王永艷

河北省邯鄲市第一醫(yī)院藥劑科，河北邯鄲　056002

冀產(chǎn)遠(yuǎn)志與卵葉遠(yuǎn)志的含量測(cè)定研究

王永艷

河北省邯鄲市第一醫(yī)院藥劑科，河北邯鄲056002

目的探討冀產(chǎn)遠(yuǎn)志與卵葉遠(yuǎn)志的種間差異，以指導(dǎo)臨床合理用藥。方法采用高效液相色譜法測(cè)定冀產(chǎn)遠(yuǎn)志與卵葉遠(yuǎn)志在不同采集期、不同用藥部位中有效活性成分遠(yuǎn)志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮?。 色譜柱為Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動(dòng)相為甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫30℃。結(jié)果各組分分離度良好，遠(yuǎn)志口山酮Ⅲ在0.46003～4.6003 mg/mL濃度范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好（r=0.999）；3，6二芥子?；崽窃?.41587～4.15872 mg/mL濃度范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好（r= 0.999），平均回收率分別為98.10%（RSD=1.80%）和98.13%（RSD=1.63%），7批樣品中遠(yuǎn)志山酮Ⅲ的含量分別為0.113、0.078、0.121、0.105、0.082、0.054、-0.003 g/g，3，6二芥子?；崽堑暮繛?.665、0.392、0.390、0.453、0.394、0.586、0.411 g/g。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、快速，為冀產(chǎn)遠(yuǎn)志的品種開(kāi)發(fā)提供科學(xué)數(shù)據(jù)。

遠(yuǎn)志；卵葉遠(yuǎn)志；含量測(cè)定；高效液相色譜法

［Abstract］Objective To discuss the difference between Polygala tenuifolia Wi11d.and Polygala sibirica L.for guiding c1inica1 rationa1 drug use.Methods Effective active ingredient Po1yga1axanthone and 3，6'-Disinapoy1sucrose content of different co11ection period and parts of Po1yga1a tenuifo1ia Wi11d and Po1yga1a sibirica L were measured by HPLC method.The determination was performed on Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）co1umn with methano1-0.05%phosphate acid（70∶30）as mobi1e phase at detection wave1ength of 230 nm，the f1ow rate was 1.0 mL/min，the co1umn temperature was set at 30℃.Results The components were separated comp1ete1y.The good 1inear re1ationship of Po1yga1axanthoneⅢoccurred in the range of 0.460 03～4.6003 mg/mL（r=0.999），the good 1inear re1ationship of 3，6'-Disinapoy1sucrose in the range of 0.415 87～4.158 72 mg/mL（r=0.999）.The average recoveries were 98.10%（RSD=1.80%）and 98.13%（RSD=1.63%）.In the 7 groups，the content of Po1yga1axanthoneⅢwas 0.113，0.078，0.121，0.105，0.082，0.054，-0.003 g/g，3，6'-Disinapoy1sucrose was 0.665，0.392，0.390，0.453，0.394，0.586，0.411 g/g.Conclusion The method is simp1e and quick，which can be used for rationa1 deve1opment of Po1yga1a tenuifo1ia Wi11d.

［Key words］Polygala tenuifolia Wi11d.；Polygala sibirica L.；Content determination；HPLC method

遠(yuǎn)志為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志（Polygala tenuifolia Wi11d.）或卵葉遠(yuǎn)志（Polygala sibirica L.）的干燥根。春秋兩季采挖。性苦、辛、溫，歸心、腎、肺經(jīng)。有益智安神、交通心腎、消腫祛痰的功效［1］。臨床用于抗焦慮、鎮(zhèn)靜催眠，祛痰鎮(zhèn)咳、抗衰老、抗抑郁、消腫利尿等［2-7］?！吨袊?guó)藥典》2015年版一部的標(biāo)準(zhǔn)中沒(méi)有區(qū)分遠(yuǎn)志與卵葉遠(yuǎn)志的種間區(qū)別，有關(guān)藥用遠(yuǎn)志的研究主要集中在細(xì)葉遠(yuǎn)志的化學(xué)成分、含量測(cè)定、藥理作用、制劑質(zhì)量控制、栽培技術(shù)等方面［8-15］。

近年來(lái)，卵葉遠(yuǎn)志的研究也逐漸展開(kāi)，滕紅梅等［16］對(duì)卵葉遠(yuǎn)志的生藥學(xué)研究，宋月林等［17-18］對(duì)卵葉遠(yuǎn)志的地上部分進(jìn)行了化學(xué)成分研究，周雨虹等［19］對(duì)卵葉遠(yuǎn)志根的化學(xué)成分研究，卵葉遠(yuǎn)志的含量測(cè)定僅限于遠(yuǎn)志皂苷成分［20］等。遠(yuǎn)志與卵葉遠(yuǎn)志的對(duì)比研究還有待開(kāi)展，本研究針對(duì)冀產(chǎn)遠(yuǎn)志與卵葉遠(yuǎn)志中有效成分遠(yuǎn)志山酮Ⅲ與3，6二芥子酰基蔗糖的含量進(jìn)行比對(duì)研究，比較兩種間的差別，為開(kāi)發(fā)冀產(chǎn)遠(yuǎn)志資源提供技術(shù)參考。

1　儀器與材料

GC2010AT高效液相色譜儀（日本島津），Labso1ution工作站，紫外檢測(cè)器，AUW120D型電子天平（日本島津）。甲醇、磷酸均為分析純，乙腈為色譜純，水為純化水，遠(yuǎn)志山酮Ⅲ對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院；批號(hào)：116050-201203）；3，6二芥子?；崽菍?duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院；批號(hào)：11848-201303）；6批藥材均由邯鄲市藥品檢驗(yàn)中心孔增科主任藥師鑒定（產(chǎn)地：涉縣固鎮(zhèn)、涉縣九峰山、涉縣固鎮(zhèn)、武安、涉縣九峰山、涉縣小井）。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件及系統(tǒng)性試驗(yàn)

色譜柱：Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）為固定相，流動(dòng)相：甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），檢測(cè)波長(zhǎng)為320 nm，柱溫為室溫，進(jìn)樣量為10 μL。在以上色譜條件下，各組分分離度良好。見(jiàn)圖1。

圖1　HPLC色譜圖

2.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取遠(yuǎn)志山酮Ⅲ對(duì)照品12.03 mg與3，6二芥子?；崽菍?duì)照品10.83 mg，置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為混合對(duì)照品溶液。

2.3供試品溶液的制備

取樣品遠(yuǎn)志（卵葉遠(yuǎn)志）細(xì)粉（過(guò)四號(hào)篩）約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入70%甲醇25 mL，精密稱定，加熱回流1.5 h，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液即得。

2.4線性關(guān)系的考察

取對(duì)照品溶液，分別精密量取1、2.5、5、10 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別進(jìn)樣10 μL于高效液相色譜儀中，按上述色譜條件進(jìn)行峰面積測(cè)定，以質(zhì)量濃度X為橫坐標(biāo)，峰面積Y為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，遠(yuǎn)志山酮Ⅲ回歸方程：Y= 2×106X+137 647，r=0.999，結(jié)果表明遠(yuǎn)志山酮Ⅲ質(zhì)量濃度在0.460 03～4.6003 mg/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系；3，6二芥子酰基蔗糖回歸方程：Y=2×106X+ 106 030，r=0.999，結(jié)果表明，3，6二芥子?；崽琴|(zhì)量濃度在0.415 87～4.158 72 mg/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

2.5精密度試驗(yàn)

精密吸取混合對(duì)照品溶液 10 μL，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄色譜圖，遠(yuǎn)志山酮Ⅲ與3，6二芥子酰基蔗糖的RSD分別為0.37%、0.41%，結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.6重復(fù)性試驗(yàn)

按“2.2.3”項(xiàng)下方法平行制備5份供試品溶液按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得遠(yuǎn)志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮糠謩e為0.105%、0.453%，表明重復(fù)性良好。

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液10 μL，分別在0、2、4、6、8、12 h進(jìn)樣，共測(cè)定6次，其RSD=1.5%，表明該溶液12 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.8加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量的供試品細(xì)粉（遠(yuǎn)志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮糠謩e為0.105%、0.453%）約0.5 g，精密稱定6份，再分別精密加混合對(duì)照品儲(chǔ)備液1 mL，按“2.2.3”項(xiàng)下供試品溶液的制備方法，進(jìn)樣測(cè)定，遠(yuǎn)志山酮Ⅲ與3，6二芥子酰基蔗糖，平均回收率為98.10%、98.13%，RSD分別為1.80%、1.63%。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率測(cè)定結(jié)果

2.9樣品含量測(cè)定

取樣品，按上述供試品溶液制備方法制備，精密量取供試品溶液和對(duì)照品溶液10 μL，注入液相色譜儀測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　樣品測(cè)定結(jié)果（n=6）

3　討論

通過(guò)采用液相色譜法對(duì)遠(yuǎn)志和卵葉遠(yuǎn)志的不同采摘期及不同部位中有效活性成分遠(yuǎn)志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮窟M(jìn)行比對(duì)研究發(fā)現(xiàn)，冀產(chǎn)卵葉遠(yuǎn)志根中兩種成分的含量高于與冀產(chǎn)遠(yuǎn)志根，建議可將卵葉遠(yuǎn)志作為遠(yuǎn)志的開(kāi)發(fā)品種之一；地上部分（遠(yuǎn)志小草）幾乎不含遠(yuǎn)志山酮Ⅲ，3，6二芥子?；崽堑暮窟€較高，并且二者根中兩種成分的含量均高于其全草，說(shuō)明這與傳統(tǒng)習(xí)慣把根作為主要藥用部位是一致的；二者3，6二芥子?；崽堑暮窟h(yuǎn)大于遠(yuǎn)志山酮Ⅲ，且秋季采摘的3，6二芥子?；崽呛扛哂诖杭?，遠(yuǎn)志山酮Ⅲ含量春季采摘的大大高于秋季，原因北方日照時(shí)間長(zhǎng)，陽(yáng)光充足，糖分含量高，酮成分含量較低，可根據(jù)藥理作用選擇合理的采摘期。

經(jīng)方法學(xué)考證，該方法簡(jiǎn)便快捷、準(zhǔn)確，通過(guò)測(cè)定兩種成分的含量指標(biāo)，可用于有效區(qū)別冀產(chǎn)遠(yuǎn)志及卵葉遠(yuǎn)志的種間差異，為冀產(chǎn)遠(yuǎn)志的品種開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

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Determination research of Polygala tenuifolia Willd.and Polygala sibirica L.

WANG Yongyan
Department of Pharmacy，the First Hospita1 of Handan，Hebei Province，Handan056002，China

R927.2

A

1673-7210（2016）04（c）-0132-04

河北省中醫(yī)藥管理局科研計(jì)劃項(xiàng)目（2010184）。

王永艷（1974-），女，碩士，副主任藥師；研究方向：藥物的臨床應(yīng)用及藥物分析。

2016-01-22本文編輯：趙魯楓）