分為治療組(DC-CIK回輸聯(lián)合PC化療)與對(duì)照組(只接受PC方案化療)各26例，兩組患者的一般資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

1.2主要試劑及儀器CD3、CD4、CD8、CD56抗體均購(gòu)自美國(guó)BD公司，實(shí)驗(yàn)中采用BD cellibur流式細(xì)胞儀。

1.3DCs-CIK細(xì)胞制備治療組在化療前1 d采集外周靜脈血40～50 ml并分離淋巴細(xì)胞，進(jìn)行DC-CIK細(xì)胞的培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)由本院生物中心完成，方法詳見(jiàn)參考文獻(xiàn)〔2〕。DC-CIK的制備過(guò)程中涉及的儀器、制劑、耗材均符合安全標(biāo)準(zhǔn)，且整個(gè)過(guò)程嚴(yán)格無(wú)菌操作?；剌斍?8 h取樣進(jìn)行細(xì)菌、內(nèi)毒素及支原體檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果均為陰性才可進(jìn)行回輸。

1.4方法治療組患者在第1周期化療(培美曲塞500 mg/m2第1天，DDP 20 mg/m2第1～5天)結(jié)束后第10天回輸DC-CIK細(xì)胞，連續(xù)回輸5 d，總細(xì)胞數(shù)>1×1010，細(xì)胞存活率>95%，每3 w完成1個(gè)療程，共進(jìn)行4個(gè)療程。對(duì)照組患者只采用PC方案化療，方案同前。每3 w 1個(gè)療程，共4個(gè)療程。

1.5評(píng)價(jià)指標(biāo)①細(xì)胞免疫功能評(píng)價(jià)：分別在治療前1 d及治療后1 w采集兩組患者外周血，用流式技術(shù)檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+及CD3+CD56+，并計(jì)算CD4+/CD8+的比例。②療效評(píng)估：根據(jù)實(shí)體瘤的客觀療效評(píng)價(jià)(RECIST 1.1)標(biāo)準(zhǔn)，完全緩解(CR)：所有目標(biāo)病灶消失；部分緩解(PR)：基線病灶長(zhǎng)徑總和縮小≥30%；病情進(jìn)展(PD)：基線病灶長(zhǎng)徑總和增加≥20%或出現(xiàn)新病灶；病情穩(wěn)定(SD)：基線病灶長(zhǎng)徑總和有縮小但未達(dá)PR或有增加但未達(dá)PD?？陀^緩解率(ORR)=CR+PR；疾病控制率(DCR)=CR+PR+SD。③生活質(zhì)量評(píng)價(jià)：參考萬(wàn)崇華《肺癌患者生活質(zhì)量評(píng)估測(cè)量表》，選擇與治療密切相關(guān)的幾項(xiàng)指標(biāo)，具體包括睡眠、食欲、抑郁、體力與體重5項(xiàng)。④不良反應(yīng)評(píng)估：參照毒性評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)(NCI-CTCAE)4.0。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)的組間比較進(jìn)行t檢驗(yàn)與χ2檢驗(yàn)。

2　結(jié)　果

2.1治療前后患者外周血T細(xì)胞亞群的變化治療前，兩組患者外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+比例沒(méi)有顯著差異。治療后，治療組患者外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+細(xì)胞比例與治療前相比無(wú)顯著差異，CD3+CD56+細(xì)胞比例顯著提高。而對(duì)照組患者治療后外周血T淋巴細(xì)胞較治療前顯著下降(P<0.05)，且顯著低于治療后的治療組患者(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1　兩組治療前后外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD3+CD56+和CD4+/CD8+比較

與同組治療前相比：1)P<0.05；與同期對(duì)照組相比：2)P<0.05

2.2臨床療效比較治療組隨訪16～23個(gè)月，中位生存時(shí)間19個(gè)月，對(duì)照組隨訪16～22個(gè)月，中位生存時(shí)間18個(gè)月，兩組相比沒(méi)有顯著差異(數(shù)據(jù)未列出)。兩組中均沒(méi)有患者出現(xiàn)CR，與對(duì)照組相比，治療組患者出現(xiàn)PR(13例，50.0%)，SD(9例，34.6%)，ORR(13例，50.0%)的比例均高于對(duì)照組9例(34.6%)、6例(23.1%)、9例(34.6%)；而出現(xiàn)PD(4例，15.4%)的比例低于對(duì)照組(7例，26.9%)，但上述差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而治療組患者出現(xiàn)DCR的比例(22例，84.6%)顯著高于對(duì)照組(15例，57.7%，P<0.05)。

2.3兩組治療后生活質(zhì)量比較治療后，治療組患者出現(xiàn)體力下降及食欲降低的比例顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，而兩組出現(xiàn)抑郁、低質(zhì)量睡眠以及體重減輕的比例無(wú)顯著差異(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2　兩組治療后生活質(zhì)量比較〔n(%),n=26〕

2.4治療安全性比較化療后的主要不良反應(yīng)包括骨髓抑制、惡心嘔吐以及肝腎功能障礙等，治療組患者出現(xiàn)Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制、惡心嘔吐的發(fā)生率均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。而Ⅰ～Ⅱ度骨髓抑制、肝腎功能障礙的發(fā)生率在無(wú)顯著差異。見(jiàn)表3。

表3　兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生比較〔n(%),n=26〕

3　討　論

細(xì)胞免疫治療已用于實(shí)體腫瘤的治療，如肺癌、腸癌均取得較好的臨床效果〔3，4〕。DC-CIK聯(lián)合應(yīng)用是目前臨床上使用比較廣泛的一種細(xì)胞免疫治療方案，Tao 等〔5〕結(jié)果證明DC-CIK治療方法可以顯著增強(qiáng)患者免疫功能，安全有效。DC是體內(nèi)專(zhuān)職的抗原呈遞細(xì)胞，在機(jī)體免疫應(yīng)答中起著重要的調(diào)控作用：成熟的DC細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體(MHC)Ⅱ類(lèi)分子、共刺激分子和黏附分子，并從非免疫組織移行至淋巴器官誘導(dǎo)初始T 細(xì)胞的活化增殖〔5〕。DC作為免疫應(yīng)答的啟動(dòng)因素，在腫瘤免疫的產(chǎn)生和調(diào)控中也發(fā)揮關(guān)鍵作用。CIK細(xì)胞是一群異質(zhì)性T細(xì)胞群，由外周血單核細(xì)胞經(jīng)多種細(xì)胞因子體外誘導(dǎo)培養(yǎng)后獲得的，具有很強(qiáng)的擴(kuò)增能力，同時(shí)對(duì)腫瘤細(xì)胞也有較強(qiáng)的殺傷作用。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)化療與細(xì)胞免疫治療具有協(xié)同效應(yīng)〔6〕?；熕幬锿ㄟ^(guò)殺傷腫瘤細(xì)胞，使其釋放大量腫瘤抗原，提高了DC對(duì)腫瘤抗原的提呈作用，從而誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生更強(qiáng)的免疫應(yīng)答〔7〕。多項(xiàng)研究均表明，與單純化療相比，化療聯(lián)合DC-CIK 細(xì)胞免疫治療的方案毒副作用更輕，不僅能提高晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者的免疫功能，提高患者的DCR，延長(zhǎng)患者的無(wú)疾病進(jìn)展時(shí)間，更能夠改善患者的生活質(zhì)量〔8〕。

本研究結(jié)果提示在化療聯(lián)用DC-CIK 細(xì)胞免疫治療可提高患者化療后的免疫功能。在疾病控制率方面結(jié)果表明DC-CIK 聯(lián)合化療能夠在提高療效的同時(shí)提升患者的生活質(zhì)量，提高了晚期肺腺癌患者的臨床獲益。研究結(jié)果還提示自體DC-CIK細(xì)胞免疫治療聯(lián)合化療方案安全性較高。

1Ramalingam S，Belani C.Systemic chemotherapy for advanced non-small cell lung cancer:recent advances and future directions〔J〕.Oncologist,2008;13(1):5-13.

2鄭培浩,劉毅,岑堅(jiān),等.樹(shù)突狀細(xì)胞聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞免疫治療對(duì)腎癌和非小細(xì)胞肺癌患者免疫功能的影響〔J〕.臨床軍醫(yī)雜志,2014;42(2):124-7.

3Zhu H,Yang X,Li J,etal.Immune response,safety,and survival and quality of life outcomes for advanced colorectal cancer patients treated with dendritic cell vaccine and cytokine-induced killer cell therapy〔J〕.Biomed Res Int,2014;2014:603871.

4李冰,鄭秋紅.DC-CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床探討〔J〕.黑龍江醫(yī)學(xué),2011;35(1):4-7.

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6Ramakrishnan R,Gabrilovich DI.Novel mechanism of synergistic effects of conventional chemotherapy and immune therapy of cancer〔J〕.Cancer Immunol Immunother,2013;62(3):405-10.

7Nowak AK,Lake RA,Marzo AL,etal.Induction of tumor cell apoptosis in vivo increases tumor antigen cross-presentation,cross priming rather than cross-tolerizing host tumor-specific CD8 T cells〔J〕.J Immunol,2003;170(10):4905-13.

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〔2015-12-15修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.14.054

董秋霞(1982-)，女，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤內(nèi)科治療研究。

R730.51

A

1005-9202(2016)14-3468-03；