劉國生,武軍駐

1.武漢大學基礎(chǔ)醫(yī)學院(湖北 武漢 430071)2.湖北民族學院附屬民大醫(yī)院(湖北 恩施 445000)

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尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C聯(lián)合檢測對糖尿病患者早期腎損害的診斷價值

劉國生1,2,武軍駐1*

1.武漢大學基礎(chǔ)醫(yī)學院(湖北 武漢 430071)2.湖北民族學院附屬民大醫(yī)院(湖北 恩施 445000)

目的對尿蛋白定性檢測為陰性的糖尿病(DM)患者同時檢測尿β2-微球蛋白(β2-MG)、α1-微球蛋白(α1-MG)、免疫球蛋白G(IgG)和半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(Cys-C)，探討聯(lián)合檢測該4項指標在診斷DM早期腎臟損害方面的價值。方法健康對照組60例，DM組60例，均分別利用乳膠增強免疫比濁法同時檢測尿β2-MG、α1-MG和Cys-C，利用免疫比濁法檢測IgG。結(jié)果DM組尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C單獨檢測時的敏感性分別為46.7%、43.3%、63.3%、66.7%，4項聯(lián)合檢測的敏感性為91.7%。結(jié)論在DM患者腎臟損害的早期診斷中，尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C聯(lián)合檢測可以提高診斷的準確性。

糖尿病；腎臟損害；β2-微球蛋白；α1-微球蛋白；免疫球蛋白G；半胱氨酸蛋白酶抑制劑C

【Abstract】ObjectiveToexplorethediagnosticvalueofdetectionofurineβ2-MG,α1-MG,lgGandCys-CforearlykidneydamageofDiabetesMellitus.MethodsTheurineβ2-MG,α1-MGandCys-Cinthecontrolgroup(60patients)andtheDiabetesMellitusgroup(60patients)weredetectedbylatexenhancedimmuneturbidimetricmethod.ThelgGwasdetectedbyradiationturbidimetricmethod.ResultTheurineβ2-MG,α1-MG,lgGandCys-CinDiabetesMellitusgroupweresignificantlyhigherthanthoseofthecontrolgroup(P<0.01).Thesensitivedetectionofurineβ2-MG,α1-MG,lgGandCys-Cwas46.7%,43.3%,63.3%and66.7%,respectively.Thesensitivedetectionofurineβ2-MG,α1-MG,lgGandCys-Cwas91.7%.ConclusionsThecombineddetectionofurineβ2-MG,α1-MG,lgGandCys-CcanincreasethediagnosticaccuracyinearlykidneydamageforDiabetesMellitus.

【Keywords】DiabetesMellitus；kidneydamage；β2-MG;α1-MG;IgG;Cys-C

糖尿病(DM)是一組以慢性血糖水平增高為特征的代謝性疾病群，同時伴有蛋白質(zhì)、脂肪異常，發(fā)病與遺傳、藥物、自身免疫及環(huán)境因素有關(guān)[1]。近年來DM的發(fā)生率逐年增加，且呈青年化趨勢[2]。DM腎病是DM最為常見的并發(fā)癥之一，也是危及生命的主要原因之一[3-5]。DM病程長時可引起腎臟損害，而且隨著病情的發(fā)展，許多患者雖無腎病的臨床表現(xiàn)，但其腎臟形態(tài)與功能已有顯著的改變，且DM腎病早期具有可逆性，因此，及時發(fā)現(xiàn)DM早期腎損害，對DM腎病的預(yù)防和延緩疾病的進程具有重要的臨床意義[6]。為探討DM腎病的早期檢測手段，提高檢測的靈敏度和準確度，本研究對60例DM患者和60名健康體檢者，分別利用乳膠增強免疫比濁法同時檢測尿β2-微球蛋白(β2-MG)、α1-微球蛋白(α1-MG)和半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(Cys-C)，利用免疫比濁法檢測免疫球蛋白G(IgG)，探討聯(lián)合檢測以上4項指標在DM患者早期腎臟損害方面的診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選取湖北民族學院附屬民大醫(yī)院收治的DM患者60例，其中男29例,女31例,年齡40～59歲,病程5～15年，平均9.5年，眼底熒光造影正常,尿白蛋白排泄率(UAER)<20μg/min，尿蛋白定性檢測陰性，所有患者均符合2010年WHO制定的DM診斷標準:糖尿病癥狀+隨機血糖≥11.1mmol/L，或空腹血糖≥7.0mmol/L，或OGTT中餐后2h血糖≥11.1mmol/L，或HbA1c≥6.5%。并排除由應(yīng)激狀態(tài)、甲狀腺功能異常、急慢性肝炎及全身性疾病或應(yīng)用影響血糖藥物引起的高血糖癥。

1.2實驗儀器與試劑日本日立7600全自動生化分析儀，β2-微球蛋白(β2-MG)、免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒由北京利德曼生化股份有限公司提供，α1-微球蛋白(α1-MG)、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(Cys-C)檢測試劑盒由安徽伊普諾康生物工程有限公司提供。

1.3檢測方法兩組均留置晨尿，存放期限不超過12h，以3 500r/min離心5min，留取上清液對β2-MG、α1-MG和Cys-C采用乳膠增強免疫比濁法，IgG采用免疫比濁法進行檢測，按說明書操作。根據(jù)試劑盒提供的參考值，尿β2-MG的陽性臨界值為0.30μg/mL；尿α1-MG的陽性臨界值為10μg/mL；尿IgG的陽性臨界值為54μg/mL；尿Cys-C的陽性臨界值為0.2μg/mL。

2　結(jié)果

2.1兩組檢測結(jié)果比較實驗組尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C的檢測均值與健康對照組比較，呈顯著性增高(P<0.01)，見表1。

2.2單獨和聯(lián)合檢測敏感性比較尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C4項指標單獨檢測及聯(lián)合檢測結(jié)果對糖尿病患者早期腎損害診斷的敏感性，見表2。

表1　兩組尿β2-MG、α1-MG、IgG和

注：與對照組比較，★P<0.01。

表2　尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C 4項指標

注：聯(lián)合檢測時只要有1項陽性即為陽性。

3　討論

DM腎病是主要的糖尿病微血管病變之一，常見于病史超過10年的患者，是Ⅰ型DM患者的主要死亡原因，在Ⅱ型DM中，其嚴重性也僅次于冠狀動脈和腦血管動脈粥樣硬化病變。早期發(fā)現(xiàn)并預(yù)防腎臟并發(fā)癥的發(fā)生，可以降低病死率，提高患者的生活質(zhì)量[7]。

尿β2-MG是一種相對分子量較小的蛋白質(zhì)，主要由淋巴細胞分泌，腎近曲小管是β2-MG在體內(nèi)處理的唯一場所，由于分子量小，可自由通過腎小球濾過膜，在近曲小管幾乎被全部重吸收，一旦腎小管輕微受損，β2-MG重吸收和降解減弱，導致尿中含量升高，所以β2-MG水平可以發(fā)現(xiàn)Ⅱ型DM腎病患者的腎功能受損情況，尿β2-MG測定是診斷近曲小管早期損傷非常靈敏和特異性的指標[8]。尿α1-MG為小分子量蛋白質(zhì)，能自由通過腎小球濾過膜。但極大部分被近曲小管重吸收并分解代謝。在正常情況下，尿中α1-MG含量甚微，當腎小管受損時，尿α1-MG排泌量增加，故尿中α1-MG升高也是反映腎小管受損的重要指標[9]。IgG是B細胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的糖蛋白，是血清中免疫球蛋白主要成分，約占血清中免疫球蛋白總含量的75%，正常值為6.8～14.5mg/mL。其中40%～50%分布于血清中，其余分布在組織中。正常人尿液中IgG的含量極微，當腎小球濾過膜分子屏障破壞或電荷屏障受損，從而引起IgG漏出增多[10]。Cys-C是一種小分子量的胱氨酸蛋白酶抑制劑，所有的有核細胞都能穩(wěn)定地產(chǎn)生Cys-C。Cys-C幾乎完全被腎小球濾過，然后由腎小管重吸收，并且腎小管不分泌，也不通過腎小管排泄，正常人尿液中Cys-C含量很低[11-12]。Cys-C不受炎癥反應(yīng)、性別、肌肉以及年齡變化的影響[13]，所以Cys-C是一個非常穩(wěn)定的反映腎小球濾過率的指標。

DM腎損害的發(fā)生發(fā)展分為Ⅴ期，在第Ⅲ期就會出現(xiàn)微量白蛋白尿。過去認為微量白蛋白尿?qū)γ黠@腎病有診斷價值，但是尿蛋白定性檢測為陰性的DM患者腎功能不一定正常，本文在尿蛋白檢測呈陰性的情況下，上述4項指標就已經(jīng)顯著高于正常對照組，其中尿α1-MG陽性率最低，但也達到了43.3%，其他三項尿β2-MG、IgG和Cys-C的陽性率分別為46.7%、63.3%和66.7%，這說明DM患者長期處于代謝紊亂狀態(tài)，大量廢物經(jīng)腎臟排泄導致腎小球濾過膜通透性增加，腎小管近端重吸收長期負荷加重，功能降低，腎功能由代償變?yōu)槭Т鷥?，這些指標都是評價腎功能和腎臟疾病早期診斷的敏感指標，4項指標聯(lián)合檢測的敏感性更是達到了91.7%。

因此，臨床對于尿蛋白定性陰性的DM患者進行尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C的聯(lián)合檢測可反映近端腎小管受損程度，能早期發(fā)現(xiàn)和預(yù)防腎小球、腎小管的受損程度，且聯(lián)合檢測可彌補單項檢測陽性率低的不足，在協(xié)助臨床對腎臟損害早診斷、早治療、早預(yù)防方面有其積極的意義，如果將尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C聯(lián)合檢測應(yīng)用于臨床，可為臨床早期診斷DM腎病及早干預(yù)治療提供重要依據(jù)，且尿液標本的留取比血液標本的采集更為方便易得，可有效避免靜脈血液標本采集的穿刺之痛。而本實驗研究結(jié)果與大多數(shù)學者研究結(jié)果一致，從不同角度證明了尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C相對于目前臨床常規(guī)檢查指標的優(yōu)越性，并且值得應(yīng)用大樣本、大數(shù)據(jù)對其進行深入研究，進一步比較分析血與尿β2-MG、α1-MG、IgG和Cys-C的關(guān)系，為今后臨床診斷DM早期腎損害提供可靠、方便、快捷、靈敏的實驗指標。

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責任編輯：牟冬生

DiagnosticValueofDetectionofUrineβ2-MG,α1-MG,lgGandCys-CforEarlyKidneyDamageofDiabetesMellitus

LiuGuosheng1,2,WuJunzhu1*

(1.BasicMedicalSciencesSchoolofWuhanUniversity,Wuhan430071，China;2.MindaHospitalAffiliatedtoHubeiUniversityforNationalities,Enshi445000,China)

劉國生(1982- )，男,寧夏彭陽人,主管檢驗師，碩士在讀，研究方向：糖尿病腎病的臨床診斷及發(fā)病機制;*

武軍駐，男，教授，博士生導師，研究方向：動脈粥樣硬化的分子機制。

R587.2

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1008-8164(2016)02-0040-03

2016-03-12