陜西省人民醫(yī)院普外二科(西安 710068)　劉　斌　蘇曉麗　劉　棟　龍延濱

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DPD組織和Ki-67蛋白在青年結(jié)腸癌及癌前病變中表達(dá)及其臨床意義

陜西省人民醫(yī)院普外二科(西安 710068)劉斌蘇曉麗劉棟龍延濱

摘要目的：分析二氫嘧啶脫氫酶(DPD)組織和細(xì)胞增殖核抗原(Ki-67)蛋白在青年結(jié)腸癌及癌前病變中的表達(dá)及其臨床意義。方法：選取青年結(jié)腸癌患者67例(實(shí)驗(yàn)組)和癌旁正常組織(對(duì)照組)65例，采用免疫組化方法檢測(cè)兩組DPD組織和Ki-67蛋白的表達(dá)，并對(duì)比分析其臨床意義。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組二氫嘧啶脫氫酶組織陽(yáng)性率與細(xì)胞增殖核抗原Ki-67的陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；二氫嘧啶脫氫酶組織與細(xì)胞增殖核抗原蛋白在青年結(jié)腸癌及癌前病變中的表達(dá)中呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)；二氫嘧啶脫氫酶、細(xì)胞增殖核抗原Ki-67二者之間與結(jié)腸癌及癌前病變中的病理特征關(guān)系：與PTNM分期、分化程度等比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與性別、年齡等比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：DPD組織和Ki-67蛋白均參與了結(jié)腸癌以及癌變的發(fā)生發(fā)展。

主題詞結(jié)腸腫瘤二氫尿嘧啶脫氫酶@細(xì)胞增殖核抗原蛋白

結(jié)腸癌發(fā)生率近年來(lái)呈現(xiàn)上升的發(fā)展趨勢(shì)[1-3],患者早期臨床癥狀中無(wú)顯著表現(xiàn)，在確診之后往往已經(jīng)到了中期或者晚期。選取在我院收治的結(jié)腸癌患者67例作為研究對(duì)象(實(shí)驗(yàn)組)，另外選取同期收治的65例癌旁正常組織作為對(duì)照組，觀察分析兩組二氫嘧啶脫氫酶(DPD)組織與細(xì)胞增殖核抗原(Ki-67)蛋白的表達(dá)及臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

資料與方法

1一般資料將2014年12月至2015年11月我院收治青年結(jié)腸癌患者132例分為兩組。實(shí)驗(yàn)組中，男性50例，女性17例，平均年齡42.33±3.24歲，TNM病理分期：I期24例、II期18例、III期10例、IV期15例；高分化21例、中分化38例、低分化8例。對(duì)照組中，男性48例，女性17例，平均年齡42.56±3.63歲。兩組年齡、性別比例等一般資料比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

2研究方法

2.1試劑：鼠抗人二氫嘧啶脫氫酶單克隆抗體、兔抗人細(xì)胞增殖核抗原蛋白單克隆抗體，采用免疫組織化學(xué)試劑盒(上海澤邁生物技術(shù)有限公司)，按照相關(guān)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作處理。

2.2免疫組化染色：應(yīng)用免疫組化染色二步法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組腫瘤組織及對(duì)照組癌旁正常組織(距腫瘤邊緣大于50mm正常組織)二氫嘧啶脫氫酶(DPD)組織、細(xì)胞增殖核抗原(Ki-67)蛋白的表達(dá)水平。二氫嘧啶脫氫酶陽(yáng)性染色呈現(xiàn)棕黃色顆粒，位于細(xì)胞質(zhì)兔抗人細(xì)胞增殖核抗原蛋白陽(yáng)性染色呈現(xiàn)棕黃色顆粒。分析兩組二氫嘧啶脫氫酶、細(xì)胞增殖核抗原Ki-67與結(jié)腸癌及癌前病變中的病理特征關(guān)系。

2.3結(jié)果判定：在雙盲情況下由兩名或者兩名以上經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師觀察其結(jié)果，并提供適當(dāng)評(píng)價(jià)。均隨機(jī)觀察兩組6個(gè)500倍高倍視野，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分比來(lái)進(jìn)行積分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比小于5%計(jì)為0分，5%～25%計(jì)為1分，26%～50%計(jì)為2分，51%～75%計(jì)為3分，大于75%計(jì)為4分。 根據(jù)顯色強(qiáng)度分別進(jìn)行計(jì)分：未著色計(jì)為0分，淺黃色計(jì)為1分，棕黃色計(jì)為2分，棕褐色計(jì)為4分。 根據(jù)陽(yáng)性百分比與顯色強(qiáng)度兩種分?jǐn)?shù)累積得出最終結(jié)果：陽(yáng)性表達(dá)為+(2～5分)、++(6～9分)、+++(大于或者等于10分)，陰性表達(dá)為-(0～1分)。

結(jié)果

1兩組二氫嘧啶脫氫酶與細(xì)胞增殖核抗原Ki-67陽(yáng)性率比較實(shí)驗(yàn)組二氫嘧啶脫氫酶表達(dá)陽(yáng)性率與細(xì)胞增殖核抗原Ki-67陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1　兩組DPD組織、Ki-67蛋白陽(yáng)性率比較[n(%)]

2二氫嘧啶脫氫酶與細(xì)胞增殖核抗原蛋白在青年結(jié)腸癌及癌前病變中的表達(dá)關(guān)系二氫嘧啶脫氫酶組織與細(xì)胞增殖核抗原蛋白在青年結(jié)腸癌及癌前病變中的表達(dá)中呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.256,0.158，P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2　DPD組織、Ki-67蛋白在青年結(jié)腸癌及癌前病變中的表達(dá)(n)

注：兩組比較P<0.05

3二氫嘧啶脫氫酶、細(xì)胞增殖核抗原Ki-67二者之間與結(jié)腸癌及癌前病變中的病理特征關(guān)系二氫嘧啶脫氫酶、細(xì)胞增殖核抗原Ki-67二者與PTNM分期、分化程度等比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與性別、年齡比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

討論

結(jié)腸癌好發(fā)于40～50歲的人群，男性比例遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于女性比例[4-6]。結(jié)腸癌主要被分為以下三種類(lèi)型：未分化癌，黏液腺癌，腺癌[7-8]。結(jié)腸癌一般是沿著腸壁發(fā)展，除向淋巴管侵犯之外，還向腹腔內(nèi)種植面擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。 尋找到治療結(jié)腸癌生物學(xué)的相關(guān)指標(biāo)物能夠?qū)Y(jié)腸癌的評(píng)價(jià)以及預(yù)后等具有重要的價(jià)值，諸多研究資料表明二氫嘧啶脫氫酶(DPD)組織是限速酶，與核酸的合成與分解形成密切相關(guān)性[9-10]。近年來(lái)，研究二氫嘧啶脫氫酶(DPD)組織的抗癌效應(yīng)已經(jīng)逐漸成為消化道惡性腫瘤的研究熱點(diǎn)。目前認(rèn)為，細(xì)胞增殖核抗原蛋白是應(yīng)用最為廣泛的增殖細(xì)胞標(biāo)志物，能夠有效檢測(cè)到腫瘤增殖活性。

本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組二氫嘧啶脫氫酶組織陽(yáng)性率86.57%(58/67)、陰性率13.43%(9/67)，細(xì)胞增殖核抗原Ki-67的陽(yáng)性率為67.16%(45/67)、陰性率為32.84%(22/67)。結(jié)腸癌在5FU分解代謝初始階段中是為降解酶，在輔助基因的參與下，能夠?qū)⑵溥€原成為二氫氟尿嘧啶，經(jīng)過(guò)二氫嘧啶酶打開(kāi)環(huán)狀結(jié)構(gòu)后產(chǎn)生FUPA(酰脲丙酸)，在酰脲丙酸的催化下形成FBAL(丙氨酸)，最終經(jīng)過(guò)腎臟排出。二氫嘧啶脫氫酶組織進(jìn)入到人體內(nèi)自后，有78%以上是在肝臟位置以及其他位置分解而出，作為 一種極少比例的細(xì)胞毒性合成，二氫嘧啶脫氫酶組織在分解過(guò)程中起到的是最為關(guān)鍵酶作用。實(shí)驗(yàn)組二氫嘧啶脫氫酶組織以及細(xì)胞增殖核抗原蛋白的陽(yáng)性例數(shù)與陰性例數(shù)均為40例、18例，二氫嘧啶脫氫酶組織以及細(xì)胞增殖核抗原蛋白的陰性例數(shù)均為5例、二氫嘧啶脫氫酶組織以及細(xì)胞增殖核抗原蛋白均為4例。從上述數(shù)據(jù)不難看出，細(xì)胞增殖核抗原蛋白是增殖細(xì)胞的主要標(biāo)記物，可以被見(jiàn)于所有細(xì)胞的活動(dòng)階段中。細(xì)胞增殖核抗原蛋白的相關(guān)表達(dá)與細(xì)胞周期密切相關(guān)，因此細(xì)胞增殖核抗原蛋白是檢測(cè)增殖活性的最理想標(biāo)志物。

綜上所述，二氫嘧啶脫氫酶(DPD)組織和細(xì)胞增殖核抗原(Ki-67)蛋白在青年結(jié)腸癌及癌前病變中的表達(dá)均比較高與其不良預(yù)后有密切關(guān)系，DPD組織和Ki-67蛋白均參與了結(jié)腸癌以及癌變的發(fā)生發(fā)展。

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(收稿：2016-04-12)

【中圖分類(lèi)號(hào)】R735.3

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.08.057