劉娟娟 景明 陳正君 陳暉 盧年華 張艷霞

摘要：目的 對10味常用殺蟲中藥的殺蟲效果進行篩選，為研制新的植物源農(nóng)藥奠定基礎(chǔ)。方法 以中藥提取物對3種害蟲的校正死亡率為觀察指標，分別采用載玻片浸漬法、微量點滴法、蟲體浸漬法測定10種常用殺蟲中藥的水提物及醇提物對朱砂葉螨、甘藍蚜、黏蟲的觸殺作用。結(jié)果 中藥醇提物對3種害蟲均有觸殺作用，水提物無明顯效果。其中，百部醇提物對3種害蟲均有明顯的觸殺作用，校正死亡率分別為78.7%、85.9%、96.7%；苦皮藤、苦參、蒼耳子、甘遂乙提物對朱砂葉螨有較好的觸殺作用，將苦皮藤、百部、苦參、蒼耳子、甘遂按體積比2∶1∶1.5∶1.5∶1.5∶1.5配伍時，對朱砂葉螨殺蟲活性較單味藥提取物增強，校正死亡率為96.5%。瑞香狼毒、藜蘆、蒼耳子、白芥子醇提物對甘藍蚜有較強的殺滅作用，將蒼耳子、百部、瑞香狼毒、藜蘆按體積比1∶1.5∶2∶2配伍時，其對甘藍蚜的活性增強，校正死亡率為93.1%。結(jié)論 中藥提取物經(jīng)配伍后，其殺蟲活性增強。

關(guān)鍵詞：中草藥；提取物；配伍；朱砂葉螨；甘藍蚜；黏蟲；殺蟲活性

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.07.014

中圖分類號：R285.5 文獻標識碼：A 文章編號：1005-5304（2016）07-0054-05

Comparison of Insecticidal Efficacy of Commonly Used TCM Pesticides and Preliminary Research on Compatibility LIU Juan-juan， JING Ming， CHEN Zheng-jun， CHEN Hui， LU Nian-hua， ZHANG Yan-xia （College of Pharmacy， Gansu University of Chinese Medicine， Lanzhou 730000， China）

Abstract： Objective To lay the foundation of new botanical pesticides by screening the insecticidal efficacy of 10 commonly used TCM pesticides. Methods Slide immersion method， trace intravenous drip method and insect body dipping method were respectively used to measure contact action of water extract and ethanol extract of the 10 commonly used TCM pesticides to Teranychus cinnbarinus， Brevicoryne brassicae and Mythimna separate， with herbal extracts to three kinds of insect pests of corrected mortality as observation indexes， Results Alcohol extracts for three kinds of insect pests were found to have contact action， and water extracts had no obvious effect. The Stemonae Radix alcohol extract had obvious contact action on three kinds of insect pests， and corrected mortality rates were 78.7%， 85.9%， and 96.7%， respectively； ethanol extracts of Angled Bittersweet， Sophorae Flavescentis Radix， Xanthii Fructus and Kansui Radix showed good contact action to Teranychus cinnbarinus，. The volume ratio of compatibility among Angled Bittersweet， Sophorae Flavescentis Radix， Xanthii Fructus and Kansui Radix was 2：1：1.5：1.5：1.5：1.5. The insecticidal activity to Teranychus cinnbarinus， was stronger than extracts of single herbs， and corrected mortality was 96.5%. Alcohol extracts of Stellera， hellebore， white mustard seed， and Xanthii Fructus showed good contact action to Brevicoryne brassicae. When the volume ratio of compatibility among Xanthii Fructus， Stemonae Radix， Stellera， and hellebore was 1：1.5：2：2， the activity to Brevicoryne brassicae increased. and corrected mortality was 93.1%. Conclusion The insecticidal activity will be enhanced after TCM extracts are under compatibility.

Key words： Chinese herbal medicine； extract； compatibility； Teranychus cinnbarinus； Brevicoryne brassicae； Mythimna separate； insecticidal activity

基金項目：國家科技支撐計劃（2011BAI05B0218）

通訊作者：景明，E-mail：jm@gszy.edu.cn

近年來從植物中尋找殺蟲活性物質(zhì)是目前研究開發(fā)無公害農(nóng)藥的重要途徑之一[1]。中草藥不僅具有醫(yī)療保健作用，而且還具有殺蟲的作用[2]。我國自20世紀30年代開始，曾對煙草、魚藤、巴豆、百部等殺蟲植物進行過比較廣泛的研究[3]。進入20世紀90年代，對有殺蟲活性的植物資源又作了進一步的調(diào)查研究。對單味藥的研究較多，尤其是對其有效成分的研究[4]。王氏等[5]分別對蒼耳子用不同溶劑提取，發(fā)現(xiàn)不同溶劑提取物對菜粉蝶的作用各不相同。胡氏等[6]采用活體及盆栽試驗研究水煎液提取的苦楝皮活性成分對蠐螬、金針蟲殺蟲效果，顯示苦楝皮水煮液對地下害蟲有殺滅作用。本實驗選取10種中藥，采用乙醇回流提取和水提取2種方法，選用標準試蟲在實驗條件下進行嚴格的生物測定，測定這些中藥的殺蟲作用，為研制新的植物源農(nóng)藥奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試昆蟲

黏蟲Mythimna separate引自甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院敏感體系，室內(nèi)自然條件下飼養(yǎng)，實驗時挑選整齊一致的幼蟲供試。甘藍蚜Brevicoryne brassicae和朱砂葉螨Teranychus cinnbarinus均采自甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院應(yīng)用昆蟲研究溫室。

1.2 供試中藥

百部、蒼耳子、苦參、丁香、甘遂、瑞香狼毒、藜蘆、苦皮藤、苦楝皮、雷公藤，甘肅中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房。

1.3 主要試劑與儀器

無水乙醇，分析純，天津市得思化學(xué)試劑有限公司。DHP-9272型電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司），QE-10A型高速粉碎機（武義科技有限公司），R-210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士BUCHI公司）。

1.4 中藥活性部位提取

將上述中藥在小型粉碎機上粉碎，過10目篩制成粗粉，每味中藥分別稱取40 g放入圓底燒瓶，分別用純水和80%乙醇電熱套加熱提取2次，第1次加8倍量溶劑，第2次加6倍量溶劑，每次提取時間為1 h；提取完畢后，抽濾，將2次濾液合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮，最后得到較濃油狀或漿狀的原粉粗體物，經(jīng)體積測量，濃縮液1 mL相當(dāng)于1 g原藥材，即濃度為1 g/mL。供生物測定試驗使用。

1.5 生物測定方法

1.5.1 載玻片浸漬法 參照聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織推薦的測定螨類抗藥性的標準方法——載玻片浸漬法[7]加以改進。粘在玻片雙面膠帶上的供試螨在溫度（26±1）℃、濕度60%～80%的室內(nèi)環(huán)境下放置4 h，然后用雙目解剖鏡檢查，剔除死亡和不活潑的個體，記載總的活螨數(shù)，將帶螨的一端浸入事先配好的藥液中，6 s后取出，迅速用剪好的三角濾紙將周圍多余的水吸干，溫度（26±1）℃、濕度60%～80%，光照明暗交替16 h/8 h培養(yǎng)48 h，每24 h檢查1次。用毛筆輕觸其身體，以螨足不動者為死亡。每個濃度5個處理。實驗重復(fù)3次。

1.5.2 微量點滴法 參照文獻[8]微量點滴法并加以改進。在培養(yǎng)皿中墊入濾紙，保濕，剪取新鮮油菜葉放入培養(yǎng)皿中。將每味中藥提取液分別稀釋5個不同系列濃度，由低濃度開始給甘藍蚜給藥，用虹吸管取1 μL點滴在甘藍蚜背部，分別在24 h和48 h進行觀察，用毛筆輕觸蟲體，不動者視為死亡。實驗重復(fù)3次。

1.5.3 蟲體浸漬法 在培養(yǎng)皿中墊入濾紙，保濕，剪取新鮮小麥葉子放入培養(yǎng)皿中。將提取液稀釋為5個不同系列濃度，倒入小燒杯中，挑取同日齡同樣大小黏蟲10只（每個濃度各10只），將其蟲體浸漬在藥液中10 s，將其表面液體用濾紙吸干，然后用鑷子輕輕夾起，放入培養(yǎng)皿中，將培養(yǎng)皿放入25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中，24 h和48 h檢查死亡情況，用毛筆輕觸身體，不動者和不能爬行者視為死亡。實驗重復(fù)3次。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

采用Excel2003和SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析，以校正死亡率來表示實驗結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 載玻片浸漬法對朱砂葉螨的觸殺作用

中藥醇提物作用優(yōu)于中藥水提物，中藥水提物幾乎無作用，見表1?？嗥ぬ佟⒖鄥?、蒼耳子、甘遂、百部醇提物分別對朱砂葉螨具有很強的觸殺作用，毒力較強。從校正死亡率分析，在相同濃度下，苦皮藤、苦參、蒼耳子、甘遂、百部對朱砂葉螨觸殺作用較其他5味藥強。當(dāng)這5味藥醇提物按照一定比例配伍后，單味藥稀釋100倍，其校正死亡率明顯高于單味藥醇提物，見表2。

2.2 微量點滴法對甘藍蚜的觸殺作用

醇提物作用明顯優(yōu)于水提物，瑞香狼毒、百部、藜蘆、蒼耳子乙醇提取物對甘藍蚜有較強的殺滅作用，見表3。從校正死亡率分析，瑞香狼毒、百部、藜蘆、蒼耳子醇提物在相同的濃度下校正死亡率明顯高于其他幾味藥和中藥水提物，將這4味藥醇提物按照一定比例配伍后，復(fù)合物校正死亡率明顯高于單味藥，見表4。

2.3 采用蟲體浸漬法對黏蟲的觸殺作用

10味中藥水和醇提物對黏蟲的觸殺實驗中，只有百部醇提物對黏蟲具有觸殺作用，且毒力較強，其他幾味中藥水和醇提物均無作用。5次重復(fù)實驗后其校正死亡率為96.7%。

3 討論

采用10種中藥提取物，以載玻片浸漬法、微量點滴法、蟲體浸漬法分別實驗。結(jié)果表明，中藥水提物對害蟲無抑制作用和觸殺作用；但醇提物作用較好，百部對黏蟲、蚜蟲、朱砂葉螨均有觸殺作用，苦皮藤、苦參、蒼耳子、甘遂醇提物對朱砂葉螨觸殺作用較好，瑞香狼毒、百部、藜蘆、蒼耳子對甘藍蚜觸殺作用較好；經(jīng)混配后其觸殺作用增強。

10種常用殺蟲中藥分別來自不同的科，其不但在治療疾病的時候有很好的療效，而且由于它們的偏性，對植物蟲害也有防治作用。其中，瑞香狼毒、藜蘆、甘遂、雷公藤、蒼耳子均為有毒性的中藥，以其毒性來防治病蟲害早有研究，其單味藥及從中分離出來的化學(xué)成分對害蟲有觸殺作用。有研究顯示，藜蘆堿、苦參堿、魚藤酮和煙堿苦參堿對害蟲具有較強的胃毒和觸殺作用[7-8]，但中藥混配作用觸殺害蟲的實驗報道目前較少。本實驗經(jīng)過單味藥篩選后，經(jīng)中藥混配研究，發(fā)現(xiàn)中藥混配其藥效明顯強于單味藥，其藥效學(xué)機理及有效成分有待進一步研究。

另外，本實驗僅為室內(nèi)毒力測定，未涉及田間藥效，為準確評價所試藥劑對害蟲的毒殺作用，今后應(yīng)對田間防效試驗做進一步研究。

參考文獻：

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（收稿日期：2015-11-18）

（修回日期：2015-11-28；編輯：華強）