張賀飛，許文琪，都倩，趙靜，夏紅月，任雷鳴

(河北醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院藥理學(xué)教研室，河北 石家莊　050017)

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布比卡因增強(qiáng)α1受體介導(dǎo)大鼠胸主動(dòng)脈收縮反應(yīng)中血管內(nèi)皮的作用

張賀飛，許文琪，都倩，趙靜，夏紅月，任雷鳴

(河北醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院藥理學(xué)教研室，河北 石家莊050017)

目的分析血管內(nèi)皮在布比卡因(bupivacaine，BUP)增強(qiáng)苯腎上腺素(phenylephrine，Phe)誘發(fā)血管收縮反應(yīng)中的作用。方法制備大鼠離體胸主動(dòng)脈血管環(huán)，采用機(jī)械損傷或工具藥干擾血管內(nèi)皮的舒張功能。記錄Phe作為α1受體激動(dòng)劑誘發(fā)的動(dòng)脈收縮反應(yīng)。結(jié)果BUP(30 μmol·L-1)與內(nèi)皮完整血管標(biāo)本孵育20 min后，Phe誘發(fā)的血管收縮Emax值為(2.50±0.05) g，明顯高于對(duì)照組標(biāo)本的Emax值[(2.22±0.07) g，P<0.01]。孵育時(shí)間縮短至5、10或15 min時(shí)，BUP無此增強(qiáng)效應(yīng)。在內(nèi)皮損傷動(dòng)脈標(biāo)本，同濃度BUP孵育20 min時(shí)，輕度但明顯抑制低濃度Phe誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)(P<0.05)。在吲哚美辛、ChTX、apamin和L-NAME預(yù)處理的內(nèi)皮完整血管標(biāo)本上，ACh誘發(fā)的血管舒張反應(yīng)消失；此時(shí)BUP(30 μmol·L-1孵育20 min)對(duì)Phe誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)無明顯影響(P>0.05)。結(jié)論在大鼠離體胸主動(dòng)脈，BUP對(duì)α1受體介導(dǎo)收縮的增強(qiáng)作用與其抑制血管內(nèi)皮的舒張功能密切相關(guān)，這種抑制作用間接導(dǎo)致Phe誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)明顯增強(qiáng)。

布比卡因；苯腎上腺素；胸主動(dòng)脈；血管收縮；內(nèi)皮；大鼠

布比卡因(bupivacaine，BUP)屬酰胺類長(zhǎng)效局麻藥，也是臨床最常用的局麻藥之一。與其他局麻藥相比，BUP的治療濃度與其心血管毒性濃度或中樞神經(jīng)毒性濃度之間的濃度差較小，臨床應(yīng)用時(shí)易發(fā)生毒性反應(yīng)[1-2]。誤入靜脈或從用藥局部吸收過多是BUP誘發(fā)毒性反應(yīng)的主要原因。最近，我們發(fā)現(xiàn)大鼠離體胸主動(dòng)脈暴露于臨床濃度的BUP后，α1受體介導(dǎo)的收縮反應(yīng)隨BUP的暴露時(shí)間不同而出現(xiàn)截然相反的兩種效應(yīng)，即短時(shí)程暴露于BUP后，α1受體激動(dòng)劑苯腎上腺素(phenylephrine，Phe)誘發(fā)大鼠胸主動(dòng)脈收縮反應(yīng)的Emax值明顯增大；長(zhǎng)時(shí)程暴露后，收縮反應(yīng)的Emax值明顯減小[3]。此外，我們還發(fā)現(xiàn)BUP對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞介導(dǎo)的血管舒張反應(yīng)具有抑制作用[3]。眾所周知，從血管內(nèi)皮細(xì)胞的角度，可將大鼠離體血管舒張反應(yīng)分為血管內(nèi)皮依耐性舒張反應(yīng)和非血管內(nèi)皮依耐性舒張反應(yīng)。內(nèi)皮依耐性血管舒張反應(yīng)主要與胸主動(dòng)脈血管產(chǎn)生內(nèi)皮源性舒張因子NO和前列腺素類物質(zhì)有關(guān)[4-6]；而非內(nèi)皮依耐性舒張主要與藥物直接作用于血管平滑肌細(xì)胞有關(guān)，這些藥物可抑制平滑肌細(xì)胞的鈣離子內(nèi)流，由此引起血管舒張[7]。

BUP增強(qiáng)α1受體介導(dǎo)血管收縮反應(yīng)的作用機(jī)制尚不清楚。我們推測(cè)BUP對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的抑制作用可能參與了BUP短時(shí)程暴露誘發(fā)的動(dòng)脈收縮增強(qiáng)。為此，我們采用內(nèi)皮完整或內(nèi)皮損傷的大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)，觀察BUP增強(qiáng)α1受體介導(dǎo)血管收縮反應(yīng)的變化；同時(shí)借助藥理學(xué)工具藥，分析血管內(nèi)皮舒血管因子(NO、PGI2等)在BUP增強(qiáng)α1受體介導(dǎo)血管收縮反應(yīng)中的作用。

1　實(shí)驗(yàn)材料

1.1儀器、藥品、動(dòng)物PowerLab8/35型數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)，AD Instrument Pty Ltd；MLT0380/D型張力換能器，AD Instrument Pty Ltd；7146型純水儀，Thermo公司；CP213型電子天平，Ohaus Corporation公司；SC-15型數(shù)控超級(jí)恒溫槽，寧波天恒儀器廠；LGY-2型冷光源，大悅維佳(北京)科技有限公司；50 μL微量進(jìn)樣器，上海安亭儀器廠。

布比卡因(bupivacaine，BUP)、苯腎上腺素(phenylephrine，Phe)、乙酰膽堿(acetylcholine，ACh)、吲哚美辛(indomethacin，Indo)、葡萄糖、氯化鈣(CaCl2)、氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、硫酸鎂(MgSO4)、碳酸氫鈉(NaHCO3)、磷酸二氫鈉(NaH2PO4)購于美國Sigma公司。蜂毒明肽(apamin)、卡律蝎毒素(charybdotoxin，ChTX)購自美國Enzo life sciences公司。N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NG-nitroarg- inine methyl ester，L-NAME)購自日本東京化成工業(yè)株式會(huì)社。

Wistar大鼠，清潔級(jí)，♂，體質(zhì)量300～350 g，由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，飼料亦由該中心提供。大鼠飼養(yǎng)于室溫：(23±1)℃，相對(duì)濕度：(50±5)%，明暗各12 h(光照時(shí)間8 ∶00～20 ∶00)的動(dòng)物飼養(yǎng)室內(nèi)。自由飲食、飲水。大鼠在該環(huán)境下適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d，并于實(shí)驗(yàn)前12 h禁食。

2　方法

2.1營養(yǎng)液的配制改良K-H(Krebs-Henseleit)液的成份為(mmol·L-1)：NaCl 133、KCl 4.7、MgSO40.61、NaH2PO41.35、CaCl22.52、NaHCO316.3、glucose 7.8[8]。除NaHCO3、CaCl2和葡萄糖于實(shí)驗(yàn)前臨時(shí)加入外，其他成份均配成高濃度母液。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日，取適量的各母液，加入超純水，稀釋至所需濃度。配制好的營養(yǎng)液用鹽酸調(diào)pH至7.2～7.4，以95% O2和5% CO2的混合氣體充分預(yù)飽和后備用。

2.2標(biāo)本的制備以烏拉坦(1.5 g·kg-1)皮下注射麻醉大鼠后，經(jīng)股動(dòng)脈放血處死。沿胸骨長(zhǎng)軸打開胸腔后，迅速取出胸主動(dòng)脈置于5%CO2+95%O2混合氣體預(yù)先飽和的4℃改良K-H液中，漂洗干凈，仔細(xì)分離血管周圍脂肪和結(jié)締組織。制備去內(nèi)皮血管環(huán)時(shí)，以表面粗糙的聚乙烯插管(外徑略小于血管內(nèi)徑)小心摩擦血管內(nèi)腔去除內(nèi)皮[9]。截取4 mm寬的血管環(huán)，于血管環(huán)的管腔中平行穿入兩個(gè)鎢絲環(huán)，將標(biāo)本置于含有10 mL改良K-H液的浴槽中。動(dòng)脈環(huán)的一側(cè)借助鎢絲環(huán)將標(biāo)本固定于不銹鋼支架的下端，另一側(cè)借助鎢絲環(huán)經(jīng)絲線連接于張力換能器，血管的張力信號(hào)通過張力換能器記錄于數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)。血管環(huán)的前負(fù)荷3g，并于改良K-H液(37±0.2) ℃中平衡1 h。平衡期間，持續(xù)通以5%CO2+95%O2混合氣體，每15 min換1次營養(yǎng)液。平衡1 h后開始實(shí)驗(yàn)。

2.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)中的每個(gè)血管標(biāo)本均觀察首輪Phe(0.0001～30 μmol·L-1)誘發(fā)的累積濃度-收縮反應(yīng)曲線，以判定標(biāo)本反應(yīng)性；待最大張力穩(wěn)定后，進(jìn)一步觀察ACh(10 μmol·L-1)誘發(fā)血管舒張反應(yīng)。ACh誘發(fā)的舒張反應(yīng)大于80%作為內(nèi)皮完整血管的指標(biāo)，ACh誘發(fā)的舒張反應(yīng)小于20%則作為去除內(nèi)皮血管的指標(biāo)[3, 9]。之后，反復(fù)沖洗標(biāo)本并休息45 min，待標(biāo)本張力恢復(fù)到基礎(chǔ)水平后，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)(特殊之處另行說明)。

2.3.1BUP對(duì)內(nèi)皮完整和內(nèi)皮損傷血管Phe誘發(fā)大鼠胸主動(dòng)脈收縮反應(yīng)的影響將內(nèi)皮完整血管標(biāo)本分為2組，包括BUP組以及對(duì)照組(各組標(biāo)本數(shù)為n=12)。BUP組標(biāo)本與30 μmol·L-1的BUP孵育20 min后，建立第2輪Phe(0.0001～30 μmol·L-1)誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)曲線；對(duì)照組標(biāo)本以同體積的蒸餾水代替BUP。內(nèi)皮損傷血管標(biāo)本亦分為2組，各組的標(biāo)本數(shù)為n=11；其他實(shí)驗(yàn)操作同內(nèi)皮完整血管。

2.3.2BUP不同孵育時(shí)間對(duì)于Phe誘發(fā)大鼠胸主動(dòng)脈收縮反應(yīng)的影響將內(nèi)皮完整血管標(biāo)本分為4組，每組的標(biāo)本數(shù)為n=10。除對(duì)照組外，其他3組標(biāo)本與30 μmol·L-1的BUP分別孵育5 min、10 min或15 min后，立即給予最高濃度的Phe(10 μmol·L-1)，記錄血管收縮反應(yīng)。對(duì)照組標(biāo)本與蒸餾水孵育15 min后，同法給予Phe。

2.3.3內(nèi)皮舒血管因子抑制劑對(duì)BUP增強(qiáng)Phe誘發(fā)大鼠胸主動(dòng)脈收縮的影響將內(nèi)皮完整血管標(biāo)本分為BUP組以及對(duì)照組，各組的標(biāo)本數(shù)為n=7。在觀察首輪Phe誘發(fā)的濃度-效應(yīng)收縮反應(yīng)之前，所有標(biāo)本均首先以1 μmol·L-1濃度Phe預(yù)收縮血管，并觀察ACh(10 μmol·L-1)誘發(fā)的血管舒張反應(yīng)；反復(fù)沖洗標(biāo)本后，在第2次以1 μmol·L-1濃度Phe預(yù)收縮血管前20 min， 將Indo(10 μmol·L-1)、ChTX(0.05 μmol·L-1)、apamin(1 μmol·L-1)和L-NAME(100 μmol·L-1)加入浴槽，并再次觀察同濃度ACh誘發(fā)的舒張反應(yīng)。反復(fù)沖洗該標(biāo)本后，BUP組標(biāo)本與上述4個(gè)抑制劑共同孵育20 min后，建立首輪Phe(0.0001～30 μmol·L-1)誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)曲線；反復(fù)沖洗標(biāo)本后，BUP組標(biāo)本與30 μmol·L-1的BUP及上述4個(gè)阻斷劑共同孵育20 min后，建立第二輪Phe(0.0001～30 μmol·L-1)誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)曲線。對(duì)照組標(biāo)本以同體積的蒸餾水代替BUP，其他實(shí)驗(yàn)步驟同BUP組血管。

3　結(jié)果

3.1BUP對(duì)內(nèi)皮完整血管Phe誘發(fā)收縮反應(yīng)的影響標(biāo)本在給予BUP前，BUP組與對(duì)照組Phe(0.0001～30 μmol·L-1)誘發(fā)血管收縮的Emax值分別為(2.19±0.07) g和(2.19±0.05) g，二者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05，F(xiàn)ig 1A)。30 μmol·L-1濃度BUP孵育20 min后，Phe誘導(dǎo)的血管收縮的Emax值為(2.50±0.05) g，明顯高于對(duì)照組的Emax值(2.22±0.07) g(P<0.01，F(xiàn)ig 1B)。無論BUP給藥前或給藥后，Phe誘發(fā)血管收縮的-LogEC50(mol·L-1)值，組間比較未見明顯差異(P>0.05，數(shù)據(jù)略)。

Fig 1　Vasoconstrictive responses to phenylephrine in isolated endothelium-intact rat aorta before (A) and after (B) a 20 min incubation with bupivacaine (30 μmol·L-1).

*P<0.05vscontrol.

3.2BUP對(duì)內(nèi)皮損傷血管Phe誘發(fā)收縮反應(yīng)的影響標(biāo)本在給予BUP前，BUP組與對(duì)照組Phe(0.0001～30 μmol·L-1)誘發(fā)血管收縮的Emax值分別為(2.87±0.08) g和(2.82±0.11) g，-LogEC50(mol·L-1)值分別為7.96±0.11和8.10±0.18，兩組間比較差異未見顯著性(P>0.05，F(xiàn)ig 2A)。30 μmol·L-1濃度BUP孵育20 min后，Phe誘導(dǎo)的血管收縮的Emax值，組間比較未見差異(P>0.05，數(shù)據(jù)略，F(xiàn)ig 2B)。但是，BUP處理組Phe誘導(dǎo)的血管收縮量效曲線右移，其-LogEC50(mol·L-1)值(7.21±0.05)明顯小于對(duì)照組(7.67±0.01)(P<0.01，F(xiàn)ig 2B)。

Fig 2　Vasoconstrictive responses to phenylephrine in isolated endothelium-denuded rat aorta before (A) and after (B) a 20 min incubation with bupivacaine (30 μmol·L-1).).

*P<0.05,**P<0.01vscontrol.

3.3BUP不同孵育時(shí)間對(duì)Phe誘發(fā)血管收縮反應(yīng)的影響標(biāo)本在給予BUP前，BUP組(3個(gè)亞組)與對(duì)照組Phe(0.0001～30 μmol·L-1)誘發(fā)血管收縮反應(yīng)相比，Phe誘發(fā)的第1輪收縮反應(yīng)曲線差異未見顯著性(P>0.05，F(xiàn)ig 3A)。BUP各組標(biāo)本給予30 μmol·L-1濃度BUP分別孵育5min、10min、15min后，單濃度Phe(10 μmol·L-1)誘發(fā)的收縮反應(yīng)，與對(duì)照組相比，差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，F(xiàn)ig 3B)。3.4內(nèi)皮舒血管因子抑制劑對(duì)BUP增強(qiáng)Phe誘發(fā)血管收縮反應(yīng)的影響首次以1 μmol·L-1濃度Phe預(yù)收縮BUP組以及對(duì)照組血管標(biāo)本時(shí)，將兩組的收縮幅度作組間比較，未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05，F(xiàn)ig 4A)；第2次以1 μmol·L-1濃度Phe預(yù)收縮標(biāo)本時(shí)，BUP組以及對(duì)照組血管的收縮幅度，組間比較時(shí)差異仍無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，F(xiàn)ig 4A)，但是4個(gè)抑制劑可使1 μmol·L-1濃度Phe的預(yù)收縮明顯增強(qiáng)，即第2次預(yù)收縮明顯強(qiáng)于第1次(P<0.01，F(xiàn)ig 4A)。4個(gè)抑制劑尚可使ACh誘發(fā)的血管舒張反應(yīng)幾乎全部消失(Fig 4B)。標(biāo)本在給予BUP前，BUP組與對(duì)照組Phe(0.0001～30 μmol·L-1)誘發(fā)血管收縮的Emax值分別為(2.69±0.06) g和(2.76±0.10) g，-LogEC50(mol·L-1)值分別為7.02±0.06和7.00±0.09，兩組間比較差異未見顯著性(P>0.05，F(xiàn)ig 5A)。標(biāo)本給予BUP后，第2輪Phe(0.0001～30 μmol·L-1)誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)，與對(duì)照組標(biāo)本相比差異亦未見顯著性(P>0.05，F(xiàn)ig 5B)。

Fig 3　Vasoconstrictive responses to phenylephrine in isolated endothelium-intact rat aorta before (A) and after (B) 5, 10 and

4　討論

血管內(nèi)皮細(xì)胞具有分泌血管舒張因子的功能,在調(diào)節(jié)血管張力和血壓調(diào)控方面發(fā)揮重要作用。內(nèi)皮依賴性血管舒張因子主要由NO、PGI2以及內(nèi)皮衍生超極化因子(endothelium derived hyperpolarizing factor，EDHF)組成[10-13]。EDHF介導(dǎo)的血管舒張反應(yīng)與平滑肌細(xì)胞膜上的鈣激活鉀通道開放有關(guān)，該通道包括小電導(dǎo)鈣激活鉀通道 (SKca)、中電導(dǎo)鈣激活鉀通道(IKca)和大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(BKca)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，ChTX阻斷EDHF途徑中的BKca和IKca通道，apamin則阻斷EDHF途徑中的SKca通道；此外Indo和L-NAME分別阻斷PGI2和NO合成；聯(lián)合應(yīng)用這4種工具藥可以完全取消ACh誘發(fā)的動(dòng)物離體胸主動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性血管舒張反應(yīng)[14-16]。

Fig 4　Vasoconstrictive responses (A) to phenylephrine (1 μmol·L-1) and vasodilator responses (B) to acetylcholine (10 μmol·L-1) in isolated endothelium-intact rat aorta before (First) and after (Second) treatment with indomethacin (10 μmol·L-1), ChTX (0.05 μmol·L-1), apamin

P>0.05vscontrol

本研究中，我們分別采用機(jī)械損傷和藥物抑制兩種方法，分析血管內(nèi)皮在BUP增強(qiáng)Phe誘發(fā)大鼠離體胸主動(dòng)脈收縮反應(yīng)中的作用。在內(nèi)皮完整血管標(biāo)本，我們重現(xiàn)了BUP孵育20 min后明顯增強(qiáng)Phe誘發(fā)血管收縮反應(yīng)這一現(xiàn)象(Fig 1B)。然而BUP孵育時(shí)間短于20 min時(shí)，不能發(fā)揮增強(qiáng)效應(yīng)。在內(nèi)皮損傷的血管標(biāo)本上，不僅沒有觀察到BUP對(duì)Phe誘發(fā)血管收縮的增強(qiáng)作用；相反，我們發(fā)現(xiàn)BUP孵育20 min后，使Phe誘發(fā)的濃度-收縮曲線右移，特別是BUP對(duì)低濃度Phe的收縮反應(yīng)具有較強(qiáng)的抑制作用，高濃度Phe收縮反應(yīng)未受明顯影響(Fig 2B)。本研究中，聯(lián)合應(yīng)用4種工具藥[17-18]完全取消了ACh誘發(fā)的內(nèi)皮依賴性舒張反應(yīng)，亦使1 μmol·L-1濃度Phe誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)明顯增強(qiáng)(Fig 4A)。聯(lián)合應(yīng)用4種工具藥抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的舒張功能后，BUP增強(qiáng)Phe誘發(fā)血管收縮反應(yīng)這一現(xiàn)象消失(Fig 5B)。綜合分析上述研究結(jié)果，我們認(rèn)為BUP增強(qiáng)Phe誘發(fā)血管收縮的效應(yīng)與BUP抑制內(nèi)皮細(xì)胞的舒張功能密切相關(guān)，該抑制作用具有一定的時(shí)間依賴性。

Fig 5　Vasoconstrictive responses to phenylephrine in isolated endothelium-intact rat aorta pretreated with indomethacin (10 μmol·L-1), ChTX (0.05 μmol·L-1), apamin

在機(jī)械損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)與聯(lián)合應(yīng)用4種工具藥實(shí)驗(yàn)中，BUP影響Phe誘發(fā)血管收縮的實(shí)驗(yàn)結(jié)果略有差異。我們推測(cè)BUP對(duì)血管平滑肌細(xì)胞α1受體介導(dǎo)的血管收縮反應(yīng)，可能僅僅具有抑制作用，并無直接的增強(qiáng)效應(yīng)。由于機(jī)械操作損傷了血管內(nèi)皮的屏障作用，使得BUP更容易直接作用于血管平滑肌，導(dǎo)致較低濃度Phe誘發(fā)的血管收縮更容易被抑制。相反，在聯(lián)合應(yīng)用4種工具藥實(shí)驗(yàn)中，由于血管內(nèi)皮的屏障作用沒有受到損害，30 μmol·L-1的BUP孵育20 min尚難以發(fā)揮抑制作用。在內(nèi)皮完整的大鼠胸主動(dòng)脈標(biāo)本上，BUP如若發(fā)揮抑制Phe誘發(fā)收縮的作用，尚需更高濃度或更長(zhǎng)的孵育時(shí)間[3]。總之，我們的研究結(jié)果證實(shí)，在大鼠離體胸主動(dòng)脈，BUP對(duì)α1受體介導(dǎo)收縮的增強(qiáng)作用與其抑制血管內(nèi)皮的舒張功能密切相關(guān)，這種抑制作用間接導(dǎo)致Phe誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)明顯增強(qiáng)。

(致謝：本研究的所有工作均在河北醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院的中西醫(yī)結(jié)合研究所進(jìn)行。任雷鳴教授設(shè)計(jì)并指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)研究，張賀飛、許文琪、都倩、趙靜及2014級(jí)中西醫(yī)臨床專業(yè)夏紅月完成實(shí)驗(yàn)，任雷鳴、張賀飛、夏紅月書寫論文。)

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Role of endothelium in enhancement of α1-adrenoceptor-mediated vasoconstriction by bupivacaine in isolated rat aorta

ZHANG He-fei，XU Wen-qi，DU Qian，ZHAO Jing，XIA Hong-yue，REN Lei-ming

(DepartmentofPharmacology,CollegeofChineseIntegrativeMedicine,HebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050017,China)

AimTo investigate the role of endothelium in the enhancement of phenylephrine-mediated vasoconstriction by bupivacaine in the isolated rat aorta. MethodsThe isolated rat aortic rings were prepared, and the vascular endothelium was removed chemically or physically. Phenylephrine-mediated vasoconstriction was recorded. ResultsA pretreatment with bupivacaine at 30 μmol·L-1for 20 min significantly increased the Emax value of vasoconstrictive responses to phenylephrine from 2.22±0.07 g of solvent-controlled group to 2.50±0.05 g (P<0.01) in the isolated endothelium-intact rat aorta. However, the Emax value was not significantly changed by a pretreatment with bupivacaine at 30 μmol·L-1for 5, 10 or 15 min (P>0.05). A pretreatment with bupivacaine at 30 μmol·L-1for 20 min slightly but significantly inhibited the vasoconstrictive responses to low concentration of phenylephrine in the isolated endothelium-denuded rat aorta (P<0.05). In the isolated endothelium-intact rat aorta under a combined treatment with indometacin, ChTX, apamin and L-NAME, the vasodilator responses to acetylcholine were completely suppressed, and a pretreatment with bupivacaine at 30 μmol·L-1for 20 min did not significantly affect the vasoconstrictive responses to phenylephrine (P>0.05). ConclusionBupivacaine enhances α1-adrenoceptor-mediated vasoconstriction by inhibiting vascular endothelium in the isolated endothelium-intact rat aorta, Which potentiates indirectly the vasoconstrictive responses to phenylephrine.

bupivacaine; phenylephrine; aorta; vasoconstriction; endothelium; rat

2016-01-09，

2016-04-08

國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)資助項(xiàng)目(No 2012CB518601)；河北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No p016206030，p014206367)

張賀飛 (1991-)，男，碩士生，研究方向：心血管藥理學(xué)，E-mail: 549193649@qq.com；任雷鳴 (1956-)，男，教授，研究方向：心血管及自主神經(jīng)藥理學(xué)，通訊作者，Tel:0311-86266722, E-mail: ren-leiming@263.net

10.3969/j.issn.1001-1978.2016.07.015

A

1001-1978(2016)07-0960-06

R-332；R322.121；R331.32；R392.11；R971.2

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