朱　國(guó)，師福山

(1.浙江大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院，浙江杭州 310058； 2.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院)

?

寵物診療

兩例犬埃里希氏體病的診斷與治療

朱國(guó)1，2，師福山2*

(1.浙江大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院，浙江杭州 310058； 2.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院)

犬埃里希氏體病由埃里希氏體感染所致、致死率較高。該病最早發(fā)現(xiàn)于非洲阿爾及利亞，多以蜱為傳染媒介，常見(jiàn)于熱帶和亞熱帶地區(qū)[1-2]。

筆者曾在臨床診療中診治過(guò)兩例疑似犬埃里希氏體感染病例，抗體檢測(cè)均為陽(yáng)性，經(jīng)治療后臨床癥狀消失，患犬恢復(fù)良好，現(xiàn)報(bào)告如下，供參考。

1發(fā)病情況

薩摩耶犬。雌性，7歲。就診時(shí)食欲減退，精神不振，呼吸困難，一年前曾有蜱蟲(chóng)感染史，出現(xiàn)兩側(cè)鼻腔出血，經(jīng)外用止血后好轉(zhuǎn)，最近又反復(fù)發(fā)作5次。

蘇格蘭牧羊犬。雄性，5歲。就診時(shí)精神狀況良好，飲食正常，兩側(cè)鼻腔反復(fù)出現(xiàn)出血。半年前曾有蜱蟲(chóng)感染史。

2臨床癥狀

該病臨床癥狀一般表現(xiàn)為發(fā)熱、食欲減退、鼻衄、眼鼻分泌物增多、呼吸困難、貧血、血小板較少和高球蛋白血癥等癥狀[3-4]。

薩摩耶犬。就診時(shí)體溫41℃，可視黏膜輕度蒼白，呼吸急促，有心雜音。

蘇格蘭牧羊犬。就診時(shí)體溫39℃,可視黏膜顏色正常，呼吸平緩，鼻腔粘膜充血。

3實(shí)驗(yàn)室檢查

3.1血常規(guī)檢查前肢靜脈采血1 mL，EDTA抗凝，采用愛(ài)德仕動(dòng)物專(zhuān)用全自動(dòng)五分類(lèi)血球儀進(jìn)行血常規(guī)檢查，結(jié)果詳見(jiàn)表1。

表1　血常規(guī)檢查結(jié)果

由表1可見(jiàn)，薩摩耶犬結(jié)果顯示貧血，嗜中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞升高，血小板降低嚴(yán)重；蘇格蘭犬結(jié)果顯示輕度貧血，血小板減低。

3.2血液生化檢查前肢靜脈采血3 mL，肝素鋰抗凝，離心后分離血漿，采用愛(ài)德仕動(dòng)物專(zhuān)用全自動(dòng)生化儀進(jìn)行血液生化檢查，結(jié)果詳見(jiàn)表2。

由表2可見(jiàn)，薩摩耶犬結(jié)果顯示有氮血癥，肝臟指標(biāo)輕度上升，高球蛋白血癥，表明肝腎功能損傷；蘇格蘭牧羊犬結(jié)果顯示有球蛋白血癥，其余正常。

3.3B超檢查對(duì)兩患犬進(jìn)行腹部B超檢查，均可見(jiàn)有明顯脾臟腫大。結(jié)果見(jiàn)圖1、圖2。

表2　血液生化檢查結(jié)果

圖1　蘇格蘭牧羊犬脾臟腫大，尾端鈍圓

圖2　薩摩耶犬脾臟回聲增強(qiáng)腫大，尾端延至膀胱

3.4犬埃里希氏體抗體檢測(cè)前肢靜脈采血3 mL，肝素鋰抗凝，離心后分離血漿，采用愛(ài)德仕犬埃里希氏體間接熒光抗體測(cè)定，兩患犬結(jié)果均為埃里希氏體抗體陽(yáng)性。詳見(jiàn)圖3。

圖3　犬埃里希氏體抗體顯示為陽(yáng)性

4治療方法

薩摩耶犬。輸液糾正氮血癥，保肝補(bǔ)血，多西環(huán)素5 mg/kg口服，每日兩次，1周后癥狀好轉(zhuǎn)，飲食正常，肝腎功能指標(biāo)正常，血小板低癥較前次檢測(cè)有所上升。繼續(xù)口服多西環(huán)素，2周后指標(biāo)恢復(fù)正常。連續(xù)口服多西環(huán)素4周，未見(jiàn)癥狀反復(fù)，停藥。

蘇格蘭牧羊犬。由于精神狀態(tài)良好，給予多西環(huán)素5 mg/kg口服，每日兩次，開(kāi)始服藥后1周內(nèi)曾出現(xiàn)兩次鼻血現(xiàn)象，連續(xù)口服3周，未再出現(xiàn)鼻血現(xiàn)象，復(fù)查血常規(guī)及肝腎功能正常。

5小結(jié)與討論

5.1病原學(xué)與流行特征犬埃里希氏體病，國(guó)內(nèi)譯作犬埃立克體病，包括犬單核細(xì)胞埃里希體病和犬粒細(xì) 胞埃里希體病，是一種以泛血細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)減少、血相異常、出血、消瘦、多數(shù)臟器漿細(xì)胞浸潤(rùn)和骨髓造血干細(xì)胞減少為主要特征的敗血性傳染病。1935年Donatien等在阿爾及利亞首次發(fā)現(xiàn)該病，當(dāng)時(shí)稱(chēng)犬立克次氏體癥, 1982年Keefe等報(bào)道世界范圍內(nèi)的犬科動(dòng)物都存在犬埃里希氏體感染，1984年在美國(guó)首次發(fā)現(xiàn)并確診人感染犬埃里希氏體病例，1999年潘華等曾報(bào)道稱(chēng)中國(guó)軍犬出現(xiàn)該病并成功分離到了病原體[5]。1991年曾在我國(guó)云南人群和犬群血液中查出抗查菲埃立克體抗體[6], 但至今未見(jiàn)病例報(bào)道。

早在1970年就已證實(shí)了血紅扇頭蜱是犬埃里希氏休病的傳播媒介,當(dāng)幼蜱和若蜱叮咬感染犬時(shí)即可感染病原,且當(dāng)幼、若蜱蛻皮發(fā)育成成蟲(chóng)后,可將其所帶的埃里希氏體感染健康犬,但有報(bào)道在40只感染雌蜱中無(wú)蜱蟲(chóng)可將犬埃里希氏體感染其后代。上述研究表明血紅扇頭蜱只是犬埃里希氏體的傳播媒介,而不是宿主[7]。犬埃里希氏體病多發(fā)于夏季和秋季，這種季節(jié)性的發(fā)病規(guī)律可能與蜱的活動(dòng)規(guī)律、數(shù)量增加及傳播有關(guān)。

但因部分慢性感染犬的存在,因此在每年的其它季節(jié)也可診斷到該病。筆者診療到的兩病例都是秋季發(fā)病，但蜱蟲(chóng)感染史至少均在半年以前。

5.2臨床癥狀感染該病的患犬均表現(xiàn)為發(fā)熱，急性感染期則輕度血小板減少和血管炎，通常可引起瘀點(diǎn)或其他明顯的出血癥狀。慢性感染期則出現(xiàn)血小板減少、血管炎和血小板功能異常等。慢性感染期由于免疫刺激可引起肝腫大、脾腫大和淋巴結(jié)病變等癥狀。

非特異性化膿性多發(fā)性關(guān)節(jié)炎病犬表現(xiàn)四肢僵直，運(yùn)動(dòng)不耐受和腫脹性關(guān)節(jié)痛。中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀包括精神沉郁、疼痛、共濟(jì)失調(diào)、輕癱、眼球震顫和癲癇等[8]。

病犬血液生化檢查常見(jiàn)有高球蛋白血癥,血白蛋白減少,白蛋白/球蛋白比降低,1/3以上患犬血清堿性磷酸酶和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性增高，約有1/4患犬血清尿氮、肌酸酶和磷值升高,大多患犬有氮血癥[7]。

病理變化，犬埃里希氏體進(jìn)入機(jī)體后，可以包涵體形式寄生于患犬的嗜中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞內(nèi)，造成機(jī)體免疫系統(tǒng)損傷，并在肝臟內(nèi)引起網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞增生[9]； 感染后期可引起骨髓[10]、 淋巴結(jié)[11]及腎臟[9]病變。王衡等從病死患犬的病理組織學(xué)觀(guān)察發(fā)現(xiàn)有典型的腎小球周?chē)鷿{細(xì)胞增生性腎炎、間質(zhì)性漿細(xì)胞增生性腎炎、漿細(xì)胞增生性淋巴結(jié)炎、出血性漿細(xì)胞增生性脾炎以及急性壞死性漿細(xì)胞增生性肝炎等變化[12]。

本次診療的兩例患犬中，一例出現(xiàn)習(xí)慣性鼻衄、呼吸困難、發(fā)熱、食欲減退、脾腫大和生化指標(biāo)異常等典型癥狀；而另一例只出現(xiàn)習(xí)慣性鼻衄、脾腫大、血小板減少和高球蛋白血癥等癥狀。

5.3實(shí)驗(yàn)室診斷

血液直接涂片檢查。采集患犬初期或高熱期血液，涂片固定，姬姆薩染色鏡檢，在單核細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞中可見(jiàn)染成紫色或黑色埃里希氏體形成的包涵體，圓形或橢圓形，稱(chēng)為桑椹胚。

病原分離鑒定。病原分離培養(yǎng)仍是確證和鑒定埃里希氏體感染的重要手段之一，采集病犬急性期或高熱期外周血，分離白細(xì)胞，經(jīng)超聲波破碎細(xì)胞后，接種于商品化的人單核細(xì)胞或犬巨噬細(xì)胞系，培養(yǎng)后用電鏡檢查感染細(xì)胞胞漿中的包涵體。 埃里希氏體在培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)緩慢，接種細(xì)胞需培養(yǎng)1～2周后經(jīng)涂片和染色，才能在光鏡下觀(guān)察到由其生成的包涵體[5]。但是這種方法效率低且費(fèi)用高，無(wú)很高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

免疫熒光抗體檢查病原體。診斷埃里希氏體病的首選是免疫血清學(xué)方法，如間接免疫熒光法、 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)及ELISA等 ?？贵w效價(jià)在發(fā)病后的2～3周達(dá)到高峰,若雙份血清效價(jià)增高4倍以上即可確診。筆者曾用IDEXX公司的ELISA試劑盒檢測(cè)犬埃里希氏體抗體，兩患犬均出現(xiàn)了與犬埃里希氏體病一致的臨床癥狀，用藥治療后相應(yīng)臨床癥狀消失，所以?xún)苫既罱K診斷為犬埃里希氏體病。根據(jù)IDEXX公司介紹，犬四合一快速檢測(cè)試劑盒與犬埃里希氏體間接熒光抗體試驗(yàn)對(duì)照，其結(jié)果相對(duì)敏感度為97.8%，相對(duì)特異性為92.3%，所以試劑盒對(duì)診斷犬埃里希氏體病非常實(shí)用。

PCR檢測(cè)。根據(jù)Genebank中犬埃里希氏體的16S rRNA基因序列設(shè)計(jì)合成一對(duì)特異性引物，從病犬血標(biāo)本或接種的細(xì)胞懸液中提取DNA作為PCR擴(kuò)增模板, 反應(yīng)體系經(jīng)PCR儀擴(kuò)增后,擴(kuò)增產(chǎn)物在1.4%瓊脂糖凝膠中電泳后用溴化乙錠染色,紫外燈下觀(guān)察結(jié)果，發(fā)現(xiàn)389 bp大小的擴(kuò)增片段即可確診[5]。

5.4治療與預(yù)防

根據(jù)臨床癥狀給予支持療法，可用四環(huán)素、多西環(huán)素和米多卡二丙酸鹽等多種抗生素進(jìn)行治療。筆者曾用多西環(huán)素按5 mg/kg體重，每天兩次口服，連用4周，取得了良好的治療效果。

治療效果檢測(cè)?？贵w效價(jià)不能有效的監(jiān)控治療情況，美國(guó)獸醫(yī)內(nèi)科學(xué)院傳染病研究院小組建議以血小板減少癥和高球蛋白血癥的小腿為標(biāo)志，可監(jiān)控病原體的消除情況。如果用PCR進(jìn)行評(píng)價(jià)治療效果，應(yīng)在停止治療2周后重復(fù)一次檢查，若仍為陽(yáng)性，則應(yīng)重新治療4周，然后再檢測(cè)；如果2個(gè)治療周期后PCR檢測(cè)仍為陽(yáng)性，那么就應(yīng)選用其他抗埃里希氏體病的藥物進(jìn)行治療[8]。

埃里希氏體病有可能出現(xiàn)免疫介導(dǎo)性疾病引發(fā)的紅細(xì)胞或血小板破壞，因此建議用抗炎劑量或免疫抑制劑量的糖皮質(zhì)激素，以改善患犬狀況。

預(yù)防措施。盡管人類(lèi)不會(huì)在處理感染犬的過(guò)程中感染埃里希氏體病，但是犬可能是病原體的宿主，在人類(lèi)被感染過(guò)程中，犬可能扮演了將傳播媒介帶入人類(lèi)生活環(huán)境的角色。

蜱是本病的傳播媒介，因此防止蜱感染是防止犬埃里希氏體病的關(guān)鍵。此外，應(yīng)盡量避免對(duì)犬采用不合格的方式輸入全血或血液制品，以防犬體感染。

美國(guó)Liangbiao Hu等人已于2004年和2005年兩次申請(qǐng)了制造犬埃里希氏體滅活苗的兩項(xiàng)專(zhuān)利,但到目前為止世界上還沒(méi)有商品化的犬埃里希氏體疫苗可供使用。

參考文獻(xiàn)

[1]Sacchini F,Cessford R J, Robinson B M, Outbreak of canine monocytic ehrlichiosis in Saudi Arabin [J]. Vet Clin Pathol,2007,36(4):331-335.

[2]Irwin P J . The first report of canine ehrlichiosis in Australia. Aust Vet [J]. 2001, 79(8): 552-553.

[3]Breitschwerdt E B, Woody B J, Zerbe C A,et al . Monoclonal gammopathy associated with naturally occurring canine ehrlichiosis [J]. J Vet Intern Med, 1987,1(1):2-9.

[4]Shipov A, Klement E, Reuveni-Tager L, et al. Prognostic indicators for canine monocytic ehrlichiosis [J].Vet Parasitol,2008,153(1-2):131-138.

[5]鄭立儀,朱恩炯,劉建紅.犬埃里希體病的診治和預(yù)后[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2011,2:64-66.

[6]于恩庶,林繼煌,陳觀(guān)今,等.中國(guó)人獸共患病學(xué)[M].2版.福州:福建科學(xué)技術(shù)出版社,1996.562- 566.

[7]于維軍，趙乃明.埃里希氏體病研究進(jìn)展[J].中國(guó)獸醫(yī)科技.1993,23(8):18-21.

[8]Nelson Richard W，Couto C，Guillermo.小動(dòng)物內(nèi)科學(xué)[M].3版.夏兆飛，張海彬，袁占奎.譯.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2012:1219-1223.

[9]Reardon M J, Pierce K R. Acute experimental canine ehrlichiosis . I. Sequential reaction of the hemic and lymphoreticular systems [J].Vet Pathol,1981,18(1):48-61.

[10]Kuehn N F, Gaunt S D. Clinical and hematologic findings in canine ehrlichiosis [J]. J Am Vet Med Assoc,1985,186(4):355-358.

[11]Mylonakis M E, Borjesson D L, Leontides L, et al. Cytologic patterns of lymphadenopathy in canine monocytic ehrlichiosis [J]. Vet Clin Pathol, 2011, 40(1) :78-83

[12]王衡，寧章勇，遠(yuǎn)立國(guó)等.犬埃里希氏體病的病例組織學(xué)觀(guān)察[J]. 中國(guó)獸醫(yī)雜志.2011(47),10:64-65.

收稿日期：2016-01-07

作者簡(jiǎn)介：朱國(guó)(1981-)，獸醫(yī)師，博士，研究方向：小動(dòng)物疾病。E-mail:31364705@qq.com

通訊作者：師福山，講師，研究方向：小動(dòng)物疾病。

中圖分類(lèi)號(hào)：S858.292

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1005-7307(2016)04-0035-004