翟　博　張立春　李　旭　王春昕　趙云輝　張明新

(吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧科學(xué)分院，公主嶺136100)

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microRNA在反芻動(dòng)物中的研究進(jìn)展

翟博張立春李旭王春昕趙云輝張明新*

(吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧科學(xué)分院，公主嶺136100)

摘要：微小RNA(microRNA,miRNA)是一類長度在22個(gè)核苷酸左右的小分子非編碼RNA，通過與3＇端非翻譯區(qū)的堿基配對(duì)靶向調(diào)節(jié)mRNA的表達(dá)從而抑制其翻譯或降解。miRNA廣泛存在于動(dòng)物和植物中，可以參與調(diào)節(jié)多種發(fā)育調(diào)控和生物學(xué)過程，本文在總結(jié)miRNA的來源、作用機(jī)制、預(yù)測(cè)方法及其基因表達(dá)與功能的基礎(chǔ)上，綜述了其在反芻動(dòng)物中的研究進(jìn)展。

關(guān)鍵詞：microRNA；mRNA；表達(dá)；功能；反芻動(dòng)物

近年來，有4種非編碼的單鏈短序列RNA分子被相繼發(fā)現(xiàn)，分別為小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)、與Piwi蛋白相作用的RNA(piRNA)、微小RNA(microRNA,miRNA)及其他小RNA(eiRNA)，均是通過轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控細(xì)胞的功能及腫瘤發(fā)生等機(jī)體生命發(fā)生過程。隨著基因表達(dá)研究的不斷深入，miRNA受到研究者們的普遍關(guān)注。這是一類大家族非編碼RNA，可以介導(dǎo)RNA分子進(jìn)行基因的沉默，并通過基因轉(zhuǎn)錄、翻譯、表達(dá)來調(diào)節(jié)機(jī)體的生命活動(dòng)。本文針對(duì)miRNA在反芻動(dòng)物中的鑒定、表達(dá)和功能的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1miRNA的來源及作用機(jī)制

miRNA是一類22個(gè)核苷酸左右的小分子單鏈非編碼RNA，通過轉(zhuǎn)錄后調(diào)控抑制基因的表達(dá)。miRNA最初是在新桿狀線蟲中發(fā)現(xiàn)，因?yàn)槠湟种频鞍拙幋a基因lin-14的表達(dá)而被稱為lin-4。隨后多種動(dòng)植物中的上百種miRNA被發(fā)現(xiàn)，并且發(fā)現(xiàn)它們?cè)诙喾N生物學(xué)過程中發(fā)揮作用，包括細(xì)胞增殖、分化、凋亡和發(fā)育。

在真核生物中，miRNA大多是由自身編碼產(chǎn)生的，具有很高的保守性。miRNA是由一系列核酶參與加工形成。首先是miRNA的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)，是由RNA聚合酶Ⅱ在miRNA前體(pre-miRNA)發(fā)夾環(huán)上的結(jié)合開始的。之后原始前體轉(zhuǎn)錄物在微處理前體的作用下形成70～80個(gè)核苷酸并且包含莖環(huán)結(jié)構(gòu)的前體。隨后發(fā)生了一個(gè)限速反應(yīng)過程，即pre-miRNA通過核轉(zhuǎn)運(yùn)體Exportin-5運(yùn)送到細(xì)胞質(zhì)，最后在核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ)的作用下，去除莖環(huán)，保留長度在20～22個(gè)核苷酸左右的雙鏈miRNA復(fù)合體，最后RNaseⅢ-封閉肽復(fù)合物將雙鏈miRNA復(fù)合體裂解為2條單鏈。由于穩(wěn)定性不同使得穩(wěn)定性較低的miRNA單鏈與RNA誘導(dǎo)基因沉默復(fù)合物(RISC)結(jié)合，形成成熟的miRNA，而另一條miRNA單鏈則被核酸酶降解消除，如圖1所示。

2miRNA靶基因預(yù)測(cè)與鑒定

miRNA靶基因可以通過計(jì)算方法進(jìn)行預(yù)測(cè)。這些方法主要是通過序列互補(bǔ)的原理來預(yù)測(cè)的，如miRanda和TargetScan法；而PicTar、DIANAmicroT、RNAhybrid、microInspector、RNA22和SVMicrO等方法則是通過不同的計(jì)算原理來實(shí)現(xiàn)的[2]。很難評(píng)價(jià)這些預(yù)測(cè)方法的準(zhǔn)確性,但多種預(yù)測(cè)方法共同預(yù)測(cè)，找出同樣結(jié)果的靶基因，這種方法的準(zhǔn)確率要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于單一軟件的預(yù)測(cè)。miRNA的靶基因預(yù)測(cè)結(jié)果需要進(jìn)一步的試驗(yàn)驗(yàn)證，常見的驗(yàn)證試驗(yàn)包括miRNA的過表達(dá)或沉默以及后續(xù)采用實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)和熒光素酶報(bào)告試驗(yàn)對(duì)預(yù)測(cè)靶基因的鑒定。miRNA沉默通常是通過反義寡核苷酸(ASO)來實(shí)現(xiàn)的，這些反義序列與miRNA互補(bǔ)結(jié)合，致使堿基無法與miRNA的靶基因結(jié)合。ASO的化學(xué)修飾有2種方式：2′-O-甲基反義寡核苷酸(AMO)和鎖核酸(LNA)。與AMO相比，LNA具有較高的抑制效率。另一種ASO是miRNA消除，RNA序列從表達(dá)載體轉(zhuǎn)錄起始，含有多種與miRNA結(jié)合的串聯(lián)結(jié)合位點(diǎn)。miRNA消除競爭性地與miRNA結(jié)合，因此阻止了與其余靶基因的結(jié)合[3]。大量miRNA靶基因的預(yù)測(cè)工作可以通過蛋白質(zhì)組學(xué)的方法完成。如選擇反應(yīng)檢測(cè)(SRM)和同位素編碼標(biāo)記定量法可從秀麗隱桿線蟲野生型和miR-let7突變型提取出上百個(gè)miR-let7靶蛋白，161個(gè)蛋白可以定量，其中29個(gè)在野生型和突變型之間發(fā)生了顯著變化。SRM結(jié)果與一些研究者們的下游試驗(yàn)分析結(jié)果一致，如遺傳互作、多聚核糖體分析以及熒光素酶檢測(cè)。以此說明以SRM為基礎(chǔ)的miRNA靶基因鑒定是高效的[4]。

nucleus：細(xì)胞核；cytoplasm：細(xì)胞質(zhì)；miRNA gene or intron：miRNA基因或內(nèi)含子；RNA polⅡ/Ⅲ:RNA聚合酶Ⅱ/Ⅲ；exportin-5：輸出蛋白5；microRNA duplex：microRNA復(fù)合體；RISC formation：RNA誘導(dǎo)基因沉默復(fù)合物形成；transcription：轉(zhuǎn)錄；cleavage：分裂；DGCR8：DiGeorge綜合征相關(guān)蛋白8 DiGeorge syndrome critical region 8；TRBP：艾滋病病毒1型反應(yīng)式激活RNA結(jié)合蛋白 HIV-1 transactivating response RNA binding protein；mature miRNA：成熟miRNA；degradation：降解；mRNA target cleavage：mRNA靶分裂；translation repression：翻譯阻抑；mRNA deadenylation：mRNA脫腺苷化。

圖1miRNA的生物合成

Fig.1Biosynthesis of miRNA[1]

3miRNA在反芻動(dòng)物中的研究進(jìn)展

3.1牛

在反芻動(dòng)物中對(duì)牛的miRNA研究較多，已有766種前體miRNA加工成的755個(gè)成熟的miRNA通過多種標(biāo)記技術(shù)被鑒定出來[5]。有研究者已從牛胚胎、胸腺、小腸、淋巴結(jié)等器官鑒定了129種牛的miRNA。從牛脂肪組織和乳腺組織中發(fā)現(xiàn)了59種miRNA，從11種不同品種牛體組織中發(fā)現(xiàn)了101種牛的miRNA。也有科研人員采用計(jì)算機(jī)軟件預(yù)測(cè)方法從牛的基因組中預(yù)測(cè)出496種miRNA靶基因。近些年，采用深度測(cè)序技術(shù)檢測(cè)牛視網(wǎng)膜微血管表皮細(xì)胞中的miRNA，鑒定出255種已知的牛miRNA。更有多種新的miRNA成員相繼被發(fā)現(xiàn)，如miR-2284和-2285家族新成員，此家族成員在血管發(fā)生中起到重要作用[6]。

牛miRNA的功能研究主要集中在脂肪、骨骼

肌、卵母細(xì)胞以及早期胚胎發(fā)育方面,如表1所示。Jin等[14]比較研究了背部脂肪不同厚度的3種雜交品種脂肪組織中89種牛miRNA的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)了42種miRNA的差異表達(dá)，miR-378表達(dá)量差異最為顯著。miR-378在大鼠脂肪形成中起到重要的作用[15]。因此，miR-378可能參與了牛皮下脂肪的生長。在牛肌肉前體脂肪細(xì)胞分化為成熟的脂肪細(xì)胞過程中miR-143表達(dá)上調(diào)。miR-143互補(bǔ)序列的轉(zhuǎn)染抑制了牛肌內(nèi)脂肪前體細(xì)胞的分化[16]。這些研究說明miR-143在牛肌肉脂肪發(fā)育過程中具有明顯的作用。Romao等[17]發(fā)現(xiàn)8種miRNA在脂肪組織中的表達(dá)，包括miR-19a、-92a、-92b、-101、-103、-106、-142-5p和-296，這些miRNA與高脂飲食具有相關(guān)性。因此，這些miRNA可能參與牛高脂飲食誘導(dǎo)的脂肪生成的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

表1　反芻動(dòng)物中miRNA所行使的不同功能Table 1　Different functions of miRNAs in ruminants

miR-1和miR-206作為2種肌肉特異性表達(dá)的miRNA在肌肉細(xì)胞分化中起重要的作用[18]。研究者發(fā)現(xiàn)在皮埃蒙特牛和黑白花奶牛骨骼肌細(xì)胞中miR-1和miR-206表達(dá)并因?yàn)榧∪庖种扑鼗虻狞c(diǎn)突變產(chǎn)生了骨骼肌雙肌性狀。miR-1的表達(dá)量在2個(gè)品種或性別中無顯著差別，而miR-206在皮埃蒙特母牛中的表達(dá)量顯著高于黑白花奶牛[19]，說明miR-206表達(dá)上調(diào)可能對(duì)皮埃蒙特母牛肌肉肥大有影響。急性應(yīng)激(瘤胃瘺管安裝)后的安格斯牛中，miR-181b在肌肉中表達(dá)上調(diào)，意味著其在肌細(xì)胞生成中可能具有重要的作用[20]。郭云濤等[21]采用RNA-Seq法研究推斷bta-miR-320a易受到SP1等多種轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控,其可能通過靶基因TP53、絲裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase 1，MAPK1)等的抑制作用調(diào)控牛脂肪細(xì)胞分化，從而對(duì)牛的脂肪沉積產(chǎn)生影響。孫加節(jié)[22]發(fā)現(xiàn)miR-10020能通過抑制Pax7基因表達(dá)，延遲早期肌細(xì)胞分化過程或抑制肌衛(wèi)星細(xì)胞分化。

卵母細(xì)胞中富集有6種miRNA，包括miR-205、-150、-122、-96、-146a和-146b-5p，研究發(fā)現(xiàn)在卵母細(xì)胞成熟的0～22 h內(nèi)表達(dá)量顯著下降[23]?？赡苷f明這些miRNA在牛卵母細(xì)胞成熟過程中起到相應(yīng)的作用。miR-106a在牛卵母細(xì)胞中的表達(dá)量高于卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體(COCs)中的表達(dá)量，而miR-106a靶基因WEE1同源基因WEE1A的表達(dá)量卻低于COCs中的表達(dá)量[24]。這些表達(dá)量的差異說明miR-106a通過下調(diào)WEE1A基因在牛卵母細(xì)胞發(fā)育過程中起到關(guān)鍵的作用。同樣miR-196a和miR-181a通過靶向調(diào)節(jié)NOBOX和NPM2基因調(diào)節(jié)牛卵母細(xì)胞發(fā)育，而這2種基因在卵泡生成和核與核仁組織生成中具有重要的作用[9-10]。牛胚胎從1細(xì)胞到8細(xì)胞階段miR-21和miR-130a的表達(dá)量增加，這2種miRNA可以對(duì)牛早期胚胎發(fā)育產(chǎn)生影響[25]。靳麗軍[26]發(fā)現(xiàn)miRNA及信號(hào)通路的變化與轉(zhuǎn)基因克隆牛胎盤的異常發(fā)育有關(guān)。

3.2羊

miR-431、-433、-127、-434、-432和-136是首次在雙肌臀羊中鑒定出來的幾種miRNA，揭示其在肌肉肥大表型羊中的作用。采用深度測(cè)序的方法在雙肌臀羊骨骼肌細(xì)胞中有747個(gè)miRNA、472個(gè)miRNA前體被鑒定出來[27]。Sheng等[28]采用小RNA克隆的方法鑒定出31種羊的miRNA。特賽爾羊MSTN基因3′端非翻譯區(qū)(3′-UTR)存在1個(gè)G到A的突變，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)這個(gè)突變成為了miR-1和miR-206的靶位點(diǎn)，因此抑制MSTN蛋白的表達(dá)引起特賽爾羊肌肉肥大。王霄鵬等[29]采用莖環(huán)-qRT-PCR法檢測(cè)了羊背最長肌3種miRNA的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)6月齡雄性湖羊背最長肌中oar-miR-299-5p表達(dá)量極顯著高于6月齡雄性杜泊羊×湖羊雜交羊,說明oar-miR-299-5p可能與湖羊早期背最長肌的生長發(fā)育相關(guān)。宋廣超等[30]檢測(cè)了綿羊miR-133前體序列的單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點(diǎn)，說明其可能對(duì)miR-133前體的加工成熟具有重要影響，并影響綿羊的產(chǎn)肉性能。

采用miRNA芯片的方法在羊體側(cè)皮膚和耳皮膚中可以檢測(cè)出159種miRNA的表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)在體側(cè)皮膚中有19種miRNA特異性表達(dá)或者顯著富集。這個(gè)結(jié)論進(jìn)一步證實(shí)了這些miRNA在羊毛生長過程中的作用。孫武[31]對(duì)不同膚色山羊胎兒皮膚進(jìn)行鑒定發(fā)現(xiàn)miR-381、 -543、-129和-544可能參與了黑色素生成過程。miR-let7a在絨山羊毛囊發(fā)育生長期與退行期中均有表達(dá)，是調(diào)控絨山羊毛囊發(fā)育的重要因子，以靶基因Cmyc和FGF5在毛囊發(fā)育中行駛功能[32]。袁超[33]發(fā)現(xiàn)miR-125b通過抑制FGF5基因的表達(dá)對(duì)毛囊周期性變化相關(guān)基因具有一定調(diào)控作用，同時(shí)miR-125b過表達(dá)影響毛囊周期性變化相關(guān)基因mRNA的表達(dá)水平。楊?yuàn)檴櫟萚34]發(fā)現(xiàn)lpa-miR-nov-66通過與靶基因sGC結(jié)合,通過參與環(huán)單磷酸腺苷(cAMP)路徑,也可以調(diào)控黑色素細(xì)胞內(nèi)黑色素的合成。同樣，姬凱元等[35]的研究報(bào)道進(jìn)一步印證了上述結(jié)論。

最近，McBride等[36]通過小RNA庫測(cè)序的方法在羊不同生殖階段的卵巢卵泡和黃體中鑒定出212種羊miRNA。Torley等[11]通過qRT-PCR方法比較了羊妊娠期42和75 d卵巢和睪丸中128種miRNA的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在妊娠42 d時(shí)24種miRNA在卵巢和睪丸中差異表達(dá)，而妊娠75 d時(shí)43種miRNA差異表達(dá)。采用原位雜交的方法則發(fā)現(xiàn)miR-22定位于睪丸支持細(xì)胞，說明miR-22在胎兒睪丸發(fā)育過程中通過抑制雌激素信號(hào)通路而產(chǎn)生作用。胎兒期睪酮處理引起卵巢發(fā)生病理學(xué)變化。睪酮處理的妊娠母羊的胎兒卵巢中，miR-497和miR-15b表達(dá)上調(diào)，說明這2種miRNA在睪酮誘導(dǎo)的卵巢病理學(xué)變化中可能產(chǎn)生作用[37]。

4小結(jié)

miRNA在機(jī)體生物學(xué)過程中具有重要的調(diào)節(jié)作用。目前已有數(shù)百種miRNA在各種動(dòng)物中被陸續(xù)發(fā)現(xiàn)。這些miRNA都是以一種時(shí)空特異性的形式表達(dá)存在，說明miRNA在特異組織類型或特異發(fā)育階段具有重要的作用。雖然反芻動(dòng)物miRNA的功能研究存在許多限制因素，但是miRNA靶位點(diǎn)的尋找仍然是其研究的一個(gè)突破口，mRNA-miRNA之間的相互作用將是研究機(jī)體生理學(xué)過程的必經(jīng)之路。近期全基因組關(guān)聯(lián)研究指出復(fù)雜性狀通常與非編碼的SNP相關(guān)。miRNA在基因表達(dá)中的作用也可能是因?yàn)榕c這些非編碼SNP之間的關(guān)聯(lián)效應(yīng)產(chǎn)生的，也就是說相關(guān)SNP是部分miRNA的結(jié)合位點(diǎn)或者miRNA序列。因此miRNA的進(jìn)一步研究可以從鑒定SNP與miRNA結(jié)合位點(diǎn)或miRNA序列的重疊與反芻動(dòng)物的生長或繁殖性狀的關(guān)系入手研究。這樣的研究將會(huì)為反芻動(dòng)物的優(yōu)良繁殖性能或生長性狀的選擇提供遺傳學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]WINTER J,JUNG S,KELLER S,et al.Many roads to maturity:microRNA biogenesis pathways and their regulation[J].Nature Cell Biology,2009,11(3):228-234.

[2]LIU H,YUE D,CHEN Y D,et al.Improving performance of mammalian microRNA target prediction[J].BMC Bioinformatics,2010,11(1):476.

[3]EBERT M S,SHARP P A.MicroRNA sponges:progress and possibilities[J].RNA,2010,16(11):2043-2050.

[4]JOVANOVIC M,REITER L,PICOTTI P,et al.A quantitative targeted proteomics approach to validate predicted microRNA targets inC.Elegans[J].Nature Methods,2010,7(10):837-842.

[5]KOZOMARA A, GRIFFITHS-JONES S.miRBase:integrating microRNA annotation and deep-sequencing data[J].Nucleic Acids Research,2011,39(Suppl. 1):D152-D157.

[6]GUDURIC-FUCHS J,O’CONNOR A,CULLEN A,et al.Deep sequencing reveals predominant expression of miR-21 amongst the small non-coding RNAs in retinal micro vascular endothelial cells[J].Journal of Cellular Biochemistry,2012,113(6):2098-2111.

[7]LI G X,LI Y J,LI X J,et al.MicroRNA identity and abundance in developing swine adipose tissue as determined by Solexa sequencing[J].Journal of Cellular Biochemistry,2011,112(5):1318-1328.

[8]MA T H,JIANGI,GAO Y,et al.Microarray analysis of differentially expressed microRNAsin non-regressed and regressed bovine corpus luteum tissuemicroRNA-378 may suppress luteal cell apoptosisby targeting the interferon gamma receptor 1 gene[J].Journal of Applied Genetics,2011,52:481-486.

[9]TRIPURANI S K,LEE K B,WEE G,et al.MicroRNA-196a regulates bovine newborn ovary homeobox gene (NOBOX) expression during early embryogenesis[J].BMC Developmental Biology,2011,11(1):25.

[10]LINGENFELTER B M,TRIPURANI S K,TEJOMURTULA J,et al.Molecular cloning and expression of bovine nucleoplasmin 2 (NPM2):a maternal effect gene regulated by miR-181a[J].Reproductive Biology and Endocrinology,2011,9(1):40.

[11]TORLEY K J,DA SILVEIRA J C,SMITH P,et al.Expression of miRNAs in ovine fetal gonads:potential role in gonadal differentiation[J].Reproductive Biology and Endocrinology,2011,9(1):2.

[12]CLOP A,MARCQ F,TAKEDA H,et al.A mutation creating a potential illegitimate microRNA target site in the myostatin gene affects muscularity[J].Nature Genetics,2006,38:813-818.

[13]TAKEDA H,SHIMADA A.The art of medaka genetics and genomics;what makes them so unique[J].Annual Review of Genetics,2010,44:217-241.

[14]JIN W W,DODSON M V,MOORE S S,et al.Characterization of microRNA expression in bovine adipose tissues:a potential regulatory mechanism of subcutaneous adipose tissue development[J].BMC Molecular Biology,2010,11(1):29.

[15]GERIN I,BOMMER G T,MCCOIN C S,et al.Roles for miRNA-378/378* in adipocyte gene expression and lipogenesis[J].American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism,2010,299(2):E198-E206.

[16]LI H X,ZHANG Z,ZHOU X,et al.Effects of microRNA-143 in the differentiation and proliferation of bovine intramuscular preadipocytes[J].Molecular Biology Reports,2011,38(7):4273-4280.

[17]ROMAO J M,JIN W W,HE M L,et al.Altered microRNA expression in bovine subcutaneous and visceral adipose tissues from cattle under different diet[J].PLoS One,2012,7(7):e40605.

[18]TOWNLEY-TILSON W H D,CALLIS T E,WANG D Z.MicroRNAs 1,133,and 206:critical factors of skeletal and cardiac muscle development,function,and disease[J].The International Journal of Biochemistry & Cell Biology,2010,42(8):1252-1255.

[19]MIRETTI S,MARTIGNANI E,TAULLI R,et al.Differential expression of microRNA-206 in skeletal muscle of female Piedmontese and Friesian cattle[J].The Veterinary Journal,2011,190(3):412-413.

[20]ZHAO C P,TIAN F,YU Y,et al.miRNA-dysregulation associated with tenderness variation induced by acute stress in Angus cattle[J].Journal of Animal Science and Biotechnology,2012,3(1):12.

[21]郭云濤,張秀秀,苗向陽.牛miR-320a的靶基因預(yù)測(cè)及生物信息學(xué)分析[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2015,46(11):1952-1960.

[22]孫加節(jié).秦川牛肌肉與脂肪組織發(fā)育相關(guān)miRNA鑒定及miR-10020調(diào)控機(jī)制解析[D].博士學(xué)位論文.楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2015.

[23]ABD EL NABY W S,HAGOS T H,HOSSAIN M M,et al.Expression analysis of regulatory microRNAs in bovine cumulus oocyte complex and preimplantation embryos[J].Zygote,2013,21(1):31-51.

[24]MILES J R,MCDANELD T G,WIEDMANN R T,et al.MicroRNA expression profile in bovine cumulus-oocyte complexes:possible role of let-7 and miR-106a in the development of bovine oocytes[J].Animal Reproduction Science,2012,130(1/2):16-26.

[25]MONDOU E,DUFORT I,GOHIN M,et al.Analysis of microRNAs and their precursors in bovine early embryonic development[J].Molecular Human Reproduction,2012,18(9):425-434.

[26]靳麗軍.轉(zhuǎn)基因克隆牛胎盤中的差異miRNAs和bta-miR-708慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建[D].碩士學(xué)位論文.洛陽:河南科技大學(xué),2014.

[27]CAIMENT F,CHARLIER C,HADFIELD T,et al.Assessing the effect of the CLPG mutation on the microRNA catalog of skeletal muscle using high-throughput sequencing[J].Genome Research,2010,20(12):1651-1662.

[28]SHENG X H,SONG X M,YU Y,et al.Characterization of microRNAs from sheep (Ovis aries)using computational and experimental analyses[J].Molecular Biology Reports,2011,38(5):3161-3171.

[29]王霄鵬,宋雪梅,姜俊芳,等.莖-環(huán)RT-qPCR法定量檢測(cè)羊背最長肌3種miRNA的表達(dá)[J].畜牧與獸醫(yī),2015,47(12):31-35.

[30]宋廣超,張偉,許瑞霞,等.綿羊骨骼肌特異表達(dá)miR-133前體在不同綿羊群體中的多態(tài)檢測(cè)[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào),2015,36(1):18-23.

[31]孫武.山羊胎兒皮膚黑色素生成有關(guān)miRNA的篩選與鑒定[D].碩士學(xué)位論文.重慶:西南大學(xué),2015.

[32]江倩,李建平,曲海娥,等.miR-let7a及其靶基因IGF-1R在絨山羊毛囊發(fā)育周期中的表達(dá)[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào),2014,34(10):1622-1626.

[33]袁超.絨山羊次級(jí)毛囊周期性變化相關(guān)microRNA的鑒定及miR-125b在毛乳頭細(xì)胞中的功能研究[D].博士學(xué)位論文.楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2014.

[34]楊?yuàn)檴?白俊明,范瑞文,等.內(nèi)皮素3在不同毛色綿羊皮膚中的差異表達(dá)[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2015,46(11):2111-2116.

[35]姬凱元,石占全,劉彧,等.lpa-miR-nov-66通過調(diào)控cAMP路徑抑制α-MSH介導(dǎo)的羊駝黑色素生成[J].中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào),2015,31(11):1206-1212.

[36]MCBRIDE D,CARRé W,SONTAKKE S D,et al.Identification of miRNAs associated with the follicular-luteal transition in the ruminant ovary[J].Reproduction,2012,144(2):221-233.

[37]LUENSE L J,VEIGA-LOPEZ A,PADMANABHAN V,et al.Developmental programming:gestational testosterone treatment alters fetal ovarian gene expression[J].Endocrinology,2011,152(12):4974-4983.

(責(zé)任編輯王智航)

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.07.001

收稿日期：2016-01-29

基金項(xiàng)目：國家863資助項(xiàng)目(2013AA102506);國家絨毛用羊產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS40-16);國家科技支撐計(jì)劃子課題(2011BAD28B05-1-5);吉林省博士后科研人員科研項(xiàng)目資助(0010424)；吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士后科研項(xiàng)目資助(2060599)

作者簡介：翟博(1984—)，女，吉林長春人,博士研究生，從事毛羊育種與生產(chǎn)研究。E-mail: zhaibo310@163.com *通信作者：張明新，研究員，碩士生導(dǎo)師， E-mail: zmxin@163.com

中圖分類號(hào)：S852.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-267X(2016)07-1975-06

*Corresponding author, professor, E-mail: zmxin@163.com

Research Progress of MicroRNA in Ruminants

ZHAI BoZHANG LichunLI XuWANG ChunxinZHAO YunhuiZHANG Mingxin*

(Branch of Animal Husbandry， Jilin Academy of Agricultural Sciences， Gongzhuling 136100, China)

Abstract:MicroRNAs (miRNAs) are around 22 nucleotides non-coding RNA that target to the base-pairing 3′ untranslated region (UTR) of specific mRNAs and inhibit their translation or degradation. MiRNAs widely exist in animals and plants and may play important roles in the regulations of developmental and physiological processes. This review summarized the biogenesis, mechanism and prediction methods of miRNAs, and their gene expressions and functions, and focused on research progress in ruminants.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(7)：1975-1980]

Key words:microRNA; mRNA; expression; function; ruminant