朱琳　余蕾（新疆礦產(chǎn)實(shí)驗(yàn)研究所 烏魯木齊 830000）

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超聲提取-氣相色譜法測(cè)定蔬菜中六六六和滴滴涕

朱琳余蕾
（新疆礦產(chǎn)實(shí)驗(yàn)研究所 烏魯木齊 830000）

摘要建立了一種高效、準(zhǔn)確測(cè)定蔬菜中六六六、滴滴涕農(nóng)藥殘留試驗(yàn)方法。采用正己烷-丙酮（1∶1）為提取溶劑，以超聲波震蕩提取蔬菜中的有機(jī)氯農(nóng)藥，濃硫酸和硫酸鈉交替凈化，用帶有電子捕獲器的氣相色譜檢測(cè)。使用2，4，5，6-四氯間二甲苯為替代物監(jiān)控樣品質(zhì)量，滿(mǎn)足農(nóng)藥殘留分析要求。

關(guān)鍵詞蔬菜超聲提取六六六滴滴涕氣相色譜

DOI∶10.16206/j.cnki.65-1136/tg.2016.01.030

有機(jī)氯農(nóng)藥六六六和滴滴涕因其殺蟲(chóng)效果顯著曾被廣泛使用，這類(lèi)農(nóng)藥屬于環(huán)境激素類(lèi)污染物，雖然被禁用多年，但由于其性質(zhì)穩(wěn)定，半衰期長(zhǎng)，不易降解并具有生物富集性，禁藥幾十年后在土壤、水等環(huán)境介質(zhì)及人體中仍有殘存［1］。因此，對(duì)蔬菜中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的檢測(cè)一直深受關(guān)注。生物樣有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的測(cè)定中提取凈化等前處理過(guò)程對(duì)分析結(jié)果的代表性和可靠性有很大影響。傳統(tǒng)的樣品萃取方法一般為索式提取法［2］和震蕩提取法［3］，這些方法耗費(fèi)溶劑多、提取時(shí)間長(zhǎng)、操作復(fù)雜。而超聲波技術(shù)可以有效的提取環(huán)境中有機(jī)污染物，且提取時(shí)間短，設(shè)備花費(fèi)低、節(jié)省溶劑、快速、提取效率高。對(duì)于凈化過(guò)程一般有弗羅里硅土［4］或固相萃取技術(shù)［5］，但對(duì)于基質(zhì)復(fù)雜的蔬菜如土豆、西紅柿等，雜質(zhì)不易去除，干擾分析，同時(shí)對(duì)儀器進(jìn)樣口、色譜柱和檢測(cè)器造成污染。本方法采用濃硫酸凈化，操作簡(jiǎn)便，凈化完全，適用于基質(zhì)復(fù)雜的蔬菜中六六六、滴滴涕的測(cè)定。

本文使用正己烷-丙酮為溶劑，超聲提取蔬菜中的有機(jī)氯農(nóng)藥，濃硫酸和硫酸鈉交替凈化，取得了很好的提取和凈化效果。替代物2，4，5，6-四氯間二甲苯的加入可以監(jiān)控每一個(gè)樣品的質(zhì)量，使得檢測(cè)結(jié)果更加真實(shí)可靠。

1　實(shí)驗(yàn)部分

1.1主要儀器與試劑

GC-7890A氣相色譜儀（美國(guó)安捷倫），帶電子捕獲檢測(cè)器；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、振蕩器、離心機(jī)（具有調(diào)速功能）；HGC-12A可控氣流氮吹儀；色譜柱：HP-5（30×0.25 mm×0.25μm）高彈石英毛細(xì)管色譜柱；GM200刀式研磨儀；KQ-800KDE高功率數(shù)控超聲波清洗器；標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，六六六和滴滴涕有機(jī)農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（包括8種組分α-666，β-666、γ-666、 δ-666、p，p'-DDE、o，p'-DDT、p，p'-DDD、p，p'-DDT；替代物標(biāo)準(zhǔn)，2，4，5，6-四氯間二甲苯、以正己烷配制成1.0 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液；標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和替代物均應(yīng)在-18°C保存?zhèn)溆茫跇悠诽幚砬胺謩e將替代物標(biāo)準(zhǔn)加入到每一個(gè)空白、樣品中，用以監(jiān)測(cè)分析過(guò)程中是否存在污染、干擾和集體效應(yīng)等。標(biāo)準(zhǔn)系列中也應(yīng)添加與樣品相同數(shù)量的替代物標(biāo)準(zhǔn)；濃硫酸（H2SO4）密度為1.84；無(wú)水硫酸鈉（Na2SO4）在300℃烘箱中烘烤4 h，備用。

1.2實(shí)驗(yàn)步驟

⑴采集：取其代表性的新鮮果蔬可食部位1.0 kg，粉碎，供試驗(yàn)用（以土豆、白菜、西紅柿為例）。

⑵提?。簻?zhǔn)確稱(chēng)取200 g樣品置于刀式研磨儀，快速搗碎1～2 min，稱(chēng)取勻漿20 g，置于250 mL離心管中，加正己烷30 mL，丙酮30 mL，振搖1 min，置于高功率數(shù)控超聲波清洗器上超聲5 min，然后進(jìn)行離心3次，（每次用正己烷10 mL，丙酮10 mL洗滌離心管后，離心5 min），合并上層清液。將合并的上層清液移入250 mL分液漏斗，加入100 mL 2%硫酸鈉水溶液，充分搖勻，靜止分層，將下層溶液轉(zhuǎn)移到另一250 mL分液漏斗中，用20 mL正己烷萃取2次，合并3次萃取的正己烷層。

⑶凈化：在盛有正己烷提取液的分液漏斗中，按提取液體積的十分之一數(shù)量加入濃硫酸，振搖1 min，靜置分層后，棄去硫酸層（注意：用硫酸凈化過(guò)程中，要防止發(fā)熱爆炸，加硫酸后，開(kāi)始要慢慢振搖，不斷放氣，然后劇烈振搖），按上述步驟重復(fù)數(shù)次，直至加入的石油醚提取液二相界面清晰均呈無(wú)色透明時(shí)止，然后向石油醚提取液或正己烷提取液中加入其體積量一半左右的硫酸鈉液，振搖十余次，將其靜置分層后棄去水層，如此重復(fù)至提取液呈中性時(shí)止（一般2～4次）。石油醚提取液再經(jīng)過(guò)裝有2～3 g無(wú)水硫酸鈉的筒型漏斗脫水，然后進(jìn)行旋蒸濃縮氮吹定容到1 mL，供氣相色譜測(cè)定。

2　結(jié)果與討論

2.1色譜條件的選擇

載氣為N2（99.999%）；進(jìn)樣量為1 μL；進(jìn)樣口溫度為250°C；進(jìn)樣方式為不分流；載氣壓力為13 psi；吹掃流量3.0 mL/min。升溫程序：初始溫度100°C保持1 min，以30°C/min升溫至280°C保持4 min；ECD檢測(cè)器300°C，尾吹流量30 mL/min；檢測(cè)器溫度（ECD）為300°C。

從左到右物質(zhì)名稱(chēng)為：2，4，5，6-四氯間二甲苯、α-666、β-666、γ-666、δ-666、p，p'-DDE、o，p'-DDT、p，p'-DDD、p，p'-DDT；保留時(shí)間分別為：5.443 min、5.788 min、5.995 min、6.059 min、6.240 min、7.632 min、7.997 min、8.047 min、8.352 min。

2.2標(biāo)準(zhǔn)系列的繪制及檢出限

配制2.5 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20 ng/mL、30 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程和相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表1。以三倍噪音為檢出限，當(dāng)取樣量為10 g時(shí)，方法檢出限見(jiàn)表1。

表1　標(biāo)準(zhǔn)工作曲線和檢出限

2.3精密度和回收率

在土豆、白菜、西紅柿中加入六六六和滴滴涕20 ng和5 ng，替代物10 ng做精密度和回收率實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　加標(biāo)回收和替代物回收率　%

2.4超聲提取、震蕩提取和索式提取的比較

稱(chēng)取20 g土豆勻漿，在試樣中加入六六六和滴滴涕混合標(biāo)準(zhǔn)10 ng，用超聲萃取、震蕩提取和索式提取進(jìn)行處理后上機(jī)分析，結(jié)果見(jiàn)表3?？梢钥闯觯N萃取方法對(duì)六六六和滴滴涕均有較好的萃取效果，但超聲提取所需溶劑最少，消耗時(shí)間最短。

表3　三種提取方法對(duì)比

3　結(jié)論

蔬菜中8種有機(jī)氯農(nóng)藥以正己烷-丙酮為溶劑，經(jīng)超聲提取，取得了較好的效果。超聲提取法簡(jiǎn)單、快捷、價(jià)格低廉，適用范圍廣，其精密度和回收率滿(mǎn)足農(nóng)殘分析要求。在每個(gè)樣品中加入替代物，可監(jiān)測(cè)每個(gè)樣品的分析質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

［1］趙華，胡秀卿，吳珉，等.基質(zhì)固相分散-加速溶劑萃取-氣相色譜法測(cè)定土壤中六六六和滴滴涕農(nóng)藥殘留［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué).2008（3）∶339-441.

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［5］陳硯朦，李月歡，等.固相萃取氣象色譜法測(cè)定中藥中痕量六六六和滴滴涕［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志.2005，15（12）∶1413-1414.

收稿：2016-01-06