戈　銳　周　為　燕　速　劉　寧　安文靜　于鵬杰　張成武

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青?！∥鲗帯?10001)

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胃腺癌術(shù)后癌組織中信號(hào)和轉(zhuǎn)錄激活因子3與基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達(dá)及意義

戈銳周為燕速劉寧安文靜于鵬杰張成武

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海西寧810001)

目的對(duì)胃腺癌術(shù)后組織應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)信號(hào)和轉(zhuǎn)錄激活因子(STAT)3、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9的表達(dá)及其意義。方法59例行胃腺癌根治手術(shù)患者的臨床資料及術(shù)后蠟塊組織作為研究組，距腫物邊緣>5 cm的正常胃黏膜組織20例作為對(duì)照組。兩組中STAT3和MMP-9的檢測(cè)應(yīng)用免疫組化SP法。結(jié)果研究組STAT3和MMP-9表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組。研究組中STAT3和MMP-9的表達(dá)均與浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和脈管侵犯密切相關(guān)，STAT3的表達(dá)與Ki67增殖指數(shù)密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示研究組中STAT3和MMP-9的表達(dá)呈正相關(guān)性。結(jié)論胃腺癌術(shù)后組織中STAT3和MMP-9高表達(dá)，二者對(duì)腫瘤的形成和進(jìn)展均有一定意義。STAT3與MMP-9可能有一定的協(xié)同作用。

胃腺癌；STAT3；MMP-9；免疫組化

胃腺癌病變形成過(guò)程中與長(zhǎng)期的潰瘍及幽門(mén)螺桿菌感染有關(guān)〔1〕。胃腺癌的基因和蛋白表達(dá)研究得到廣泛的關(guān)注〔2〕。信號(hào)和轉(zhuǎn)錄激活因子(STAT)3是其家族的重要成員，在生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子等細(xì)胞外信號(hào)刺激下，STAT3可以調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄，影響細(xì)胞增殖、分化、凋亡和轉(zhuǎn)移〔3，4〕?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9是其家族中的重要成員，對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的降解和促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遷移有一定作用〔5，6〕。胃腺癌中STAT3和MMP-9的聯(lián)合檢測(cè)尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究探討胃腺癌術(shù)后組織中STAT3與MMP-9的表達(dá)及臨床意義。

1　資料與方法

1.1臨床資料研究組均為近3年在我科行胃腺癌根治手術(shù)的患者，共59例，留取患者的病理資料及術(shù)后石蠟包埋組織，其中男31例，女28例，年齡41～86歲，平均60.4歲，高分化10例，中分化15例，低分化34例。均經(jīng)病理醫(yī)師閱片復(fù)查，同時(shí)符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)及分型。研究組中距腫物邊緣>5 cm的正常胃黏膜組織20例作為對(duì)照組，其中男10例，女10例，年齡43～79歲，平均61.4歲。兩組常規(guī)資料無(wú)明顯差別，具有可比性。

1.2STAT3和MMP-9的檢測(cè)方法應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)并進(jìn)行二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色。實(shí)驗(yàn)均由同一技師操作，按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，做好質(zhì)控。

1.3STAT3和MMP-9結(jié)果的判定方法STAT3的陽(yáng)性部位定位在細(xì)胞質(zhì)，部分表達(dá)于細(xì)胞核，MMP-9的陽(yáng)性部位定位在細(xì)胞質(zhì)，計(jì)數(shù)選擇上皮細(xì)胞集中的區(qū)域，選擇5個(gè)400倍視野，以中-強(qiáng)陽(yáng)性定為陽(yáng)性(弱陽(yáng)性不計(jì))，取陽(yáng)性細(xì)胞的平均值為最終結(jié)果，以<10%定為陰性，以≥10%定為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，線性相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.1兩組STAT3和MMP-9表達(dá)比較兩組STAT3和MMP-9表達(dá)陽(yáng)性率差別顯著(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.2研究組STAT3和MMP-9表達(dá)在不同臨床特征中的比較研究組STAT3和MMP-9表達(dá)均與浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和脈管侵犯密切相關(guān)，STAT3表達(dá)與Ki67增殖指數(shù)密切相關(guān)。見(jiàn)表2。

2.3研究組中STAT3和MMP-9相關(guān)性研究組中STAT3和MMP-9的表達(dá)呈正相關(guān)性(r=0.51，P<0.05)。

表1　兩組中STAT3和MMP-9表達(dá)的比較〔n(%)〕

表2　研究組中STAT3和MMP-9表達(dá)和在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

3　討　論

胃腺癌在病變形成過(guò)程中常伴有蛋白的表達(dá)失常，由于胃腺癌的預(yù)后較差，與轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白表達(dá)失常更有重要意義。STAT具有信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活的雙重作用〔7〕。STAT3蛋白是分子量為89～92 kD的蛋白質(zhì)，其由750～795個(gè)氨基酸殘基組成，其蛋白包含6個(gè)功能結(jié)構(gòu)域，即N端氨基酸保守序列、螺旋區(qū)、DNA 結(jié)合域、連接區(qū)、SH2結(jié)構(gòu)域和C端轉(zhuǎn)錄活化區(qū)〔8，9〕。其中，DNA 結(jié)合域與SH2結(jié)構(gòu)域的作用最重要〔10，11〕。MMPs家族是具有高度同源性的水解酶類，家族成員均能不同程度降解基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)〔12〕。MMP-9是明膠酶，能由正常組織細(xì)胞產(chǎn)生，在組織愈合或炎癥時(shí)可以更多地激活，并形成Ⅳ型膠原酶〔13〕。MMP-9在腫瘤侵襲過(guò)程中的作用更明顯〔14，15〕，尤其是高侵襲性腫瘤中MMP-9的表達(dá)升高，其在降解細(xì)胞外基質(zhì)時(shí)，還可以對(duì)家族的其他成員進(jìn)行激活，更高效地促進(jìn)腫瘤細(xì)胞突破基底膜〔16〕。

本研究提示STAT3和MMP-9高表達(dá)是腫瘤形成的重要因素。STAT3主要是通過(guò)細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子發(fā)揮誘導(dǎo)JAK-STAT信號(hào)途徑，并促進(jìn)MAPK途徑的激活而對(duì)腫瘤形成起作用的〔17〕。細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素(IL)-6可以和相應(yīng)的受體結(jié)合形成二聚體，催化受體的酪氨酸殘基發(fā)生磷酸化〔18〕。而生長(zhǎng)因子如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)也可能是STAT3作用的下游蛋白，其高表達(dá)時(shí)可以引發(fā)腫瘤的血管生成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和小血管的新生〔19〕。本文結(jié)果提示STAT3和MMP-9高表達(dá)時(shí)腫瘤的侵襲和浸潤(rùn)能力明顯增強(qiáng)，腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的潛能升高，提示腫瘤處于高遷移的狀態(tài)。本文提示STAT3高表達(dá)時(shí)可以明顯促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖活性，腫瘤細(xì)胞數(shù)量明顯增多，細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖能力增強(qiáng)，腫瘤處于活性狀態(tài)。但本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)STAT3和MMP-9與分化的關(guān)系，由于分化是細(xì)胞由幼稚到成熟過(guò)程的表現(xiàn)，因此二者對(duì)細(xì)胞成熟過(guò)程可能無(wú)明顯影響。STAT3和MMP-9具有一定的協(xié)同作用〔20〕。即STAT3高表達(dá)可以誘導(dǎo)MMP-9的高表達(dá)，此時(shí)細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜溶解或消失，腫瘤細(xì)胞易于突破基底膜而出現(xiàn)遷移〔21，22〕。

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〔2015-02-19修回〕

(編輯苑云杰)

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.14.053

張成武(1963-)，男，主任醫(yī)師，主要從事胃腸腫瘤研究。

戈銳(1982-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事胃腸腫瘤研究。

R735

A

1005-9202(2016)14-3466-03；