郭志宏，彭　毛，沈秀英，付　永，李　偉，宋永武，羅　璇（.青海省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，青海西寧　8006；. 剛察縣畜牧獸醫(yī)站，青海剛察　800；. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，北京　0008）

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通揚(yáng)球精等3種藥物對牦牛球蟲病的治療效果

郭志宏1，彭毛1，沈秀英1，付永1，李偉1，宋永武2，羅璇3
（1.青海省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，青海西寧810016；2. 剛察縣畜牧獸醫(yī)站，青海剛察812300；3. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，北京100083）

摘要：為篩選治療牦牛球蟲病的有效藥物，使用通揚(yáng)球精（地克珠利溶液）、通揚(yáng)血球凈（磺胺氯吡嗪鈉可溶性粉）等抗球蟲藥物和治療牛羊腹瀉的中藥制劑（楊樹花口服液），對青海省剛察縣沙流河鎮(zhèn)4戶牧民家飼養(yǎng)的96頭牦牛（73頭當(dāng)年牛犢和23頭1歲牦牛）分3組進(jìn)行抗球蟲病藥物篩選試驗(yàn)。投藥前，3組糞便中的球蟲卵囊陽性率分別為87.50%，84.38%和93.75%；連續(xù)投藥3天，1周后各組對應(yīng)的糞便球蟲卵囊轉(zhuǎn)陰率分別為92.86%、0和10%。該結(jié)果說明通揚(yáng)球精對牦牛球蟲病有良好的治療效果，而通揚(yáng)血球凈和楊樹花口服液對牦牛球蟲病沒有治療效果。

關(guān)鍵詞：牦牛；球蟲；抗球蟲藥物；篩選；卵囊轉(zhuǎn)陰率

牦牛是青藏高原牧區(qū)的特色畜種和優(yōu)勢畜種。球蟲性腹瀉是長期以來影響牦牛犢生長發(fā)育和繁活率的一類疾病。牛球蟲病呈世界性分布。據(jù)報(bào)道，在我國已鑒定出的16種艾美耳屬（Eimeria）球蟲［1］中，有14種可感染牦牛［2］。犢牛對球蟲的易感性高，主要的病變特征為出血性腸炎，且病情嚴(yán)重；成年牛常呈隱性感染，為帶蟲者。牛感染球蟲后，其腸道上皮細(xì)胞被破壞，正常的營養(yǎng)吸收受阻，致使其生長緩慢、便血，甚至死亡，給養(yǎng)牛業(yè)造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。

雖然目前已有一些關(guān)于牦牛球蟲感染的調(diào)查報(bào)道［1-3］，但缺乏有效的防治方法，特別是關(guān)于有效治療藥物的報(bào)道。為此，2015年8—10月，在青海省海北州開展了通揚(yáng)球精、通揚(yáng)血球凈和楊樹花口服液三種藥物對牦牛球蟲的驅(qū)除效果試驗(yàn)。

1　材料和方法

1.1試驗(yàn)藥物

1.1.1通揚(yáng)球精（地克珠利溶液）。規(guī)格：50 mL，0.25 g，江蘇南農(nóng)高科動(dòng)物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為T15070206。

1.1.2通揚(yáng)血球凈（磺胺氯吡嗪鈉可溶性粉）。規(guī)格：100 g，江蘇南農(nóng)高科動(dòng)物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為T15062905。

1.1.3楊樹花口服液（主要成分楊樹花）。每1 mL相當(dāng)于原生藥1 g，20 mL×15支/盒包裝，四川豪士動(dòng)物保健藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為20150701。

1.2試驗(yàn)動(dòng)物及內(nèi)容

1.2.1藥效試驗(yàn)。將剛察縣沙流河鎮(zhèn)潘保村4家牧戶飼養(yǎng)的96頭牦牛（73頭當(dāng)年牛犢和23頭1歲牦牛）分成通揚(yáng)球精、通揚(yáng)血球凈和楊樹花口服液3組，每組32頭。

1.2.1.1通揚(yáng)球精組。有27頭當(dāng)年牦牛、5頭1歲牦牛組成。按1 mg/kg進(jìn)行灌服，連續(xù)使用3天。

1.2.1.2通揚(yáng)血球凈組。有23頭當(dāng)年牦牛、9頭1歲牦牛組成。首先配成10%水溶液，按1 mL/kg進(jìn)行灌服，連續(xù)使用3天。

1.2.1.3楊樹花口服液組。有23頭當(dāng)年牦牛、9頭1歲牦牛組成。按1 mL/kg進(jìn)行灌服（幼年牛50～100 mL），連續(xù)使用3天。

1.3藥物效果檢查

分別從以上試驗(yàn)組牦牛直腸內(nèi)采集藥物使用前當(dāng)天和停藥后1周的糞便2～5 g帶回實(shí)驗(yàn)室做效果檢查。取2 g糞便，加2.5%重鉻酸鉀溶液14 mL，用200目銅篩過濾，濾液加到2個(gè)15 mL離心管中。在室溫放置1周，至卵囊孢子化后，1000 r/min離心5 min，棄去上清，每管加5～6 mL比重為1.2 g/cm3的蔗糖液，震蕩混勻，添加蔗糖液至14 mL，2500 r/ min離心10 min，加蔗糖液至滿，蓋上蓋玻片。靜止10 min后放到載玻片上，用顯微鏡觀察線蟲及絳蟲蟲卵。根據(jù)球蟲卵囊大小、形狀、顏色，有無內(nèi)外殘?bào)w、極帽和卵膜孔等，參照文獻(xiàn)［4］進(jìn)行蟲種鑒定。觀察統(tǒng)計(jì)卵囊數(shù)，每個(gè)樣檢查3片蓋玻片，3片的卵囊數(shù)累計(jì)，2管的平均數(shù)即為糞便卵囊的OPG。個(gè)別卵囊數(shù)量大，無法計(jì)數(shù)的，先數(shù)200個(gè)卵囊進(jìn)行蟲種鑒定，總數(shù)采用改良麥?zhǔn)戏ㄓ?jì)數(shù)。

1.4數(shù)據(jù)處理

對抗球蟲藥物使用前后的卵囊轉(zhuǎn)陰率采用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行One-Way ANOVA分析，p＜ 0.01為差異有顯著性意義。

2　結(jié)果

2.1投藥前后各組糞便蟲卵檢查結(jié)果

由于試驗(yàn)群沒有使用過任何驅(qū)蟲藥物，所以投藥前的糞便中檢出了蛔蟲卵、線蟲卵和絳蟲卵，其感染率分別為5.2%，39.58%，4.17%，絳蟲卵為擴(kuò)展莫尼茨絳蟲卵。投藥后，除蛔蟲卵未檢出外，線蟲卵陽性率為29.17%，絳蟲卵沒有變化，為4.17%，說明以上藥物對一般線蟲和絳蟲沒有作用。具體數(shù)據(jù)見表 1。投藥后的糞便中沒有出現(xiàn)蛔蟲成蟲，說明使用的藥物對蛔蟲沒有驅(qū)除效果，只是一時(shí)性地抑制排卵。

表1　藥物使用前后糞便蠕蟲卵變化

2.2投藥前后各組糞便卵囊檢查結(jié)果

經(jīng)糞便球蟲卵囊檢查，本次試驗(yàn)的當(dāng)年牦牛和1歲牦牛球蟲感染率分別為87.67%（64/73）和91.30%（21/23），2種以上球蟲混合感染的比例達(dá)陽性數(shù)的76%（表2）。

表2　各試驗(yàn)組藥物使用前當(dāng)天牦牛球蟲卵囊陽性糞便感染種數(shù)

卵囊數(shù)量（OPG）從1～15.6萬不等。除有8份樣品因卵囊數(shù)量大而采用改良麥?zhǔn)嫌?jì)數(shù)外，多數(shù)樣品OPG集中在200以內(nèi)。3種藥物使用后，球蟲卵囊轉(zhuǎn)陰率分別為92.86%，0和10%（表3）。藥物使用前后各種球蟲卵囊數(shù)的變化見表4。

表3　牦牛抗球蟲藥物篩選結(jié)果

表4　藥物使用前后牦牛糞便球蟲卵囊數(shù)變化

3　討論與結(jié)論

據(jù)Dong［2］等報(bào)道，青海省牦牛球蟲平均感染率為34.9%，主要感染當(dāng)年牛犢（53.3%）和1歲左右的幼牦牛（36.1%）。本次藥物效果試驗(yàn)也選擇了感染率高的當(dāng)年牦牛和1歲幼牦牛，其感染率均高于以往的報(bào)道，這和局部地區(qū)的放牧方法和飼養(yǎng)密度等有關(guān)。另外，試驗(yàn)組的牦牛都不同程度地感染牛犢新蛔蟲、腸道線蟲和擴(kuò)展莫尼茨絳蟲。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，本實(shí)驗(yàn)組指導(dǎo)當(dāng)?shù)啬撩襁M(jìn)行了治療性驅(qū)蟲。

據(jù)商云霞等［5］對地克珠利、馬杜霉素、克球粉、氯苯胍、中藥復(fù)方等抗球蟲藥物對雞球蟲的評價(jià)試驗(yàn)，地克珠利的抗球蟲指數(shù)最高。本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)通揚(yáng)球精（地克珠利口服溶液）的驅(qū)蟲效果最好，使用后卵囊轉(zhuǎn)陰率達(dá)92.86%（p＜0.01），并且藥物使用量少，灌服方便，為牦牛球蟲性腹瀉治療的首選藥物。

楊樹花口服液主要是針對幼畜大腸桿菌、沙門氏菌等細(xì)菌性腹瀉的治療用藥。本試驗(yàn)的結(jié)果表明，其對球蟲性腹瀉的治療沒有效果。據(jù)李家奎［6］等報(bào)道，磺胺二甲基嘧啶、磺胺噻唑、磺胺脒等磺胺類藥物對牦牛球蟲有預(yù)防和治療效果。但本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其對牦牛球蟲沒有驅(qū)蟲作用，其原因有待于進(jìn)一步探討。

地克珠利組和楊樹花口服液組各有1頭1.5歲牦牛在投藥前糞便為血便，糞便球蟲卵囊檢查分別發(fā)現(xiàn)2個(gè)和15個(gè)卵囊。藥物灌服1周后，地克珠利組的那頭1.5歲牦牛卵囊轉(zhuǎn)陰，而楊樹花口服液組的那頭牦牛糞便卵囊OPG達(dá)13.56萬。這可能是因?yàn)榛记蛳x病的牛在便血階段，由于蟲體在上皮細(xì)胞內(nèi)以裂殖的方式進(jìn)行無性生殖，產(chǎn)生大量的裂殖子；或裂殖子在寄生的上皮細(xì)胞內(nèi)分裂從而破壞腸道上皮細(xì)胞引起出血，但在這段時(shí)間內(nèi)尚未形成卵囊，故糞便內(nèi)卵囊檢出數(shù)很少。1周后，經(jīng)過無性生殖和配子生殖，糞便中出現(xiàn)了大量的卵囊。這對通過糞便檢查牛球蟲帶來了困難。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 賀安祥，蔣忠榮，葉忠明，等. 牦牛球蟲病的流行病學(xué)調(diào)查［J］. 中國畜牧獸醫(yī)，2009，36（6）：154-156.

［2］ Dong H，Li C，Zhao Q，et al. Prevalence of Eimeria infection in yaks on the Qinghai-Tibet Plateau of China［J］. Journal of Parasitology，2012，98（5）：958-962.

［3］ 賀飛飛，李春花，雷萌桐，等. 青海省海南州興海縣牦牛寄生蟲病流行情況調(diào)查［J］. 畜牧與獸醫(yī). 2015，47（2）：107-111.

［4］ 黃兵，董輝，沈杰. 中國家畜家禽球蟲種類概述［J］. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2004，26（4）：313-316.

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［6］ 李家奎，昂宗拉姆，次卓嘎，等. 牦牛主要寄生蟲的防治［J］. 中國畜牧獸醫(yī)，2011，38（11）： 162-164.

（責(zé)任編輯：朱迪國）

Therapeutic Effect of Diclazuril Solution and Other Two Kinds of Drugs to Yak Coccidiosis

Guo Zhihong1，Peng Mao1，Shen Xiuying1，F(xiàn)u Yong1，Li Wei1，Song Yongwu2，Luo Xuan3
（1. Qinghai Academy of Animal Husbandry and Veterinary Science，Xining，Qinghai 810016；2. Animal Husbandry and Veterinary Station of Gangcha County，Gangcha，Qinghai 812300；3. College of Animal Science and Technology，China Agricultural University，Beijing 100083）

Abstract：To filtrate the effective drugs for yak coccidiosis treatment，drug screening experiments of three groups against coccidiosis with 96 yaks（73 calves born in the year and 23 1-year-old yaks）bred by 4 family herders in Shaliuhe town of Gangcha county，Qinghai province was carried out by using 3 kinds of anticoccidial drugs：Tongyang Qiujing（Diclazuril Solution），Tongyang Xueqiujing（Sulfa Chlorine Pyrazine sodium soluble powder）and Poplar Oral Liquid（Chinese herbal and crude drugs preparations for diarrhea treatment of cattle and sheep）. Fecal oocyst positive rates of the three groups before drug delivery were 87.50%，84.38% and 93.75%，respectively . After a week of drug delivery for three consecutive days，fecal oocyst negative rates were 92.86%，0 and 10%，respectively. The results proved that TongYang Qiujing was effective to yak coccidiosis，meanwhile the other two drugs noneffective to yak coccidiosis.

Key words：yaks；coccidian；coccidiostats；screen；oocysts negative rate

中圖分類號(hào)：R531.5

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1005-944X（2016）06-0077-03

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.06.022

基金項(xiàng)目：青海省科技廳農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣計(jì)劃項(xiàng)目（2014-NS-505）