路艷輝　韓連菊　張蕾　倪素娜　田巧燕

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·論著·

子癇前期患者血清和胎盤組織中IL-10和TSP-1的表達(dá)及意義

路艷輝韓連菊張蕾倪素娜田巧燕

050000河北省石家莊市婦幼保健院(路艷輝、韓連菊、張蕾、倪素娜)；河北省石家莊市東風(fēng)3302社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心(田巧燕)

【摘要】目的探討白介素10(IL-10)和血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)在子癇前期患者血清及胎盤組織中的表達(dá)水平及其意義。方法選取產(chǎn)科2014至2015年收治的足月子癇前期患者68例[輕度子癇前期32例(輕度子癇前期組)，重度子癇前期36例(重度子癇前期組)]和正常妊娠者35例(對照組)。檢測3組產(chǎn)婦分娩前血清IL-10及TSP-1水平及分娩后胎盤組織中IL-10 mRNA及TSP-1表達(dá)水平，并對3組血清IL-10、TSP-1水平與血壓進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果3組產(chǎn)婦血壓水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中輕度、重度子癇前期組血壓與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；重度子癇前期組血壓與輕度子癇前期組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。對照組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組產(chǎn)婦血清IL-10水平及胎盤組織IL-10 mRNA表達(dá)水平依次降低，而血清及胎盤組織TSP-1水平則依次升高，組間兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Pearson相關(guān)分析顯示，對照組產(chǎn)婦血清IL-10、TSP-1水平與血壓無相關(guān)性(P>0.05)；輕度及重度子癇前期組產(chǎn)婦IL-10水平與血壓呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，而TSP-1水平則與血壓呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論子癇前期患者血清及胎盤組織中IL-10水平較對照組降低，而TSP-1水平則升高，提示IL-10是妊娠的保護(hù)因子，而TSP-1則是危險(xiǎn)因子。

【關(guān)鍵詞】子癇前期；胎盤；白介素-10；血小板反應(yīng)蛋白

子癇前期是妊娠期特有的疾病，其發(fā)病率約占全部妊娠的3.9%，是發(fā)展中國家母嬰死亡的主要原因。子癇前期的發(fā)病機(jī)制尚未完全明了，大多數(shù)學(xué)者比較認(rèn)同的是免疫失衡學(xué)說和血管內(nèi)皮損傷學(xué)說[1，2]。前者認(rèn)為妊娠時(shí)體內(nèi)輔助性T細(xì)胞(Th細(xì)胞)中Th1型細(xì)胞和Th2型細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子失衡，如白介素2(IL-2)、干擾素γ(INF-γ)等分泌增加，白介素4(IL-4)、白介素5(IL-5)等分泌減少，無法抑制Th1類細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，繼而無法防止Th1類細(xì)胞因子對滋養(yǎng)層細(xì)胞及胎兒產(chǎn)生損傷。白介素10(IL-10)是Th型細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，可以誘導(dǎo)前體細(xì)胞向Th2型細(xì)胞轉(zhuǎn)化，并且能抑制Th1型細(xì)胞分泌IL-2，故其可能對妊娠起保護(hù)作用。后一種學(xué)說認(rèn)為子癇前期與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及新生血管受到抑制有關(guān)，血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)能影響血管生成[3]，有研究報(bào)道其在免疫學(xué)疾病、心血管疾病、腫瘤等的發(fā)病中起作用，但其與子癇前期的發(fā)病是否有關(guān)尚未知[4]。故本研究通過觀察子癇前期患者及正常妊娠者血清及胎盤中IL-10及TSP-1水平，以探討二者在子癇前期發(fā)病中的作用。

1資料與方法

1.1一般資料選取石家莊市婦幼保健院產(chǎn)科2014至2015年收治的足月子癇前期患者68例，其中輕度子癇前期32例(輕度子癇前期組)，重度子癇前期36例(重度子癇前期組)，均符合子癇前期的診斷標(biāo)準(zhǔn)，即妊娠20周后出現(xiàn)收縮壓≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和(或)舒張壓≥90 mm Hg伴24 h尿蛋白≥0.3 g，或隨機(jī)尿蛋白檢測(+)[5]。另選取同期同孕齡的正常妊娠者35例為對照組，整個(gè)孕期血壓<140/90 mm Hg，尿蛋白檢測(-)。3組均排除：妊娠前就患有高血壓或糖尿病、腎病者，合并其他妊娠并發(fā)癥者；前置胎盤、低置胎盤、胎盤早剝、先兆早產(chǎn)者；妊娠期間服用過其他治療藥物(除了維生素和鈣劑)者。3組產(chǎn)婦均為單胎初產(chǎn)，行剖宮產(chǎn)術(shù)，且年齡、孕周及孕期增重間有均衡性(P>0.05)。3組產(chǎn)婦均知情同意，本研究也經(jīng)過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。見表1。

表1　3組孕婦一般資料比較　±s

1.2方法3組產(chǎn)婦住院后于未用藥前測定血壓，并采集靜脈血10 ml，2 000 r/min離心10 min，取上清液置于-70℃冰箱，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清IL-10及TSP-1水平，試劑盒購于武漢博士德生物工程有限公司。剖宮產(chǎn)術(shù)中待胎盤娩出后，留取母體面近期待根部的胎盤組織1 cm3大小，采用免疫組織化學(xué)SP法檢測胎盤組織中TSP-1的表達(dá)，采用原位雜交法檢測胎盤組織中IL-10 mRNA的表達(dá)[6]。

2結(jié)果

2.13組產(chǎn)婦血壓比較3組產(chǎn)婦血壓水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中輕度、重度子癇前期組血壓與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；重度子癇前期組血壓與輕度子癇前期組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表23組產(chǎn)婦血壓水平比較

組別收縮壓舒張壓對照組(n=35)108.9±9.378.5±7.3輕度子癇前期組(n=32)151.3±11.2*101.3±7.5*重度子癇前期組(n=36)167.5±10.3*#112.4±8.5*#

注：與對照組比較，*P<0.05；與輕度子癇前期組比較，#P<0.05

2.23組產(chǎn)婦血清及胎盤IL-10、TSP-1水平比較3組產(chǎn)婦血清、胎盤組織中IL-10、TSP-1水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其中輕度、重度子癇前期組的IL-10、TSP-1與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；重度子癇前期組的IL-10、TSP-1與輕度子癇前期組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表33組產(chǎn)婦血清、胎盤組織中IL-10、TSP-1水平比較

組別血清IL-10(ng/L)TSP-1(μg/L)胎盤組織IL-10mRNA(OD值)TSP-1(例,-/+/++/+++)對照組(n=35)118.9±35.71.32±0.130.21±0.0323/6/3/3輕度子癇前期組(n=32)99.8±27.5*1.54±0.21*0.18±0.02*11/6/12/3*重度子癇前期組(n=36)82.2±28.1*#1.61±0.20*#0.12±.04*#8/10/11/7*#

注：與對照組比較，*P<0.05；與輕度子癇前期組比較，#P<0.05

2.3相關(guān)性分析Pearson相關(guān)分析顯示，對照組產(chǎn)婦血清IL-10、TSP-1水平與血壓之間無相關(guān)性(P>0.05)；輕度及重度子癇前期組產(chǎn)婦IL-10水平與血壓呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，而TSP-1水平則與血壓呈正相關(guān)(P<0.05)。見表4。

表4　3組產(chǎn)婦血清IL-10、TSP-1水平與血壓的相關(guān)性

3討論

子癇前期是指妊娠前血壓正常者在妊娠20周后出現(xiàn)高血壓、蛋白尿和水腫，也稱為先兆子癇，是妊娠期特有的疾病，可影響機(jī)體的各個(gè)器官，是孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡的主要原因之一[7-10]。其免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制是母-胎免疫平衡失調(diào)，母體的免疫系統(tǒng)對滋養(yǎng)層來源于父系的抗原產(chǎn)生異常反應(yīng)，一旦娩出胎兒這個(gè)同種半異體移植物，患者的病情會(huì)逐漸好轉(zhuǎn)。目前比較認(rèn)同的是Th1/Th2類細(xì)胞因子平衡在維持胚胎發(fā)育中發(fā)揮很重要的作用。Th1類細(xì)胞因子如IL-2、IL-12[7]、INF-γ可導(dǎo)致流產(chǎn)，而Th2類細(xì)胞因子則可抑制Th1類細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，從而防止后者對滋養(yǎng)層細(xì)胞及胎兒的損傷，以維持正常的妊娠[8,11,12]。一旦Th1/Th2細(xì)胞因子分泌失調(diào)，就會(huì)導(dǎo)致母-胎平衡失調(diào)，從而引發(fā)類似于移植臟器慢性排斥的免疫反應(yīng)，使得子宮蛻膜及血管內(nèi)皮功能失調(diào)，嚴(yán)重者導(dǎo)致流產(chǎn)[9]。

徐美春等[5]比較了子癇前期患者與正常妊娠者血漿腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素15(IL-15)、IL-10水平，發(fā)現(xiàn)前者血漿TNF-α及IL-15水平較后者升高，而IL-10水平則較后者降低，認(rèn)為抗炎因子IL-10水平升高對子癇前期患者有保護(hù)作用。張飛躍等[10,13]研究發(fā)現(xiàn)，血清IFN-γ、可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sFlt-1)及IFN-γ/IL-10比值升高導(dǎo)致的胎盤缺血缺氧是重度子癇前期患者發(fā)病的因素之一。本研究結(jié)果顯示，對照組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組產(chǎn)婦血清IL-10水平及胎盤組織IL-10 mRNA表達(dá)水平依次降低；Pearson相關(guān)分析顯示，輕度及重度子癇前期組產(chǎn)婦IL-10水平與血壓呈負(fù)相關(guān)。說明IL-10的表達(dá)失衡可能是子癇前期免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，并且IL-10可以預(yù)測及反映患者的嚴(yán)重程度[11-16]。正常妊娠時(shí)，機(jī)體Th1、Th2型細(xì)胞互相抑制，處于動(dòng)態(tài)平衡，維持體內(nèi)正常的細(xì)胞免疫和體液免疫。IL-10是Th2型細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，可誘導(dǎo)前體細(xì)胞向Th2型細(xì)胞轉(zhuǎn)化，使細(xì)胞免疫功能減弱；另外，IL-10還可以抑制Th1型細(xì)胞分泌的促炎細(xì)胞因子如TNF-α、IFN-γ、IL-2等，可以說IL-10是細(xì)胞免疫的抑制者[17-20]。

血管內(nèi)皮損傷學(xué)說認(rèn)為，子癇前期與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及新生血管受到抑制有關(guān)[21-24]。TSP-1又稱為凝血酶敏感蛋白1，可以抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附、增生及遷移，從而抑制新生血管的形成[25,21]。有研究發(fā)現(xiàn)，子癇前期患者血清及胎盤組織中TSP-1的表達(dá)較正常妊娠的產(chǎn)婦升高，且與疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)[3]。還有研究發(fā)現(xiàn)，子癇前期患者血清及胎盤組織中血管性血友病因子(vWF)和TSP-1表達(dá)水平顯著高于正常妊娠者，且患者血管損傷越嚴(yán)重，二者的表達(dá)越高[14,21]。本研究結(jié)果顯示，對照組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組產(chǎn)婦血清及胎盤組織中TSP-1水平依次升高，Pearson相關(guān)分析顯示，子癇前期患者血清TSP-1水平與血壓呈正相關(guān)。故推測TSP-1在血清及胎盤中的高水平表達(dá)可以影響滋養(yǎng)細(xì)胞功能，引起胎盤中血管內(nèi)皮損傷，導(dǎo)致胎盤缺血、缺氧，引起胎盤功能障礙。分析其原因，TSP-1通過過火血管內(nèi)皮細(xì)胞，使氧代謝產(chǎn)物釋放增加，今兒使得血管活性物質(zhì)釋放增加，纖維蛋白原沉積增加，引起和加重了血栓形成。如果子宮螺旋動(dòng)脈發(fā)生閉鎖，就會(huì)導(dǎo)致胎盤血液灌注下降，引起子癇前期；另外，TSP-1還間接影響炎性細(xì)胞及肌纖維細(xì)胞的活性，從而影響血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，最終抑制抑制新生血管形成，加劇胎盤組織缺血、缺氧[15,25,26]。故可以通過檢測子癇前期患者血清TSP-1水平來協(xié)助判斷病情輕重，以便盡早給予藥物干預(yù)。

綜上所述，IL-10、TSP-1與子癇前期的發(fā)病及病情輕重有關(guān)，前者是妊娠的保護(hù)因子，后者是妊娠的危險(xiǎn)因子。

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doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.13.031

【中圖分類號(hào)】R 714.245

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1002-7386(2016)13-2022-03

(收稿日期：2016-01-19)