吳贇竑，周彩琴，孫冰冰，吳雪軍，張紅麗，劉愛軍，柴　娟，趙靈燕

(浙江省動物疫病預(yù)防控制中心，浙江杭州 311199)

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試驗研究

2015年浙江省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果分析

吳贇竑，周彩琴，孫冰冰，吳雪軍，張紅麗，劉愛軍，柴娟，趙靈燕

(浙江省動物疫病預(yù)防控制中心，浙江杭州 311199)

摘要：為提高浙江省各級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室的檢測能力，對省內(nèi)40個獸醫(yī)實驗室H7N9流感病毒抗體檢測(H7N9-AI Ab)，A型口蹄疫病毒抗體檢測(A-W Ab)和小反芻獸疫病毒檢測(PPRV)比對。結(jié)果表明，參加比對的40個獸醫(yī)實驗室中有28個實驗室H7N9-AI Ab比對，正確率為70.00%；有37個實驗室A-W Ab比對，正確率為92.50%；有16個實驗室PRRV比對，正確率為80.00%。

關(guān)鍵詞：檢測能力；H7N9-AI Ab；A-W Ab；PRRV；獸醫(yī)實驗室

中國合格評定國家認可委員會在ISO/IEC導則43中將實驗室間比對定義為：按照預(yù)先規(guī)定的條件，由兩個或多個實驗室對相同或類似被測物品進行檢測的組織、實施和評價。開展實驗室比對試驗不僅能提高和促進實驗室的檢測能力，行業(yè)主管部門還能監(jiān)控實驗室的檢測能力，從而做到識別和縮小實驗室之間檢測結(jié)果的差異[1]。而且，通過實驗室間比對，還能監(jiān)控已建立測量方法的有效性和可比性，識別實驗室的問題以采取糾正措施[2]。本文所指的獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室是指隸屬于各級獸醫(yī)主管部門，承擔動物疫病診斷、檢測和監(jiān)測等任務(wù)的獸醫(yī)實驗室[3]。開展獸醫(yī)實驗室檢測能力比對，是評價獸醫(yī)實驗室檢測技術(shù)水平的重要手段，也是加強獸醫(yī)實驗室質(zhì)量控制的有效方法[4]。

為提高浙江省各級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室的檢測能力，依據(jù)農(nóng)業(yè)部辦公廳和浙江省畜牧獸醫(yī)局有關(guān)2015年獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對工作的文件要求[5-6]，浙江省畜牧獸醫(yī)局于2015年8月組織開展浙江省獸醫(yī)實驗室檢測能力比對工作。全省共有40個市、縣、區(qū)獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室參加，并在規(guī)定時間內(nèi)完成了所有比對項目并上報結(jié)果。比對結(jié)果能客觀反應(yīng)實驗室的檢測水平和技術(shù)，對比對結(jié)果進行分析能進一步做好實驗室管理工作[3]。

1材料與方法

1.1比對項目根據(jù)浙江省畜牧獸醫(yī)局有關(guān)2015年獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對工作的文件要求[6]，該次比對共設(shè)置3個項目，分別為H7N9流感病毒抗體檢測(H7N9-AI Ab)、A型口蹄疫病毒抗體檢測(A-W Ab)和小反芻獸疫病毒檢測(PPRV)。

1.2比對方法比對各項目所采用的方法，依據(jù)標準及所用試劑詳見表1。

表1　比對試驗的標準、方法和試劑

注：*具備熒光RT-PCR或RT-PCR檢測能力的實驗室需參加此項能力比對，不具備該檢測能力的實驗室無需參加；**根據(jù)實驗室能力范圍選擇使用RT-PCR熒光，還是RT-PCR方法。其中7個實驗室采用RT-PCR熒光方法，13個實驗室采用普通RT-PCR方法。

1.3比對樣品進行比對的血清及病毒樣品均已進行效價定量和病毒定性試驗。

1.3.1H7N9-AI Ab樣品參考值為<1、7、9、11的雞血清中隨機抽取5份組成1組樣品。

1.3.2A-W Ab樣品參考值為<1∶8、1∶180、1∶720的牛血清中隨機抽取5份組成1組樣品。

1.3.3PRRV樣品參考值為陽性、弱陽性和陰性的病毒樣品中隨機抽取6份組成1組樣品。

1.4評判標準

1.4.1H7N9-AI Ab評判標準全部比對樣品檢測值效價在參考值效價±1(包括±1)范圍內(nèi)，判為結(jié)果正確；有一個及以上樣品檢測值偏離參考值±2及以上，判為比對結(jié)果存在較大偏差。

1.4.2A-W Ab評判標準全部比對樣品檢測值效價在參考值效價±1(包括±1)范圍內(nèi)，判為結(jié)果正確；有一個及以上樣品檢測值偏離參考值±1以上，判為比對結(jié)果存在較大偏差。

1.4.3PRRV評判標準小反芻獸疫病毒檢測結(jié)果與參考值完全一致，判為結(jié)果正確；與參考值不一致，判為比對結(jié)果存在較大偏差。

2結(jié)果與分析

2.1總體結(jié)果根據(jù)檢測結(jié)果評判，參加比對的40個獸醫(yī)實驗室中有22個實驗室參加的所有比對項目檢測結(jié)果全部正確，其中4個實驗室全部比對項目的檢測結(jié)果與參考值完全一致。有17個實驗室有1個比對項目存在較大偏差，有1個實驗室有2個比對項目部分比對檢測值存在較大偏差。

2.2H7N9-AI Ab比對結(jié)果該項目共有28個實驗室對5份樣品檢測結(jié)果全部正確，實驗室比對正確率為70.00%。12個實驗室的部分樣品檢測值與參考值存在較大偏差(詳見表2)。

表2　H7N9-AI Ab比對試驗結(jié)果

2.3A-W Ab比對結(jié)果該項目共有37個實驗室對5份樣品檢測結(jié)果全部正確，實驗室比對正確率為92.50%。3個實驗室的部分樣品檢測值與參考值存在較大偏差(詳見表3)。

表3　A-W Ab比對試驗結(jié)果

2.4PRRV比對結(jié)果該項目共有16個實驗室對6份樣品檢測結(jié)果全部正確，實驗室比對正確率為80.00%。7個采用熒光RT-PCR方法的實驗室檢測結(jié)果全部正確，采用普通RT-PCR方法的13個實驗室中，有4個實驗室的部分樣品檢測值與參考值存在較大偏差(詳見表4)。

表4　PRRV比對試驗結(jié)果

3小結(jié)與討論

本次獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對總體情況良好，其中22個實驗室參加的所有比對項目檢測結(jié)果全部正確，三項比對項目的正確率均達到70%或以上；有4個實驗室全部比對項目的檢測結(jié)果與參考值完全一致，說明全省大部分市、縣、區(qū)獸醫(yī)實驗室具備相應(yīng)動物疫病的檢測能力和技術(shù)水平。

本次比對試驗中，在需要經(jīng)驗進行主觀判斷的檢測項目中，出現(xiàn)了比需要客觀判斷的項目存在更多偏差，例如H7N9流感抗體血凝抑制試驗中，有30%實驗室出現(xiàn)部分比對樣品檢測值與參考值存在較大偏差，而相對的A型口蹄疫病毒抗體檢測(A-W Ab)，其正確率則達到92.50%。同樣，在小反芻獸疫病毒檢測中，采用熒光RT-PCR方法檢測的實驗室，其正確率為100%，而使用普通RT-PCR方法檢測的實驗室其正確率僅為69.23%(9/13)，這些需要主觀判斷的項目對實驗室人員的操作水平，經(jīng)驗和判斷能力提出了更高要求，說明部分實驗室在需要主觀判斷的項目中還存在著操作失誤、經(jīng)驗不足等問題。

本次比對試驗中，設(shè)置了參考值完全相同的平行樣品，部分實驗室檢測結(jié)果的平行性則相對較差，對參考值一致的不同編號樣品檢測出不同的結(jié)果，說明部分實驗室在檢測中存在較多的隨機誤差，實驗過程中對于細節(jié)的把握尤為重要，應(yīng)明確試驗操作流程，規(guī)范試驗操作，以確保實驗室檢測結(jié)果的穩(wěn)定性。

另外，雖然本次比對試驗中各實驗室報告和原始記錄的規(guī)范程度有所提高，但仍有部分實驗室的原始記錄中，出現(xiàn)所填檢測結(jié)果未按說明書要求進行表述、對錯誤結(jié)果進行涂改等現(xiàn)象，個別實驗室出具的檢測報告中出現(xiàn)的樣品原始編號和上報結(jié)果中的編號不一致等錯誤現(xiàn)象，有待進一步改進。

參考文獻

[1]王國勤，鐘淮濱.實驗室比對試驗的做法與體會[J].計量與測試技術(shù)，2011，38(10)：90-92.

[2]戴潤生.計量管理基礎(chǔ)知識系列講座：第八講，比對和能力驗證[J].中國計量，2008(8)：43-47.

[3]董昕欣，劉偉，邴國霞等.2014年全國省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果分析[J].中國獸醫(yī)雜志，2014,50(10)：101-103.

[4]王文，張繼紅，蘭玲等.2010年新疆獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對試驗的探討與建議[J].中國動物檢疫，2011,28(9)：19-21.

[5]農(nóng)業(yè)部辦公廳.農(nóng)業(yè)部辦公廳關(guān)于開展2015年獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對工作的通知[Z].農(nóng)辦醫(yī)〔2015〕7號.北京：農(nóng)業(yè)部辦公廳，2015-03-03.

[6]浙江省畜牧獸醫(yī)局.關(guān)于印發(fā)《2015年全省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對實施方案》的通知[Z].浙牧疫發(fā)〔2015〕27號.浙江：浙江省畜牧獸醫(yī)局，2015-05-14.

收稿日期：2015-12-08

中圖分類號：S854.4

文獻標識碼：A

文章編號：1005-7307(2016)04-0001-003