殷曉星， 周 琨， 馬保金

(上海市靜安區(qū)中心醫(yī)院,復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院靜安分院普外科，上海 200040)

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橋本甲狀腺炎合并甲狀腺乳頭狀癌患者血清S100A4、HSP60和TK1檢測(cè)的臨床意義

殷曉星， 周 琨， 馬保金

(上海市靜安區(qū)中心醫(yī)院,復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院靜安分院普外科，上海 200040)

目的 探討橋本甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis， HT)合并甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma， PTC)患者血清中鈣結(jié)合蛋白A4(serum calcium-binding protein A4， S100A4)、熱休克蛋白(heat shock protein， HSP)60和細(xì)胞質(zhì)胸苷激酶(cytoplasmic thymidine kinase， TK1)水平變化的臨床意義。方法 分別抽取2010年1月至2015年6月122例TH合并PTC(TH+PTC組)、43例HT(HT組)和20例正常體檢人(健康對(duì)照組)的血清標(biāo)本，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)各組血清S100A4、HSP60、TK1水平及其治療前后變化，并探討這些血清標(biāo)志與HT+PTC組患者的HT和AJCC分期的關(guān)系。結(jié)果 HT合并PTC組和HT組的血清S100A4、HSP60和TK1明顯高于健康對(duì)照組(P<0.01)。其中，在HT合并PTC組，血清S100A4、HSP60和TK1隨HT病情加重和PTC分期升高而升高(P<0.01)，但術(shù)后較術(shù)前明顯降低(P<0.01)；S100A4與HSP60(r=0.865，P<0.05)、TK1(r=0.679，P<0.05)，HSP60與TK1(r=0.575，P<0.05)均呈正相關(guān)。結(jié)論 血清S100A4、HSP60、TK1聯(lián)合檢測(cè)有助于早期診斷HT合并PTC。

橋本甲狀腺炎； 甲狀腺乳頭狀腫瘤； 鈣結(jié)合蛋白A4； 熱休克蛋白-6； 細(xì)胞質(zhì)胸苷激酶

橋本甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis， HT)是一種常見(jiàn)的免疫性疾病，常伴發(fā)甲狀腺結(jié)節(jié)，這種伴發(fā)的甲狀腺結(jié)節(jié)癌變率較高，可達(dá)23%以上。癌變以乳頭狀甲狀腺癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)多見(jiàn)，發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)[1-2]。如何早期監(jiān)測(cè)HT合并PTC，早期干預(yù)治療是提高PTC預(yù)后的關(guān)鍵。鈣結(jié)合蛋白A4(calcium-binding protein A4， S100A4)是鈣離子結(jié)合蛋白家族成員，可通過(guò)鈣離子信號(hào)途徑調(diào)控腫瘤的發(fā)生發(fā)展和侵襲、轉(zhuǎn)移，對(duì)PTC預(yù)后預(yù)測(cè)亦具重要意義[3]。熱休克蛋白(heat shock protein， HSP)60是一種熱誘導(dǎo)形成的應(yīng)激蛋白，對(duì)蛋白錯(cuò)誤修復(fù)過(guò)程有重要作用，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[4]。細(xì)胞質(zhì)胸苷激酶(cytoplasmic thymidine kinase， TK1)在正常人體內(nèi)微量存在，在惡性腫瘤中有95%患者明顯升高，是一種較有潛力的早期診斷腫瘤標(biāo)記物[5]。本研究通過(guò)對(duì)HT合并PTC患者血清S100A4、HSP60和TK1檢測(cè)，觀察其在HT合并PTC的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2010年1月至2015年6月在復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院靜安分院就診的122例TH合并PTC患者(TH合并PTC組)、43例HT患者(HT組)和20例正常體檢人(健康對(duì)照組)。其中，TH合并PTC組男46例，女76例，年齡20～60歲，平均年齡(46.97±9.78)歲，均被術(shù)后病理確診，符合WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)；按HT病理分期屬早期27例、中期21例、晚期74例，按美國(guó)腫瘤協(xié)會(huì)(AJCC)臨床分期屬Ⅰ期65例、Ⅱ期16例、Ⅲ期27例、Ⅳ期14例；所有患者排除其他器官病變或其他惡性腫瘤，術(shù)前無(wú)放化療、心肝腎等重要臟器衰竭和不配合研究者。HT組男15例，女28例，年齡20～60歲，平均年齡(46.17±8.87)歲，亦均經(jīng)病理確診。健康對(duì)照組男7例，女13例，年齡20～60歲，平均年齡(46.54± 9.63)歲。3組年齡、性別等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法

HT合并PTC組和HT組均采用常規(guī)手術(shù)治療。入院第1天各組和HT合并PTC組術(shù)后1周空腹抽取血液2～3ml，離心半徑10cm，3000r/min，離心20min分離血清，保存于-70℃冰箱中待測(cè)。采用Freedom Evolyzer 2150型全自動(dòng)酶標(biāo)儀，以酶聯(lián)免疫法按試劑盒(均購(gòu)自美國(guó)R&D公司)測(cè)定各組血清S100A4、HSP60、TK1值。并觀察各組血清S100A4、HSP60、TK1變化及HT合并PTC組血清S100A4、HSP60、TK1與HT分期和AJCC分期的關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 血清S100A4、HSP60、TK1

HT合并PTC組和HT組的血清S100A4、HSP60及TK1值均明顯高于健康對(duì)照組(P<0.01)；HT合并PTC組則明顯高于HT組(P<0.01)，見(jiàn)表1。

2.2 血清S100A4、HSP60、TK1與HT合并PTC患者TH嚴(yán)重程度關(guān)系

HT合并PTC患者血清S100A4、HSP60、TK1隨HT嚴(yán)重程度加深而升高(P<0.01)，見(jiàn)表2。

2.3 血清S100A4、HSP60、TK1與HT合并PTC患者PTC分期關(guān)系

HT合并PTC患者血清S100A4、HSP60及TK1隨PTC分期升高而升高(P<0.01)，見(jiàn)表3。

2.4 HT合并PTC患者治療前后血清S100A4、HSP60及TK1變化

HT合并PTC患者術(shù)后血清S100A4、HSP60及TK1較術(shù)前明顯降低(P<0.01)，見(jiàn)表4。

表1 各組S100A4、HSP60及TK1比較

與健康對(duì)照組比較，*P<0.01；與HT組比較，#P<0.01

表2 血清S100A4、HSP60、TK1與HT合并PTC患者TH嚴(yán)重程度關(guān)系

與早期比較，*P<0.01；與中期比較，#P<0.01

表3 血清S100A4、HSP60、TK1與HT合并PTC患者PTC分期關(guān)系

與Ⅰ期比較，*P<0.01；與Ⅱ期比較，#P<0.01；與Ⅲ期比較，△P<0.01

表4 HT合并PTC患者治療前后血清S100A4、HSP60及TK1變化

與術(shù)前比較，*P<0.01

2.5 HT合并PTC患者血清S100A4、HSP60及TK1相關(guān)性分析

在HT合并PTC患者，血清S100A4與血清HSP60(r=0.865，P<0.05)和血清TK1(r=0.679，P<0.05)呈正相關(guān)，血清HSP60與血清TK1呈正相關(guān)(r=0.575，P<0.05)。

3 討 論

有研究[6]顯示，S100A4在正常甲狀腺組織不表達(dá)而在甲狀腺癌高表達(dá)，且與腫瘤患者預(yù)后相關(guān)，在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中扮演重要角色[7]。本組HT合并PTC患者血清S100A4明顯高于HT組和健康對(duì)照組，且隨HT嚴(yán)重程度和PTC分期升高而升高，提示S100A4可能參與了HT合并HT的發(fā)生發(fā)展，并與PTC預(yù)后相關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致，但具體機(jī)制尚不清楚。S100A4蛋白與liprinβ1結(jié)合，抑制跨膜酪氨酸磷酸酶磷酸化，與非骨骼肌肌漿球蛋白重鏈、原肌球蛋白等骨架結(jié)構(gòu)相互作用，導(dǎo)致細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)改變，增加腫瘤細(xì)胞游出血管能力[8]；還通過(guò)促進(jìn)新生血管生成增加實(shí)體瘤新生血管生成，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)；并致同型細(xì)胞不能正常黏附，導(dǎo)致腫瘤從母體腫瘤中脫落，從而發(fā)生轉(zhuǎn)移。本組HT合并PTC患者術(shù)后血清S100A4較治療前明顯降低，說(shuō)明S100A4與腫瘤負(fù)荷有一定聯(lián)系，故對(duì)腫瘤負(fù)荷具有監(jiān)測(cè)作用。

HSPs是一類高度保守的蛋白質(zhì)，廣泛存在真核生物細(xì)胞中，在維持細(xì)胞的正?；顒?dòng)中有重要作用，參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展[9]。HSP60是HSPs家族的重要成員，在多種腫瘤中異常高表達(dá)，參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展和細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、DNA修復(fù)和細(xì)胞凋亡，在腫瘤生物學(xué)行為方面有重要作用。據(jù)報(bào)道[10-11]，HSP60在結(jié)直腸、胃和子宮頸癌中異常高表達(dá)，并與腫瘤惡性程度、浸潤(rùn)和預(yù)后相關(guān)。但在甲狀腺癌中表達(dá)研究較少。本研究HT合并PTC組血清HSP60明顯高于HT組和健康對(duì)照組，且隨HT和PTC分期升高而升高，術(shù)后明顯下降，亦表明HSP60參與了PTC的發(fā)生發(fā)展，有助于PTC的早期發(fā)現(xiàn)和治療預(yù)后監(jiān)測(cè)。其機(jī)制可能與PTC發(fā)生過(guò)程中癌細(xì)胞的原癌基因突變、擴(kuò)增和激活，抑癌基因突變、失活和缺失，致HSP60在PTC中高表達(dá)并釋放入血有關(guān)[12]。故血液HSP60檢測(cè)對(duì)監(jiān)測(cè)PTC嚴(yán)重程度有重要意義。

TK1在正常成人含量極低，當(dāng)機(jī)體細(xì)胞大量增殖時(shí)迅速增高，癌變時(shí)因腫瘤細(xì)胞增殖加劇，可至正常的2～100倍，并隨細(xì)胞周期變化使細(xì)胞增殖期TK1明顯增加，是評(píng)價(jià)細(xì)胞增殖的重要指標(biāo)，臨床上可作為腫瘤早期篩查、診斷、監(jiān)控和預(yù)后隨訪的重要標(biāo)記[13-15]。本研究HT合并PTC組血清TK1明顯高于HT組和健康對(duì)照組，且隨HT和PTC分期升高而增高，術(shù)后明顯降低，提示TK1可作為HT合并PTC細(xì)胞增殖、腫瘤發(fā)生發(fā)展和預(yù)后的重要血清標(biāo)記和早期預(yù)警指標(biāo)[16]。

本組結(jié)果還表明，HT合并PTC患者血清S100A4與HSP60、TK1，HSP60與TK1呈正相關(guān)，說(shuō)明S100A4、HSP60、TK1共同參與了HT合并PTC的發(fā)生發(fā)展，聯(lián)合檢測(cè)這些指標(biāo)可能有助于HT合并PTC的早期診斷。

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Serum S100A4， HSP60 and TK1 leves in Hashimoto’s thyroiditis patients with papillary thyroid carcinoma

YINXiao-xing，ZHOUKun，MABao-jin

(Dep. of General Surgery， Jing’an District Central Hospital, Jingan Branch of Huashan Hospital， Fudan University, Shanghai 200040， China)

Objective To investigate serum calcium-binding protein A4(S100A4)， heat shock protein(HSP) 60 and cytoplasmic thymidine kinase(TK1) in Hashimoto’s thyroiditis(HT) patients with papillary thyroid carcinoma(PTC). Methods One hundred and twenty two TH patients with PTC(HT + PTC group)， 43 patients with HT(HT group) and 20 healthy subjects(control group) were recruited in the study from January 2010 to June 2015. Serum levels of S100A4， HSP60 and TK1 were measured by ELISA method. The correlation of these indicators with HT and AJCC staging was analyzed. Results Serum levels of S100A4， HSP60 and TK1 were significantly higher in HT with PTC group and HT group than those in control group(P<0.01)， and increased as the severity of HT and the raise of PTC stages in HT with PTC group(P<0.01)， and significantly lower after postoperation than before operation(P<0.01). Serum levels of S100A4 were positively correlated with HSP60(r=0.865，P<0.05) and TK1(r=0.679，P<0.05)， and serum levels of HSP60 was positively correlated to serum TK1(r=0.575，P<0.05) in HT with PTC group. Conclusion The combined detections of serum levels of S100A4， HSP60 and TK1 are helpful for early diagnosis of HT with PTC.

Hashimoto’s thyroiditis； papillary thyroid carcinoma； calcium-binding protein A4； heat shock protein-6； cytoplasmic thymidine kinase

10.16118/j.1008-0392.2016.04.018

2016-01-13

殷曉星(1979—)，男，主治醫(yī)師，學(xué)士.E-mail： alex9601136@163.com

R 736.12

A

1008-0392(2016)04-0088-05