許瑩　　李琦　　王斌全

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兒童變應(yīng)性鼻炎鼻分泌物嗜酸性粒細胞的臨床研究

許瑩1李琦1王斌全2

目的 了解變應(yīng)性鼻炎兒童患者鼻腔分泌物中嗜酸性粒細胞分布情況以及季節(jié)對嗜酸性粒細胞分布情況影響。方法 對417例變應(yīng)性鼻炎兒童患者及98例非變應(yīng)性鼻炎兒童的鼻腔分泌物薄層涂片，經(jīng)瑞-姬染色后觀察嗜酸性粒細胞的數(shù)量及分布程度，417例變應(yīng)性鼻炎患兒根據(jù)4個季節(jié)分為4個亞組，比較各季度亞組之間嗜酸性粒細胞的數(shù)量。結(jié)果 變應(yīng)性鼻炎患兒鼻腔分泌物中嗜酸性粒細胞陽性人數(shù)顯著高于非變應(yīng)性鼻炎患兒人數(shù)（P＜0.001），變應(yīng)性鼻炎兒童患者鼻腔分泌物中嗜酸性粒細胞數(shù)量顯著高于非變應(yīng)性鼻炎患者（P＜0.001），變應(yīng)性鼻炎患兒在春夏秋冬不同季節(jié)鼻腔分泌物中嗜酸性粒細胞數(shù)量差異明顯（P＜0.01），其中夏季高于冬季（P＜0.01），其他各個季節(jié)之間無明顯差異（P＞0.05）。結(jié)論 嗜酸性粒細胞在兒童變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病過程中具有十分重要的作用，變應(yīng)性鼻炎患兒鼻腔分泌物嗜酸性粒細胞明顯上升，同時隨著季節(jié)變化，嗜酸性粒細胞數(shù)量也變化明顯，對兒童變應(yīng)性鼻炎的診斷有重要參考價值。

兒童；嗜酸性粒細胞；變應(yīng)性鼻炎；分泌物

近年來，隨著物質(zhì)生活的改善和提高，人們的生活方式和生態(tài)環(huán)境的急劇變化等多重因素的影響，兒童變應(yīng)性鼻炎的患病率在世界范圍內(nèi)有明顯升高，并呈逐年增長趨勢。

1南京醫(yī)科大學附屬南京兒童醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科（南京，210008）

2山西醫(yī)科大學第一醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科

變應(yīng)性鼻炎是特異性個體接觸致敏原后由IgE介導的介質(zhì)釋放，并有多種免疫活性細胞和細胞因子等參與的鼻黏膜的Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，其變態(tài)反應(yīng)過程中嗜酸性粒細胞（EOS）、肥大細胞會發(fā)生脫顆?，F(xiàn)象，在脫顆粒過程釋放大量的趨化因子，趨化各種炎性細胞，其中，嗜酸性粒細胞趨化因子促使血液中嗜酸性粒細胞向變態(tài)反應(yīng)炎癥部位聚集，以致鼻腔分泌物中出現(xiàn)大量嗜酸性粒細胞。自1927年Eyermann涂片檢查鼻分泌物中的EOS后，EOS細胞學檢查開始用于臨床。目前關(guān)于成人變應(yīng)性鼻炎鼻腔分泌物中EOS研究較多，但是相對于兒童來說研究比較少，本研究通過分析417例AR兒童患者和98例非過敏性鼻炎兒童的鼻分泌物EOS細胞學觀測，以探討EOS在兒童變應(yīng)性鼻炎臨床意義。

資料與方法

1材料來源

隨機選取南京市兒童醫(yī)院2014年2月～2014 年12月耳鼻咽喉科門診就診的癥狀以多噴嚏多涕為主的慢性鼻炎患者515例，根據(jù)變應(yīng)原皮膚點刺試驗將患兒分為兩組，實驗陽性患兒417例定義作為觀察組，其中男291例，女126例，3～15歲，平均年齡7.34±2.56歲。將實驗陰性患者98例患兒定義為對照組，3～14歲，男62例，女36例，平均年齡6.96±2.77歲。兩組患者的男女所占比例、年齡差異均無統(tǒng)計學意義，具有可比性。

2方法

觀察組417例變應(yīng)性鼻炎兒童患者，經(jīng)過變應(yīng)原皮膚點刺實驗陽性（安刺，ALK-ABELLO，S2010040），并且過敏原與臨床癥狀相關(guān)。對照組98例鼻炎患兒變應(yīng)原點刺實驗均陰性。515例患兒均以棉簽取鼻腔分泌物，載玻片薄層涂片，瑞氏-吉姆薩染色（瑞氏吉姆薩A、B液，BasoLOT：410021，珠海貝索生物技術(shù)有限公司）后，顯微鏡（Olympus，CH20，Japan）10×40視野下觀察，記錄鼻腔分泌物中EOS分布程度和數(shù)量，EOS的分布程度采用Sheldon等的評價方法分成6個級別：①未見到EOS；②偶見到散在的EOS；③EOS相對較多且呈散在分布；④視野中EOS占1/4；⑤視野中EOS占1/2；⑥滿視野都是EOS。級別≥2視為鼻腔分泌物中嗜酸性粒細胞分布為陽性。對陽性患兒，記錄100個粒細胞中EOS的數(shù)量，級別1：未見到EOS患兒EOS數(shù)量默認為0。比較兩組陽性人數(shù)，以及100個粒細胞中EOS的數(shù)量；同時，將觀察組按照2014年農(nóng)歷四個季節(jié)分為四個亞組，其中春季103例（20140204-20140504）、夏季104例（20140505-20140806）、秋季107例（20140807-20141106）、冬季103例（20141106-20141210），比較四個季節(jié)100個粒細胞中EOS的數(shù)量。

3統(tǒng)計學處理

實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 12.0 for windows統(tǒng)計軟件進行檢驗，組間陽性人數(shù)比較實用卡方檢驗，鼻腔分泌物中EOS分布程度用Mann-whitey＇s U檢驗，多個亞組之間鼻腔分泌物中EOS分布程度用Kruskal-wallis檢驗，P＜0.05為具有統(tǒng)計學差異，P＜0.01為具有顯著性差異，P＜0.001為具有非常顯著性差異。

結(jié)果

1觀察組與實驗組兒童鼻腔分泌物EOS數(shù)量比較

觀察組患兒鼻腔分泌物EOS陽性人數(shù)為350例，陰性人數(shù)為67例，對照組患兒鼻腔分泌物EOS陽性人數(shù)為12例，陰性人數(shù)為86例，觀察組陽性人數(shù)遠遠高于對照組，具有非常顯著性差異（χ2= 195.28，P＜0.001）。觀察組患兒鼻腔分泌物100個粒細胞中，EOS數(shù)量為68［19，93］，對照組患兒鼻腔分泌物100個粒細胞中，EOS數(shù)量為0［0，2］，觀察組明顯高于對照組，具有非常顯著性差異（P＜0.001），見表1。

表1　兩組EOS陽性人數(shù)，100個粒細胞中EOS數(shù)量比較（個，中位數(shù)［25%；75%］）

2春夏秋冬四季兒童鼻腔分泌物EOS數(shù)量比較

春夏秋冬四個季節(jié)患兒鼻腔分泌物100個粒細胞中EOS數(shù)量分別為春季3.00［2.00，56.00］，夏季60.00［5.00，91.00］，秋季50.00［2.00，90.00］，冬季12.00 ［3.00，44.00］，四組比較具有顯著性差異（P＜0.01），其中兩兩比較顯示，除了夏季EOS數(shù)量高于冬季，兩組有統(tǒng)計學差異外（Z=-3.018，P=0.015），其他各亞組兩兩比較，春季與冬季（Z=-0.287，P=1.000）、秋季與冬季（Z=-2.476，P=0.080）、春季與秋季（Z=-1.869，P=0.369），春季與夏季（Z=-2.383，P=0.103）、夏季與秋季（Z=-1.345，P=1.000），EOS數(shù)量差異均無統(tǒng)計學差異，見表2。

表2　春夏秋冬鼻腔分泌物100個粒細胞中EOS數(shù)量（個，中位數(shù)［25%；75%］）

討論

近年來，AR發(fā)病狀況呈上升趨勢，在我國中心城市AR的患病率為8.7%～24.1%。兒童AR患病率在世界范圍內(nèi)也有明顯升高趨勢，AR可發(fā)生于任何年齡包括幼嬰時期，大多數(shù)患者于20歲前出現(xiàn)，是一種兒童常見病。國內(nèi)外文獻報道多達10%的兒童和20%的少年患常年性鼻炎，其中大多為變態(tài)反應(yīng)性。由于兒童處在生長發(fā)育期，AR對兒童認知功能的影響引起廣泛關(guān)注，AR雖不是一種嚴重疾患，但可以影響兒童日常生活、學習，且可誘發(fā)支氣管哮喘、鼻竇炎、鼻息肉、中耳炎等相關(guān)疾病，己經(jīng)成為困擾家長和醫(yī)務(wù)人員重要的醫(yī)學問題之一［1-3］。

EOS是變應(yīng)性鼻炎的一個重要臨床指標，成人變應(yīng)性鼻炎患者鼻腔分泌物中嗜酸性粒細胞數(shù)量顯著高于正常人及非變應(yīng)性鼻炎患者，變應(yīng)性鼻炎患者鼻腔分泌物中嗜酸性粒細胞陽性率也明顯高于正常人和非變應(yīng)性鼻炎患者［4-6］。變應(yīng)性鼻炎分泌物中嗜酸粒細胞明顯高于急性鼻炎分泌物中嗜酸粒細胞［7］，鼻用激素和舌下脫敏治療都能明顯減少患者鼻分泌物中EOS數(shù)量［8，9］。對于鼻分泌物EOS增高的AR患者，采用鼻用激素治療能夠抑制EOS炎癥，改善AR患者的癥狀和體征。非EOS增高的AR患者對鼻用激素治療反應(yīng)性差，所以臨床上可以根據(jù)EOS的相對計數(shù)決定是否采用鼻用激素治療［10］。

成人變應(yīng)性鼻炎依據(jù)典型的臨床癥狀和體征不難診斷，而兒童病例的癥狀和體征有很大的變異，多不典型［11］。兒童變應(yīng)性鼻炎有以流清涕為主，有以打噴嚏為主，有以鼻塞為主，兒童臨床癥狀各有不同和側(cè)重［12］，所以鼻分泌物中EOS%可作為兒童AR診斷和療效評定的指標，對于兒童患者，EOS的檢測更具有臨床意義［9］。

本研究中，515例患兒使用皮膚點刺實驗來定義變應(yīng)性鼻炎或非變應(yīng)性鼻炎患者，且患病以來均未應(yīng)用相關(guān)治療。417例變應(yīng)性鼻炎兒童患者鼻分泌物中EOS檢出350例，陽性率83.93%，98例非變應(yīng)性鼻炎兒童患者鼻分泌物EOS檢出12例，陽性率12.24%，變應(yīng)性鼻炎兒童鼻分泌物EOS檢出陽性率和嗜酸性粒細胞占整個粒細胞的比例都明顯高于非變應(yīng)性鼻炎患者，符合AR的發(fā)病機制和發(fā)病過程。各個亞組比較，春冬兩個季節(jié)，患兒鼻分泌物中EOS數(shù)量較低，夏秋兩季EOS較高，但除了其中夏季EOS數(shù)量高于冬季，其他季節(jié)之間EOS數(shù)量差異均無統(tǒng)計學意義，本次患兒過敏前7位過敏原分別是粉塵螨87.5%、屋塵螨85.4%、熱帶五爪螨73.9%，霉菌14.3%、花粉10.7%，貓毛5.2%，狗毛5.1%，塵螨是最主要的過敏原，熱帶螨和霉菌的生長條件與塵螨也比較類似，這與南京地區(qū)變應(yīng)性鼻炎患兒主要致敏原是塵螨這種常年性過敏原結(jié)果吻合［13］。塵螨最佳的生長條件為溫度20～25℃、相對濕度70%～75%［14］，南京地區(qū)夏秋季節(jié)的氣溫和濕度適合塵螨生長繁殖，春季EOS較低也說明花粉不是南京地區(qū)引起過敏性鼻炎的主要誘因。

417例過敏性鼻炎兒童僅67例未有EOS檢出，鼻分泌物EOS檢出29例見大量的中性粒細胞，這不排除近期局部有感染的可能。相反，鼻竇炎患者血中嗜酸性陽離子蛋白及嗜酸性粒細胞趨化因子增高也會導致非過敏性鼻炎患者鼻腔分泌物EOS明顯增高，這也是影響實驗的一個方面。

總之，鼻腔細胞學是一種安全、便捷、高效的檢測方法，是指導鼻腔疾病診斷和治療的極好指標，對于兒童患者鼻腔分泌物EOS分布程度在2級及以上，即為鼻腔分泌物EOS陽性，加上患者癥狀及體征即可臨床診斷AR。因此，鼻腔分泌物EOS涂片檢查對AR的診斷有重要參考價值，是AR的一項重要診斷性試驗，針對兒童變應(yīng)性鼻炎癥狀不典型的特點，可以與變應(yīng)原皮內(nèi)試驗聯(lián)合，增加AR診斷的準確性。

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14崔玉寶.塵螨的生物學、生態(tài)學與流行概況.國外醫(yī)學寄生蟲分冊，2004，31（6）：277-281.

（收稿:2015-02-02修回：2015-08-24）

Children allergic rhinitis nasal secretions of eosinophils in clinical research

XU Ying，LI Qi，WANG Binquan
Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery，Nanjing Children′s Hospital，Nanjing Medical University，Nanjing，210008，Jiangsu，China

Objective To study the distribution of eosinophils in nasal secretions of children with allergic rhinitis and the effect of seasons on the distribution of eosinophils.Methods Nasal secretions of 417 children with allergic rhinitis and 98 children with non allergic rhinitis were made into thin smear，after Wrihgt Giemsa staining to observe the number and distribution of eosinophils.417 cases of children with allergic rhinitis were divided into four subgroups according to the four seasons，then compared the number of eosinophils of each quarter between subgroups.Results The eosinophils in nasal secretions positive number of Children with allergic rhinitis was significantly higher than that of children with non allergic rhinitis（P＜0.001），the number of eosinophils in nasal secretions of children with allergic rhinitis was significantly higher（P＜0.001），in spring，summer，autumn and winter seasons，the difference of the number of eosinophils in nasal secretions between children with allergic rhinitis was significant（P＜0.01），which was higher in summer than in winter（P＜0.01），while no obvious difference was between every other seasons（P＞0.05）.Conclusion The eosinophils in children with allergic rhinitis plays an important role in the process，the eosinophils in nasal secretion of children with allergic rhinitis rises obviously and changes with the seasons，in addition，the number of eosinophils also varies obviously，which have important reference value in the diagnosis of children with allergic rhinitis.

Children；Eosinophils；Allergic rhinitis；Secretion

李琦，副主任醫(yī)師.Email:liqi52002101@163.com