李娜娜，趙玉鳳，夏 超，鐘 睿，張興旭

(草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，甘肅 蘭州 730020)

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甲基托布津?qū)ψ眈R草種帶內(nèi)生真菌的滅菌活性

李娜娜，趙玉鳳，夏 超，鐘 睿，張興旭

(草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，甘肅 蘭州 730020)

摘要：以中國西北天然草原的常見有毒植物——醉馬草(Achnatherum inebrians)為研究材料，進(jìn)行了內(nèi)吸式殺菌劑——70%甲基托布津(thiophanate methyl)對(duì)醉馬草種傳內(nèi)生真菌滅菌活性及種子萌發(fā)和幼苗生長影響的研究。結(jié)果表明，100倍甲基托布津可100%殺滅醉馬草種傳內(nèi)生真菌，但該處理會(huì)顯著降低(P<0.05)醉馬草幼苗的發(fā)芽指數(shù)，而對(duì)其它測(cè)量指標(biāo)不造成顯著影響(P>0.05)；其次為200倍藥劑浸泡處理6 h，內(nèi)生真菌殺滅率僅為61.2%，該處理種子發(fā)芽和幼苗生長與100倍藥劑處理相比差異顯著 (P<0.05)。因此，若不考慮對(duì)種子發(fā)芽指數(shù)造成的影響，甲基托布津稀釋100倍、浸種2 h為剔除醉馬草種傳內(nèi)生真菌的最佳方法。

關(guān)鍵詞：內(nèi)生真菌；醉馬草；內(nèi)吸式殺菌劑；發(fā)芽率；滅菌率

禾草內(nèi)生真菌(fungal endophyte or endophytic fungi)是指能夠在禾草中度過大部分或全部的生命周期，但不使宿主植物顯示任何外部癥狀的一大類真菌[1-2]。根據(jù)已有的報(bào)道，許多冷季型禾草均被Epichlo?屬內(nèi)生真菌所侵染，目前，對(duì)禾草內(nèi)生真菌共生體系的研究，多集中于高羊茅屬(Festuca)和黑麥草屬(Lolium)。前人的研究表明，內(nèi)生真菌的侵染可有效提高宿主植物的生物[3-8]和非生物[9-12]抗性，但同時(shí)也會(huì)誘導(dǎo)宿主植物產(chǎn)生對(duì)家畜有毒的生物堿，危害家畜健康，給畜牧業(yè)生產(chǎn)帶來損失[13-14]。

醉馬草(Achnatheruminebrians)為禾本科(Gramineae)芨芨草屬(Achnatherum)的多年生草本植物，是我國北方天然草原主要的烈性毒草之一,主要分布在甘肅、新疆、內(nèi)蒙古、青海、西藏、寧夏、四川、陜西等省(區(qū))，河北、山東和浙江也有少量分布[15]。該類禾草生長環(huán)境惡劣，在過牧的亞高山草原及高山草原有較大面積的分布[15]。在這類地區(qū)，采食醉馬草引起的家畜中毒事件時(shí)有發(fā)生。20世紀(jì)90年代，美國和新西蘭學(xué)者先后從采自我國的醉馬草種子中發(fā)現(xiàn)了內(nèi)生真菌，但均未對(duì)醉馬草內(nèi)生真菌進(jìn)行分類學(xué)鑒定，直到2004年，我國學(xué)者才將分離于甘肅醉馬草的內(nèi)生真菌定名為甘肅內(nèi)生真菌(Epichlo?gansuense)[16]。在隨后對(duì)醉馬草-內(nèi)生真菌展開的系統(tǒng)研究表明，內(nèi)生真菌的侵染是造成共生體植物產(chǎn)生有毒生物堿并最終引起家畜中毒的主要原因。同時(shí)，內(nèi)生真菌的侵染也會(huì)不同程度地提高醉馬草植株對(duì)干旱[17-18]、鹽堿[17，19]、重金屬[20-22]、低溫[23-24]、病害[25-28]和蟲害[29]等脅迫的抗性。以上研究均表明，無論是對(duì)于醉馬草內(nèi)生真菌本身，還是從醉馬草內(nèi)生真菌共生體的整體出發(fā)來看，醉馬草-內(nèi)生真菌都具備了較強(qiáng)的研究和利用價(jià)值。但不同于高羊茅(Festucaarundinacea)和黑麥草(Loliumperenne)，野生醉馬草植株具有極高的帶菌率。2000年，Nan和Li調(diào)查了我國西北草原20個(gè)野生醉馬草種群，發(fā)現(xiàn)其帶菌率近乎達(dá)到100%[30]。因此，如何有效獲取不帶菌(endophyte-free，E-)植株，就成為研究和利用醉馬草-內(nèi)生真菌過程中的一個(gè)關(guān)鍵問題。目前，仍采用高溫、高濕的方法[31]滅除醉馬草種子中的內(nèi)生真菌，此方法雖對(duì)內(nèi)生真菌有較好的殺滅效果，但不可避免地改變了種子的活力，使帶菌(endophyte-infected，E+)/不帶菌種子在開展研究之初即產(chǎn)生了不可忽略的差異，會(huì)對(duì)研究結(jié)果的準(zhǔn)確性帶來影響。甲基托布津(thiophanate methyl)是一種強(qiáng)力殺菌劑，具有內(nèi)吸性強(qiáng)、高效低毒、安全廣譜,可與多種殺蟲劑、殺螨劑混用等優(yōu)點(diǎn)，并具有保護(hù)和治療作用，可以防治多種病害，對(duì)環(huán)境影響較小，對(duì)人、畜、天敵和植物都很安全。因此，本研究選取甲基托布津(ghiophanate methyl)，設(shè)置不同稀釋倍數(shù)和浸泡時(shí)間來處理醉馬草種子，以期找到一個(gè)合適的稀釋倍數(shù)和處理時(shí)間，能夠有效殺滅醉馬草種帶內(nèi)生真菌，同時(shí)又不對(duì)其種子萌發(fā)和幼苗生長造成顯著影響。

1材料與方法

1.1材料

供試醉馬草種子于2013年采自甘肅省肅南縣(101°01′ E、38°35′ N，海拔3 297 m)，種子通過苯胺藍(lán)染色，鏡檢測(cè)定醉馬草種子的侵染率為100%。有效成分70%的甲基托布津(江蘇龍燈化學(xué)有限公司)由甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1甲基托布津濃度與時(shí)間處理本研究采用甲基托布津濃度和時(shí)間雙因素處理，將甲基托布津用蒸餾水分別稀釋100、200、400、600和800倍，并設(shè)置蒸餾水處理為對(duì)照組(CK),同時(shí)設(shè)置2、4、6、8和10 h共5個(gè)浸泡時(shí)間梯度，共計(jì)30個(gè)處理。取等量種子分別置于不同稀釋濃度的甲基托布津藥劑中浸泡，期間不斷用玻璃棒攪拌，防止藥劑產(chǎn)生沉淀。在浸泡2、4、6、8和10 h時(shí)分別將種子取出，用蒸餾水沖洗干凈，備用。

1.2.2殺菌劑對(duì)醉馬草種子發(fā)芽及幼苗生長影響2014年3月25日采用玻璃培養(yǎng)皿(直徑90 mm)進(jìn)行醉馬草種子發(fā)芽試驗(yàn)。每皿墊入兩層濾紙，將100粒經(jīng)過不同處理的醉馬草種子分別擺放于濕潤的濾紙上，隨機(jī)放入光照周期為16 h光照︰8 h黑暗，溫度為25 ℃的培養(yǎng)箱(GXZ-128/158，中國)中，逐日取出統(tǒng)計(jì)發(fā)芽種子數(shù)，加水使濾紙保持濕潤后，隨機(jī)放回培養(yǎng)箱中。整個(gè)發(fā)芽試驗(yàn)于4月8日結(jié)束。其中，每個(gè)處理設(shè)置5個(gè)重復(fù)，共計(jì)130皿。從每皿中隨機(jī)選取10株幼苗，分別測(cè)量其根苗長及干鮮重，幼苗干重由鮮重經(jīng)80 ℃烘干至恒重獲得。

1.2.3殺菌劑對(duì)醉馬草種傳內(nèi)生真菌的殺菌率2014年3月25日，以蛭石為培養(yǎng)基質(zhì)(經(jīng)120 ℃高溫滅菌5 h)，將經(jīng)過不同處理用于發(fā)芽試驗(yàn)的同一批醉馬草種子栽種于塑料杯(直徑75 mm，高度100 mm)中，每杯10株，每個(gè)處理4杯。置于光照周期為16 h光照∶8 h黑暗的培養(yǎng)箱中隨機(jī)擺放，并定期隨機(jī)調(diào)整位置。每日澆水使蛭石保持濕潤，待幼苗發(fā)芽長出第2片真葉后，開始定量澆灌1/2 Hoagland營養(yǎng)液(表1)。盆栽兩個(gè)月后，參照Li等[16-17]方法對(duì)醉馬草幼苗進(jìn)行帶菌率檢測(cè)。

1.2.4醉馬草植株幼苗發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)的計(jì)算每天記錄種子發(fā)芽數(shù)，并連續(xù)記錄14 d，胚芽突破種皮超過1 mm即為萌發(fā)，按照以下公式計(jì)算種子發(fā)芽率(G)和發(fā)芽指數(shù)(Gi)：

發(fā)芽率(G)=發(fā)芽數(shù)/種子總數(shù)×100%；

發(fā)芽指數(shù)(Gi)=∑(Gt/Dt)。

式中:Gt為第t日的發(fā)芽數(shù)，Dt為發(fā)芽天數(shù)[32]；

殺菌率(η)=N/No×100%。

式中:η為殺菌率(%)，No為幼苗總株數(shù)，N為檢測(cè)后不帶菌幼苗數(shù)。

1.2.5統(tǒng)計(jì)分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2013錄入并作圖。醉馬草E+和E-植株幼苗殺菌率、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、苗長、根長和干鮮重的結(jié)果均用平均數(shù)值加標(biāo)準(zhǔn)誤表示。采用SPSS 17.0(Ver. 17.0，SPSS Inc.，Chicago，IL，USA)統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)上述指標(biāo)進(jìn)行單因素和雙因素方差分析(ANOVA)，采用Duncan法進(jìn)行多重比較差異顯著性。

2結(jié)果與分析

2.1甲基托布津?qū)ψ眈R草種傳內(nèi)生真菌殺菌率的影響

從甲基托布津濃度看，稀釋100倍對(duì)醉馬草種傳內(nèi)生真菌具有顯著(P<0.05)的殺滅效果，殺菌率達(dá)到100%，其它稀釋濃度之間的殺菌效果無顯著差異(P>0.05)。從浸泡時(shí)間看，所有稀釋倍數(shù)對(duì)醉馬草種子進(jìn)行6 h的浸泡處理后達(dá)到最大的殺菌效果之后呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)(圖1)。

2.2甲基托布津?qū)ψ眈R草種子發(fā)芽率及發(fā)芽指數(shù)的影響

醉馬草種子發(fā)芽率受浸泡時(shí)間(P=0.002)和甲基托布津稀釋倍數(shù)的影響顯著(P=0.025)，同時(shí)，受浸泡時(shí)間和甲基托布津稀釋倍數(shù)互作的影響亦顯著(P=0.011)(表2)。從浸種時(shí)間的角度分析，浸種10 h時(shí)醉馬草種子萌發(fā)受到抑制，發(fā)芽率顯著低于浸種2和8 h，除此之外，其余不同浸種時(shí)間對(duì)醉馬草種子萌發(fā)未產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)(圖2)。從甲基托布津稀釋濃度角度分析，各浸種時(shí)間下，稀釋100倍甲基托布津處理種子的發(fā)芽率均為最低，其中，浸種4和

表1　Hoagland營養(yǎng)液配方Table 1　Nutritional components of Hoagland’s solution

圖1　甲基托布津?qū)ψ眈R草種傳內(nèi)生真菌殺菌率的影響Fig. 1　The sterilizing rate of different thiophanate methyl concentrations and processing times

注：100×、200×、400×、600×和800×分別表示稀釋倍數(shù)，不同大寫字母表示不同浸種時(shí)間之間差異顯著(P<0.05)，不同小寫字母表示同一浸種時(shí)間不同濃度之間差異顯著(P<0.05)。下同。

Note: 100×, 200×, 400×, 600× and 800× are diluted 100, 200, 400, 600 and 800 times, respectively. Different capital letters indicate significant difference among different seed soak times at 0.05 level. Different lower letters indicate significant difference among different dilution multiple at the same seed soak time at 0.05 level. The same below.

表2　甲基托布津?qū)ψ眈R草種子發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、根苗長和干鮮重的雙因素方差分析Table 2　Two-way analysis of variance treated by difference concentration and time on seed germination rate, germination index, the length of root/seedling and fresh/dry weight of Achnatherum inebrians

注：T=浸泡時(shí)間, D=稀釋倍數(shù)。

Note: T=soaking time, D=dilution multiple.

圖2　甲基托布津不同處理濃度和處理時(shí)間對(duì)醉馬草種子發(fā)芽率的影響Fig.2　Effect of different thiophanate-methyl concentrations and processing times on seed germination percentage of Achnatherum inebrians

10 h后，其發(fā)芽率顯著低于CK組(P<0.05)。另外，甲基托布津稀釋400倍濃度處理種子的發(fā)芽率在浸種4 h時(shí)，也顯著低于除稀釋100和800倍濃度外其余稀釋濃度處理醉馬草種子的發(fā)芽率(P<0.05)。

醉馬草種子的發(fā)芽指數(shù)受浸泡時(shí)間的影響顯著(P=0.012)，且受殺菌劑稀釋倍數(shù)的影響也顯著(P=0.000)，但是，浸泡時(shí)間和殺菌劑稀釋倍數(shù)的互作效應(yīng)不顯著(P=0.226)(表2)。浸種2-8 h，醉馬草種子的發(fā)芽指數(shù)變化不顯著(P>0.05)，但浸種10 h后，醉馬草種子發(fā)芽指數(shù)顯著低于(P<0.05)浸種2至6 h。浸種2、6和8 h時(shí)，稀釋100倍甲基托布津處理的種子發(fā)芽指數(shù)均顯著低于其它不同稀釋處理組(P<0.05)，但其它處理間醉馬草種子發(fā)芽指數(shù)差異不顯著(P>0.05)；浸種4 h時(shí)，稀釋200倍甲基托布津處理種子的發(fā)芽指數(shù)顯著高于稀釋100和400倍甲基托布津處理種子的發(fā)芽指數(shù)(P<0.05)，與其它處理間均無顯著差異(P>0.05)；浸種10 h時(shí)，稀釋100倍甲基托布津處理種子的發(fā)芽指數(shù)除顯著低于CK組外(P<0.05)，與其它各處理組間均無顯著差異(P>0.05)，且其它處理組與CK組間差異不顯著(P>0.05)(圖3)。

圖3　甲基托布津不同處理濃度和處理時(shí)間對(duì)醉馬草種子發(fā)芽指數(shù)的影響Fig.3　Effect of different thiophanate-methyl concentrations and processing times on seed germination index of Achnatherum inebrians

2.3甲基托布津?qū)ψ眈R草幼苗根、苗長的影響

醉馬草種子經(jīng)甲基托布津處理后，萌發(fā)幼苗苗長受種子浸泡時(shí)間的影響顯著(P=0.000)，且受甲基托布津稀釋倍數(shù)的影響也顯著(P=0.048)，同時(shí)，浸泡時(shí)間和殺菌劑稀釋倍數(shù)的互作效應(yīng)也顯著影響苗長(P=0.033)(表2)。從浸種時(shí)間的角度來看，與浸種2 h相比，浸種4至10 h后，醉馬草幼苗生長受到顯著抑制。浸種4至10 h處理的醉馬草種子發(fā)芽后，其幼苗苗長顯著低于(P<0.05)浸種2 h處理醉馬草種子發(fā)芽后幼苗苗長。從殺菌劑稀釋倍數(shù)角度來看，浸種2、4和10 h時(shí)，與CK相比，其它稀釋濃度的甲基托布津處理并未對(duì)幼苗苗長造成顯著影響(P>0.05)；但浸種6 h時(shí)，與CK相比，稀釋100倍濃度甲基托布津處理的種子萌發(fā)后，幼苗苗長顯著降低(P<0.05)；浸種8 h時(shí)，情況較為復(fù)雜，經(jīng)稀釋400倍濃度甲基托布津處理的種子萌發(fā)后的苗長最高，顯著高于(P<0.05)經(jīng)稀釋100、200倍濃度甲基托布津處理的種子萌發(fā)后幼苗苗長(圖4)。

醉馬草種子經(jīng)甲基托布津處理后，幼苗根長受種子浸泡時(shí)間的影響顯著(P=0.014)，受殺菌劑稀釋倍數(shù)的影響不顯著(P=0.666)，二者互作的效應(yīng)也不顯著(P=0.597)。由雙因素方差分析結(jié)果得出，經(jīng)甲基托布津處理的種子萌發(fā)后幼苗根長僅受到種子浸泡處理時(shí)間的顯著影響。因此，僅需從浸種時(shí)間對(duì)幼苗根長的變化進(jìn)行分析。隨著浸種時(shí)間的增加，幼苗的根長基本呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì)。其中，浸種10 h處理的種子萌發(fā)后幼苗的根長顯著短于除4 h外的(P<0.05)其它浸泡時(shí)間處理種子后幼苗的根長(圖5)。

2.4甲基托布津?qū)ψ眈R草幼苗干、鮮重的影響

醉馬草種子經(jīng)甲基托布津處理后，萌發(fā)幼苗的干、鮮重受種子浸泡時(shí)間的影響均不顯著(P=0.750，P=0.653)，受殺菌劑稀釋倍數(shù)的影響顯著(P=0.012，P=0.026)，二者的互作效應(yīng)亦不顯著(P=0.307，P=0.704)。

圖4　甲基托布津不同處理濃度和處理時(shí)間對(duì)醉馬草幼苗苗長的影響Fig. 4　Effect of different thiophanate-methyl concentrations and processing times on seedling length of Achnatherum inebrians

圖5　甲基托布津不同處理時(shí)間對(duì)醉馬草幼苗根長的影響Fig.5　Effect of different thiophanate-methyl processing times on root length of Achnatherum inebrians

注：不同小寫字母表示不同浸種時(shí)間之間差異顯著(P<0.05)。

Note: Different lower case letters indicate significant difference among different seed soaking times at 0.05 level.

圖6　甲基托布津不同處理濃度對(duì)醉馬草幼苗鮮重的影響Fig.6　Effect of different thiophanate-methyl concentrations on fresh weight of Achnatherum inebrians

注：不同小寫字母表示不同稀釋倍數(shù)之間差異顯著(P<0.05)。圖7同。

Note: Different lower case letters indicate significant difference among different dilution multiples at 0.05 level. The same in Fig.7.

圖7　甲基托布津不同處理濃度對(duì)醉馬草幼苗干重的影響Fig.7　Effect of different thiophanate-methyl concentrations on dry weight of Achnatherum inebrians

3討論與結(jié)論

本研究探討了內(nèi)吸式殺菌劑——甲基托布津?qū)ψ眈R草內(nèi)生真菌的殺菌作用。目前，國內(nèi)剔除種子內(nèi)生真菌的方法主要有殺菌劑法[32-33]和濕熱法[31]兩種。之前，李春杰[31]曾對(duì)醉馬草內(nèi)生真菌共生體在不同溫度和濕度處理下的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)特性進(jìn)行過探討，也創(chuàng)建了針對(duì)醉馬草種子的濕熱滅菌法。姚祥等[34]使用兩種殺菌劑對(duì)中華羊茅(Festucasinensis)種傳內(nèi)生真菌的研究發(fā)現(xiàn)，不同稀釋倍數(shù)的殺菌劑對(duì)中華羊茅種傳內(nèi)生真菌有不同的效果。但有關(guān)殺菌劑對(duì)醉馬草內(nèi)生真菌殺菌的研究還未見報(bào)道。國際上，Latch和Christensen[35]、Harvey等[36]和Gundel等[37]以內(nèi)吸式殺菌劑對(duì)多年生黑麥草(Loliumperenne)內(nèi)生真菌的殺菌進(jìn)行了研究，均取得了顯著的殺菌效果。

在嘗試使用殺菌劑剔除醉馬草種傳內(nèi)生真菌之前，醉馬草的無菌種子均通過高溫、高濕法獲得。但前人的研究成果表明，雖然高溫高濕條件對(duì)種傳內(nèi)生真菌有較好的殺滅效果，但都不可避免地改變了種子活力。60 ℃高溫處理羽茅(Achnatherumsibiricum)雖有較好的殺菌效果，但處理后的種子幼苗在生長初期根系生長受到了抑制[38]。高溫高濕條件對(duì)多花黑麥草(Loliummultiflorum)的種傳內(nèi)生真菌有很好的殺滅效果，但是植物種子活力也出現(xiàn)了不同程度的下降[37]。

甲基托布津是一種高效廣譜內(nèi)吸式低毒殺菌劑，對(duì)多種植物病毒有預(yù)防和治療作用，是目前我國生產(chǎn)量和使用量均較大的一種殺菌劑。按照化學(xué)結(jié)構(gòu)分類，甲基托布津?qū)儆谌〈筋惖臍⒕鷦?，但它在植物體內(nèi)轉(zhuǎn)化為多菌靈，所以也可歸為苯并咪唑類殺菌劑。甲基托布津的殺菌機(jī)理與多菌靈相同，主要是通過干擾真菌有絲分裂中紡錘體的形成影響細(xì)胞分裂，從而起到殺滅真菌的作用[38]。甲基托布津主要用于葉面噴霧，也可用于土壤處理，殘效期為5～7 d，對(duì)環(huán)境影響較小，對(duì)人、畜、天敵和植物都很安全。稀釋300～500倍的內(nèi)吸式殺菌劑甲基托布津和苯醚甲環(huán)唑浸種中華羊茅(Festucasinensis)8 h是剔除中華羊茅種傳內(nèi)生真菌的最佳方法[34]。本研究與其結(jié)果有一定區(qū)別，本研究中，醉馬草種傳內(nèi)生真菌的最佳殺滅方法為將甲基托布津稀釋100倍、浸種2 h(或稀釋200倍、浸種6 h)。這可能與不同物種間植物種子的特異性有關(guān)。用40%咪鮮胺乳油2.5 mL·kg-1處理多年生黑麥草種子，雖然種子中的內(nèi)生真菌被完全剔除，但種子的發(fā)芽率也由94%降到了74%[36]。但用40%咪鮮胺乳油以0.25 g·kg-1的劑量處理多年生黑麥草種子，其萌發(fā)后幼苗帶菌從90%降低到15%，同時(shí)種子發(fā)芽率還保持在90%以上[35]。這與本研究結(jié)果較為相似，本研究利用稀釋100倍的甲基托布津浸種2 h的處理方法，處理后可將內(nèi)生真菌從醉馬草種子中完全剔除，滅菌率達(dá)100%。雖然該處理顯著地降低了(P<0.05)醉馬草種子的發(fā)芽指數(shù)，但并未對(duì)種子的發(fā)芽率和后續(xù)幼苗的生長造成顯著影響。

與國內(nèi)外殺滅內(nèi)生真菌的研究結(jié)果相比，本研究所篩選的70%甲基托布津稀釋100倍后浸種2 h的殺菌方法效果良好且不會(huì)對(duì)種子的發(fā)芽率和種子萌發(fā)后幼苗的后續(xù)生長產(chǎn)生顯著影響。同時(shí)，甲基托布津作為一種高效低毒的廣譜內(nèi)吸式殺菌劑，廣泛應(yīng)用于多種作物，對(duì)植物具有保護(hù)和治療作用[39]，利用合理不會(huì)對(duì)環(huán)境造成負(fù)面影響，可放心使用[40-41]。

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(責(zé)任編輯武艷培)

DOI:10.11829/j.issn.1001-0629.2015-0680

*收稿日期：2015-12-04接受日期：2016-03-04

基金項(xiàng)目：國家基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃“973”(2014CB138702)；國家自然科學(xué)基金(31402132)；中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)(Lzujbky-2016-12、lzujbky-2016-177、Lzujbky-2016-192)；教育部創(chuàng)團(tuán)隊(duì)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(IRT13019)

通信作者：張興旭(1983-)，男，甘肅臨澤人，副教授，碩導(dǎo)，博士，研究方向?yàn)楹滩輧?nèi)生真菌及其次生代謝產(chǎn)物學(xué)。E-mail：xxzhang@lzu.edu.cn

中圖分類號(hào)：S432

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001-0629(2016)7-1306-09*

Corresponding author:Zhang Xing-xuE-mail:xxzhang@lzu.edu.cn

Effects of thiophanate methyl on seed borneEpichlo? fungal endophyte ofAchnatheruminebrians

Li Na-na, Zhao Yu-feng, Xia Chao, Zhong Rui, Zhang Xing-xu

(State Key Laboratory of Grassland Agro-ecosystems, College of Pastoral Agriculture Science and Technology, Lanzhou University, Lanzhou 730020, China)

Abstract:Achnatherum inebrians, a common toxic perennial bunchgrass in natural grassland of northwest China, was studied to explore the effect of systemic fungicide, thiophanate methyl(Tm), on fungal endophyte of A. inebrians at different concentrations and soak times. Tm had five concentrations and five distinct soak times respectively. The results of fungicide experiment indicated that the Tm diluted 100 times (100 Tm) was the most effective, but it significantly (P<0.05) decreased the germination index of seeds. Except the 100 Tm, the 200 times dilution Tm combined with 8 h treatment was considered to be the most effective which reduced the seeds infection rate of fungal endophyte from 100% to 38.8%, and did not significantly (P>0.05) affect the growth of seedlings. In conclusion, without regard to the seed germination index, the most effective way to kill the seed borne fungal endophyte was 100 times dilution Tm combined with 2 h treatment.

Key words:endophyte; Achnatherum inebrians; systemic fungicide; germination rate; disinfection rate

李娜娜，趙玉鳳，夏超，鐘睿，張興旭.甲基托布津?qū)ψ眈R草種帶內(nèi)生真菌的滅菌活性.草業(yè)科學(xué),2016,33(7)：1306-1314.

Li N N,Zhao Y F,Xia C,Zhong R,Zhang X X.Effects of thiophanate methyl on seed borneEpichlo? fungal endophyte ofAchnatheruminebrians.Pratacultural Science，2016,33(7)：1306-1314.

第一作者：李娜娜(1991-)，女，甘肅靜寧人，在讀碩士生，研究方向?yàn)楹滩?內(nèi)生真菌共生體。E-mail：linn15@lzu.edu.cn